2019-2020年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過(guò)關(guān)練 考點(diǎn)45 基因工程.doc

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2019-2020年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過(guò)關(guān)練 考點(diǎn)45 基因工程 1．[xx天津高考]為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過(guò)分子檢測(cè)的是 A．?dāng)y帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選 B．產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素－8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選 C．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定 D．21三體綜合征的診斷 解析：可通過(guò)將受體菌接種在含鏈霉素的培養(yǎng)基中篩選攜帶鏈霉素抗性基因的受體菌，A錯(cuò)誤；抗人白細(xì)胞介素的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)通過(guò)抗原－抗體雜交技術(shù)篩選產(chǎn)生，B正確；在棉花田中人工放入害蟲(chóng)可檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)效果，C錯(cuò)誤；可利用顯微鏡檢測(cè)21三體綜合征，D錯(cuò)誤。 答案：B 2．[xx廣東高考改編]利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是(　　) A．過(guò)程①需使用DNA聚合酶 B．過(guò)程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因 C．過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備 D．過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞 解析：過(guò)程①是以RNA為模板合成DNA的過(guò)程，即逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，故A錯(cuò)誤；過(guò)程②表示利用PCR擴(kuò)增目的基因，在PCR過(guò)程中，不需要解旋酶，是通過(guò)控制溫度來(lái)達(dá)到解旋的目的，故B錯(cuò)；利用氯化鈣處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，故C錯(cuò)；檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA中，可以采用DNA分子雜交技術(shù)，故D正確 答案：D 3．[xx重慶高考]如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是(　　) A．②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與 B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上 C．④的染色體上若含抗蟲(chóng)基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀 D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異 解析：構(gòu)建表達(dá)載體需要限制酶和DNA連接酶，A錯(cuò)誤；③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒上的T－DNA整合到④的染色體上，B錯(cuò)誤；染色體上含有目的基因，但目的基因也可能不能轉(zhuǎn)錄或者不能翻譯，或者表達(dá)的蛋白質(zhì)不具有生物活性，C錯(cuò)誤；植株表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀，說(shuō)明含有目的基因，屬于基因重組，為可遺傳變異，D正確。 答案：D 4．[xx江蘇高考改編]下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，正確的是(　　) A．切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列 B．PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng) C．載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因 D．抗蟲(chóng)基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá) 解析：限制性核酸內(nèi)切酶大多是特異性識(shí)別6個(gè)核苷酸序列，但也有識(shí)別序列由4、5或8個(gè)核苷酸組成的，A錯(cuò)誤；PCR中耐高溫的DNA聚合酶只是在延伸階段發(fā)揮催化作用，B項(xiàng)錯(cuò)誤；載體質(zhì)粒上抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇，不是抗生素合成基因，C錯(cuò)誤；目的基因?qū)肓耸荏w細(xì)胞不一定就都能正常表達(dá)，D正確。 答案：D 5．[xx課標(biāo)全國(guó)卷Ⅱ]植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。 回答下列問(wèn)題： (1)理論上，基因組文庫(kù)含有生物的________基因；而cDNA文庫(kù)中含有生物的________基因。 (2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫(kù)，再?gòu)闹衉_______出所需的耐旱基因。 (3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入植物________的體細(xì)胞中，經(jīng)過(guò)一系列的過(guò)程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中正確表達(dá)，應(yīng)檢測(cè)此再生植株中該基因的________，如果檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性，再在田間試驗(yàn)中檢測(cè)植株的________是否得到提高。 (4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了________(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。 解析：(1)基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和cDNA文庫(kù)，基因組文庫(kù)包含生物基因組的全部基因，cDNA文庫(kù)是以mRNA反轉(zhuǎn)錄后構(gòu)建的，只含有已經(jīng)表達(dá)的基因(并不是所有基因都會(huì)表達(dá))，即部分基因。 (2)從基因文庫(kù)中獲取目的基因需要進(jìn)行篩選。 (3)要提高植物乙的耐旱性，需要利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細(xì)胞中。要檢測(cè)目的基因(耐旱基因)是否表達(dá)應(yīng)該用抗原抗體雜交檢測(cè)目的基因(耐旱基因)的表達(dá)產(chǎn)物(即耐旱的相關(guān)蛋白質(zhì))；個(gè)體水平檢測(cè)可以通過(guò)田間實(shí)驗(yàn)，觀察檢測(cè)其耐旱性情況。 (4)如果耐旱基因整合到同源染色體的兩條上，則子代將全部表現(xiàn)耐旱，不會(huì)出現(xiàn)性狀分離。或“如果耐旱基因整合到同源染色體的一條上，則轉(zhuǎn)基因植株的基因型可以用A_表示(A表示耐旱基因，_表示另一條染色體上沒(méi)有相應(yīng)的基因)，A_自交后代基因型為AA∶A_∶_ _＝1∶2∶1，所以耐旱∶不耐旱＝3∶1，與題意相符。 答案：(1)全部　部分　(2)篩選　(3)乙　表達(dá)產(chǎn)物　耐旱性　(4)同源染色體的一條上 6．[xx天津高考]嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β－葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開(kāi)展了以下試驗(yàn)： Ⅰ．利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶 (1)PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，選用________基因組DNA作模板。 (2)上圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入________和________不同限制酶的識(shí)別序列。 (3)大腸桿菌不能降解纖維素，但轉(zhuǎn)入上述建構(gòu)好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力，這是因?yàn)開(kāi)____________________________________________。 Ⅱ．溫度對(duì)BglB酶活性的影響 (4)據(jù)圖1、2可知，80 ℃保溫30分鐘后，BglB酶會(huì)________；為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好控制在________(單選)。 A．50 ℃　 B．60 ℃ C．70 ℃　 D．80 ℃ Ⅲ．利用分子育種技術(shù)提高BglB酶的熱穩(wěn)定性 在PCR擴(kuò)增bglB基因的過(guò)程中，加入誘變劑可提高bglB基因的突變率。經(jīng)過(guò)篩選，可獲得能表達(dá)出熱穩(wěn)定性高的BglB酶的基因。 (5)(多選)與用誘變劑直接處理嗜熱土壤芽胞桿菌相比，上述育種技術(shù)獲得熱穩(wěn)定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR過(guò)程中________。 A．僅針對(duì)bglB基因進(jìn)行誘變 B．bglB基因產(chǎn)生了定向突變 C．bglB基因可快速累積突變 D．bglB基因突變不會(huì)導(dǎo)致酶的氨基酸數(shù)目改變 解析：(1)bglB基因存在于嗜熱土壤芽孢桿菌基因組中，故應(yīng)以該菌的基因組DNA為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增。 (2)目的基因與質(zhì)粒進(jìn)行重組時(shí)，需將目的基因插入到啟動(dòng)子和終止子之間，且應(yīng)靠近啟動(dòng)子和終止子，結(jié)合示意圖可知，應(yīng)在擴(kuò)增的bglB基因兩端分別引入NdeⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識(shí)別序列。 (3)該基因表達(dá)載體中含有bglB基因，其可表達(dá)產(chǎn)生β－葡萄糖苷酶，其可分解纖維素，這樣大腸桿菌就獲得了分解纖維素的能力。 (4)由圖2可知，BglB酶在80 ℃保溫30分鐘后，該酶就會(huì)失活；由圖1可知，當(dāng)溫度為60 ℃～70 ℃時(shí)，酶活性較高，而由圖2可知70 ℃時(shí)保溫30分鐘，酶活性開(kāi)始減弱，而60 ℃保溫30分鐘后酶活性基本不發(fā)生變化，由此可知為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好應(yīng)控制在60 ℃，故選B。 (5)在bglB基因擴(kuò)增過(guò)程中加入誘變劑進(jìn)行誘變處理，相比于誘變劑直接處理嗜熱土壤芽孢桿菌，針對(duì)性更強(qiáng)；基因突變是不定向的；由于PCR過(guò)程基因擴(kuò)增即DNA復(fù)制快速進(jìn)行，發(fā)生突變后可進(jìn)行快速積累，進(jìn)而便于篩選；基因突變可能導(dǎo)致氨基酸數(shù)目的改變，如突變后的密碼子變?yōu)榻K止密碼子，可導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成提前終止，進(jìn)而導(dǎo)致氨基酸數(shù)目變少。 答案：(1)嗜熱土壤芽孢桿菌　(2)NdeⅠ BamHⅠ　(3)轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶　(4)失活　B　(5)AC 7．[xx海南高考]下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖。 請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在________酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在________ 作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的________序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的________序列，再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。 (2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有________、________、4種脫氧核苷酸三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成。 (3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為_(kāi)_______。 (4)在基因工程中，常用Ca2＋處理D，其目的是____________________________。 解析：(1)利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過(guò)程是：以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成雙鏈DNA分子；根據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過(guò)程是：根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)DNA中脫氧核苷酸的排列順序，通過(guò)化學(xué)方法合成。(2)PCR過(guò)程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。(3)目的基因和運(yùn)載體結(jié)合，形成基因表達(dá)載體。(4)有利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí)，需要先用Ca2＋處理，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于吸收重組DNA分子 答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄　DNA聚合　氨基酸　脫氧核苷酸　(2)引物　(目的基因或A基因)模板　(3)基因表達(dá)載體　(4)使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子 1．[xx北京西城期末]下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是(　　) A．用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割載體與含目的基因的DNA片段可獲相同黏性末端 B．以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同 C．檢測(cè)到受體細(xì)胞中含有目的基因就標(biāo)志著基因工程育種已經(jīng)成功 D．質(zhì)粒上的抗生素抗性基因有利于質(zhì)粒與外源基因連接 解析：本題主要考查基因工程的知識(shí)，考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。由于用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割載體與含目的基因的DNA片段，得到的黏性末端遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，可獲相同黏性末端；由于氨基酸可對(duì)應(yīng)多種密碼子，以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列可能不同；目的基因成功表達(dá)出相應(yīng)的基因產(chǎn)物標(biāo)志著基因工程育種已經(jīng)成功；質(zhì)粒上的抗生素抗性基因是標(biāo)記基因，利于檢測(cè)是否導(dǎo)入目的基因。 答案：A 2．[xx汕頭市高考模擬]玉米的PEPC酶固定CO2的能力較水稻的強(qiáng)60倍。我國(guó)科學(xué)家正致力于將玉米的PEPC基因?qū)胨局?，以提高水稻產(chǎn)量。下列各項(xiàng)對(duì)此研究的分析中正確的是 A．核心步驟是構(gòu)建玉米PEPC基因表達(dá)載體 B．通常采用顯微注射法將PEPC基因?qū)胨炯?xì)胞 C．在受體細(xì)胞中檢測(cè)到PEPC酶則意味著此項(xiàng)研究取得成功 D．利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞培育成植株 解析：本題主要考查基因工程應(yīng)用的知識(shí)；意在考查考生理解和分析能力。基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，A正確； 目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法，B錯(cuò)誤；只有目的基因在后代細(xì)胞中表達(dá)才能說(shuō)明研究成功，C錯(cuò)誤；利用組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞培育成植株，D錯(cuò)誤。 答案：A 3．[xx石家莊高三模擬]下列說(shuō)法正確的是(　　) A．蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的都是獲得人類需要的蛋白質(zhì)，所以二者沒(méi)有區(qū)別 B．基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù) C．通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)有的仍然是天然的蛋白質(zhì) D．蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上直接改造蛋白質(zhì)的 解析：本題主要考查蛋白質(zhì)工程的知識(shí)；意在考查考生識(shí)記和理解能力。蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求，對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)。其中，基因工程是關(guān)鍵技術(shù)，是蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)。因?yàn)閷?duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改造是通過(guò)改造基因而實(shí)現(xiàn)的，所以蛋白質(zhì)工程是在基因水平上改造蛋白質(zhì)，改造后的蛋白質(zhì)不再是天然的蛋白質(zhì)。 答案：B 4．[xx天津和平區(qū)期末]下列有關(guān)PCR技術(shù)的說(shuō)法不正確的是(　　) A．PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù) B．PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制 C．利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有—段已知目的基因的核苷酸序列 D．PCR技術(shù)中必須有解旋酶才能解開(kāi)雙鏈DNA 解析：本題考查PCR技術(shù)的過(guò)程的知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。PCR技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，原理是DNA的復(fù)制；利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有—段已知目的基因的核苷酸序列；PCR技術(shù)中可以是解旋酶才能解開(kāi)雙鏈DNA，也可以通過(guò)高溫解開(kāi)雙鏈DNA。 答案：D 5．[xx浙江省“六市六校”聯(lián)考]下列與基因工程載體有關(guān)的敘述正確的是(　　) A．質(zhì)粒是最常用的載體，在細(xì)菌中以獨(dú)立于擬核之外的方式存在 B．質(zhì)粒作為載體的原因之一是它為環(huán)狀，便于切割后與目的基因連接 C．載體中的標(biāo)記基因可促進(jìn)目的基因的表達(dá) D．當(dāng)受體細(xì)胞為大腸桿菌時(shí)，多種噬菌體均可作為載體，如λ噬菌體和T2噬菌體 解析：本題主要考查基因工程的知識(shí)；意在考查考生識(shí)記和理解能力。質(zhì)粒是最常用的載體，在細(xì)菌中以獨(dú)立于擬核之外的方式存在，A正確；質(zhì)粒之所以能作為載體，是由于能在受體細(xì)胞中大量增殖；含有1個(gè)或多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶的切點(diǎn)，以便與外源基因連接；具有某些標(biāo)記基因，以便進(jìn)行篩選，B錯(cuò)誤；載體中的標(biāo)記基因只是便于篩選，并不是促進(jìn)目的基因表達(dá)，C錯(cuò)誤；當(dāng)受體細(xì)胞為大腸桿菌時(shí)，并不是多種噬菌體均可作為載體，λ噬菌體是溫和型，T2噬菌體是致死型，載體進(jìn)入受體細(xì)胞中要大量復(fù)制，同時(shí)還要帶著目的基因在受體中進(jìn)行表達(dá)，D錯(cuò)誤 答案：A 6．[xx江西八校聯(lián)考]轉(zhuǎn)基因生物可用于生產(chǎn)人類所需要的藥用蛋白，如激素、抗體、疫苗、酶等。下圖1是通過(guò)生物工程培育能產(chǎn)生人胰島素?zé)煵莸倪^(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。 (1)基因工程的核心步驟是________(填字母)。此過(guò)程所需的工具酶是________________________________________________________________________。 (2)下圖2是運(yùn)載體和反轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因的片段，已知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。GeneⅠ和GeneⅡ?yàn)橘|(zhì)粒上的標(biāo)記基因，據(jù)圖分析，應(yīng)用限制酶________切割質(zhì)粒，用限制酶________切割目的基因。構(gòu)建的重組質(zhì)粒中，除含有外源基因、標(biāo)記基因外，還必須含有________和________。 (3)圖1 B過(guò)程中，常用________處理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞，從而利于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。 (4)如果從分子水平檢測(cè)人胰島素基因是否表達(dá)成功，可以采用______________ __________方法。 圖2 解析：(1)基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。 (2)限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—，如果用限制酶Ⅱ?qū)|(zhì)粒切割，會(huì)將質(zhì)粒切兩段，不易做運(yùn)載體，如果用限制酶I切割目的基因只能切取一側(cè)，不能獲取目的基因。構(gòu)建的重組質(zhì)粒須有啟動(dòng)子和終止子，否則不能轉(zhuǎn)錄合成RNA及轉(zhuǎn)錄過(guò)程無(wú)法結(jié)束。 (3)將目的基因?qū)胛⑸铮Ｓ肅a2＋處理使細(xì)菌成為感受態(tài)細(xì)胞，使表達(dá)載體容易進(jìn)入受體菌。 (4)胰島素基因是否表達(dá)成功，在分子水平上就是能否合成出胰島素分子，分子水平的檢測(cè)用抗原—抗體雜交法進(jìn)行。 答案：(1)A　限制酶和DNA連接酶　(2)Ⅰ?、颉?dòng)子　終止子　(3)Ca2＋　(4)抗原—抗體雜交 7．[xx東城區(qū)普通校聯(lián)考]長(zhǎng)期以來(lái) ，香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴(yán)重威脅 ，制約了其發(fā)展。目前 ，隨著轉(zhuǎn)基因抗病香蕉基因工程技術(shù)的日趨成熟 ，為培育抗病香蕉品種開(kāi)辟了新途徑。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示，質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答： (1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶________，對(duì)__________________進(jìn)行切割。 (2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有________，作為標(biāo)記基因。 (3)能使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是：________ (填字母序號(hào))。 A．啟動(dòng)子　 B．終止子 C．復(fù)制原點(diǎn)　 D．標(biāo)記基因 (4)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用方法有多種，圖中所示方法為_(kāi)_______________________________________________________________________。 (5)欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可采用的技術(shù)________ (填字母序號(hào))。 A．核酸分子雜交　 B．基因序列分析 C．抗原－抗體雜交　 D．PCR (6)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。香蕉組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須含有________________等植物激素，它們會(huì)在________(填圖中標(biāo)號(hào))階段發(fā)揮作用，同時(shí)________(填圖中標(biāo)號(hào))階段還需要給予一定光照。 (7)從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過(guò)程中，需經(jīng)過(guò)________。(填數(shù)字) ①無(wú)絲分裂?、谟薪z分裂?、蹨p數(shù)分裂　④ 原代培養(yǎng)?、?傳代培養(yǎng)?、?植物體細(xì)胞雜交?、?細(xì)胞融合　⑧ 脫分化?、?再分化 解析：本題主要考查基因工程的知識(shí)；意在考查考生識(shí)記和理解能力。(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，要保證目的基因完整，因此需用PstⅠ和 EcoRⅠ對(duì)含抗病基因的DNA進(jìn)行切割。(2)利用含卡那霉素培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，則需作為載體的質(zhì)粒中含有抗卡那霉素基因。(3)調(diào)控基因表達(dá)的序列為啟動(dòng)子和終止子。(4)常用的將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(5)欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功需用抗原—抗體雜交法。(6)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需含有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。兩種激素在①脫分化和②再分化階段發(fā)揮作用，需在再分化的過(guò)程中給予光照，以便植物產(chǎn)生葉綠體。(7)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中包括脫分化和再分化，在此過(guò)程中存在的分裂方式為有絲分裂。 答案：(1)PstⅠ和EcoRⅠ(答全給分)　含抗病基因的DNA、質(zhì)粒(答全給分)　(2)抗卡那霉素基因　(3)AB　(4)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法　(5) C　(6) 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素?、俸廷凇、凇?7)②⑧⑨ 1．據(jù)報(bào)道，“基因起源”工程學(xué)可以在胚胎中永久地摘除、添加和改變基因，保證特定的基因特征會(huì)或者不會(huì)被以后世世代代所復(fù)制，下列有關(guān)基因工程及“基因起源”工程學(xué)的敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．基因工程能夠在分子水平上定向地改變生物的遺傳性狀 B．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心 C．目前常用顯微注射技術(shù)把目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 D．據(jù)題干信息推測(cè)將來(lái)有可能“定做寶寶” 解析：選項(xiàng)A，利用基因工程能夠在DNA分子水平按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來(lái)，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞內(nèi)，定向地改變生物的遺傳性狀。選項(xiàng)B，基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。選項(xiàng)C，目前常利用顯微注射技術(shù)把目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞，而不是微生物，選項(xiàng)D，利用“基因起源”工程學(xué)可以決定某些基因的“去留”，所以依據(jù)題干信息，將來(lái)有可能“定做寶寶”。 答案：C 2．假如轉(zhuǎn)基因黃豆中有能表達(dá)埃博拉病毒表面抗原的基因，由此可獲得用來(lái)預(yù)防埃博拉病毒的一種新型疫苗，其培育過(guò)程如圖所示(①－③代表過(guò)程，A－C代表結(jié)構(gòu)或細(xì)胞)。 (1)圖中①過(guò)程用到的酶是________、________，所形成的B叫做________，由________、目的基因和標(biāo)記基因等部分構(gòu)成。 (2)②過(guò)程常用________處理農(nóng)桿菌，使之成為_(kāi)_______細(xì)胞。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為_(kāi)_______。 (3)圖中C結(jié)構(gòu)叫做________，采用其作為受體細(xì)胞是因?yàn)樗腳_______。 解析：(1)獲取目的基因要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，重組質(zhì)粒由目的基因和標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子四部分組成。(2)農(nóng)桿菌用CaCl2溶液處理后，處于感受態(tài)，外源DNA更容易進(jìn)入。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程叫做轉(zhuǎn)化。(3)C結(jié)構(gòu)是愈傷組織，常用作受體細(xì)胞是因?yàn)槠渚哂腥苄浴? 答案：(1)限制性核酸內(nèi)切酶　DNA連接酶　重組質(zhì)?！?dòng)子、終止子　(2)CaCl2溶液　感受態(tài)　轉(zhuǎn)化　(3)愈傷組織　全能性