TAHFIA 005-2018 植物提取物及其制品中總多酚含量的測定 分光光度法.doc

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T/AHFIA 安徽省食品行業(yè)協(xié)會團體標準 T/AHFIA 005—2018 ????? 植物提取物及其制品中總多酚含量的測定 分光光度法 Determination of total polyphenol in plant extracts and its products Spectrophotometric method 2018 - 12 - 26發(fā)布 2019 - 01 - 15實施 ??安徽省食品行業(yè)協(xié)會??????發(fā)布 T/AHFIA 005—2018 前??言 本標準按照 GB/T 1.1-2009 給出的規(guī)則起草。 本標準由安徽省食品行業(yè)協(xié)會提出并歸口。 本標準起草單位：安徽瑞思威爾科技有限公司、安徽古井貢酒股份有限公司、安徽潤安信科檢測科技有限公司。 本標準主要起草人：陸瑋、劉國英、劉智慧、李安軍、王玉良、何宏魁、王錄、芮君君、楊恩賀。 I T/AHFIA 005—2018 植物提取物及其制品中總多酚含量的測定 分光光度法 A 1 范圍 本標準規(guī)定了植物提取物及其制品中總多酚含量的測定 分光光度法。 本標準適用于藥食同源植物提取物、以提取物為基本原料的相關制品總多酚含量的測定。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法 3 方法原理 本標準采用福林酚分光光度法測定植物提取物及其制品中的總多酚含量。酚類化合物在堿性條件下將磷鎢鉬酸還原，生成藍色的化合物，在一定濃度范圍內，吸光度與酚類化合物的含量成正比，符合朗伯-比爾定律。 4 試劑與材料 4.1 試劑 4.1.1 無水乙醇：分析純。 4.1.2 福林酚試劑：分析純。 4.1.3 碳酸鈉：分析純。 4.1.4 水為符合 GB/T 6682 規(guī)定的一級水。 4.2 試劑配制 4.2.1 碳酸鈉溶液（15%）：精確稱取15 g無水碳酸鈉，用水溶解定容至100 mL。 4.2.2 乙醇溶液（60%）：量取600 mL無水乙醇，用水溶解定容至1000 mL。 4.3 標準品 沒食子酸（C7H6O5，CAS號：149-91-7），純度≥ 99.0%。 4.4 沒食子酸標準儲備液配制 準確稱取20 mg（精確至0.1 mg）沒食子酸標準品，用蒸餾水溶解定容至100 mL，此溶液中沒食子酸含量為200 mg/L。于4℃冰箱中避光保存。 5 儀器與設備 5.1 紫外可見分光光度計：配1 cm比色皿。 5.2 分析天平：感量0.1 mg。 5.3 電熱恒溫水浴鍋：0℃~100℃。 6 分析步驟 6.1 試樣制備 6.1.1 植物提取物試樣 吸取5 mL提取液于100 mL燒杯中，加入30 mL60%乙醇溶液，超聲10min，以60%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶，搖勻，過濾，待測。 6.1.2 植物提取物制品試樣 準確量取40 mL液體于50 mL具塞離心管中，離心，取上清液備用。當上清液基質較復雜時，需過濾至澄清液備用。 6.2 儀器條件 6.2.1 測定波長：778 nm。 6.2.2 比色皿：1 cm。 6.3 標準曲線的制作 準確吸取沒食子酸標準儲備液（4.4）0.0，0.2，0.4，0.6，1.0，1.5 mL分別置于10 mL容量瓶中，用60%乙醇溶液（4.2.2）定容，得到沒食子酸工作液。然后分別移取沒食子酸工作液1.0 mL于10 mL比色管中，加入2.5 mL福林酚試劑（4.1.2），搖勻，加入2.5 mL15%Na2CO3溶液（4.2.1），加水定容至刻度，搖勻。在40℃水浴60min，靜置冷卻20min。配制成濃度為0 mg/L、4 mg/L、8 mg/L、12 mg/L、20 mg/L、30 mg/L的標準系列，測定其吸光度值。以濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線。 6.4 試樣溶液的測定 吸取1.0 mL濾液于10 mL比色管中，加入2.5 mL福林酚試劑（4.1.2），搖勻，加入2.5 mL15%Na2CO3溶液（4.2.1），加水定容至刻度，搖勻。在40℃水浴60min，靜置冷卻20min，測定其吸光度值。根據(jù)標準曲線計算待測液中總多酚的濃度。 7 分析結果表述 總多酚的含量按式（1）計算： ……（1） 式中： X ——樣品中總多酚的含量，單位為毫克每升（mg/L）； c ——由標準曲線計算得出的待測液中總多酚的含量，單位為毫克每升（mg/L）； 10 ——濾液稀釋倍數(shù)； n ——樣品稀釋倍數(shù)。 所得結果應保留至小數(shù)點后一位。 8 精密度 在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。 B _________________________________ _______________________________ 3