高中生物《基因工程的基本操作程序》課件九（19張PPT）（人教版選修3）

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歡迎進入生物課堂 一 2基因工程的基本操作程序 DUCK179制作 復習 基因工程的基本操作步驟 提取目的基因 目的基因與運載體結(jié)合 將目的基因?qū)胧荏w細胞 目的基因的表達和檢測看課本P8的圖 DUCK179制作 一 目的基因的獲取 1 目的基因 主要指的是編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 也可以是一些具有調(diào)控作用的因子2 獲取方法 1 從基因文庫中獲取目的基因 2 人工合成例 利用PCR技術(shù)擴增目的基因 DUCK179制作 從基因文庫中獲取目的基因 什么叫基因文庫 將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷 導入到受體菌的群體中 各個受體菌分別含有這種生物的不同基因 稱為基因文庫 DUCK179制作 基因組文庫與部分基因文庫的關(guān)系 DUCK179制作 基因文庫的構(gòu)建模式圖 通過對受體菌的培養(yǎng)而儲存基因 DUCK179制作 如何從基因文庫中得到所需要的基因 依據(jù) 目的基因的有關(guān)信息 如 根據(jù)基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色體上的位置基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性 DUCK179制作 利用PCR技術(shù)擴增目的基因 PCR 聚合酶鏈式反應 是以DNA變性 復制的某些特性為原理設(shè)計的前提條件是必須對目的基因有一定的了解 需要設(shè)計引物 DUCK179制作 PCR技術(shù)原理及反應過程 原理 DNA雙鏈復制 反應過程 1加熱至90 95 目的基因DNA解鏈2冷卻至55 60 引物結(jié)合到互補DNA鏈3加熱至70 75 熱穩(wěn)定DNA聚合酶從從引物起始互補鏈的合成 DUCK179制作 DUCK179制作 二 基因表達載體的構(gòu)建 1 基因表達載體的組成 復制原點目的基因啟動子終止子標記基因等 思考 作為基因工程表達載體 只需含有目的基因就可以完成任務嗎 為什么 DUCK179制作 啟動子 位于基因的首端的一段特殊的DNA片斷 它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位 有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA 最終獲得蛋白質(zhì) 調(diào)節(jié)基因 操縱基因 結(jié)構(gòu)基因 RNA聚合酶 半乳糖苷酶 酶 酶 啟動子 結(jié)構(gòu)蛋白基因 RNA聚合酶 DUCK179制作 終止子 位于基因的尾端的一段特殊的DNA片斷 能終止mRNA的轉(zhuǎn)錄 標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因 從而將有目的基因的細胞篩選出來 DUCK179制作 總結(jié) 表達載體需由哪幾部分組成 復制原點啟動子目的基因終止子標記基因 它們的作用是 DUCK179制作 三 目的基因?qū)胧荏w細胞 1 導入植物細胞常用的方法是什么 具體過程是怎樣的 2 導入動物細胞常用的方法是什么 基本操作程序是怎樣的 3 導入大腸桿菌的方法是怎樣的 鈣離子有什么作用 哪些細胞可以作為目的基因的受體 DUCK179制作 1 導入到植物細胞常用的方法有農(nóng)桿菌感染法 雙子葉植物和祼子植物 基因槍法 單子葉植物 和花粉通道法2 導入到動物細胞常用的方法是顯微注射法 先提純目的基因 再體外注射入卵細胞或受精卵中 最后將含目的基因的受精卵移植到輸卵管或子宮中發(fā)育成新個體 3 導入到大腸桿菌 原因 時先用Ca2 處理成感受態(tài)后與溶有載體DNA的緩沖液混合 吸收DNA分子 完成轉(zhuǎn)化 DUCK179制作 DUCK179制作 四 目的基因的檢測與鑒定 導入目的基因后需要檢測哪些方面 各采取什么方法 什么是DNA分子探針 檢測時的DNA探針通過什么原理來檢測目的基因和相應的mRNA 利用抗體 抗原雜交檢測的原理是什么 DUCK179制作 四 目的基因的檢測與鑒定 1 分子水平的檢測 分子雜交技術(shù)2 個體生物學水平的簽定 DUCK179制作 同學們 來學校和回家的路上要注意安全 同學們 來學校和回家的路上要注意安全