微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室ppt課件

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第三節(jié) 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物,微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室獲得性感染:指任何與微生物實(shí)驗(yàn)室有關(guān)的感染. 感染源:該實(shí)驗(yàn)室研究的對(duì)象微生物和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境微生物.,一 生境特征,(一)研究對(duì)象多具有感染性 1國(guó)際上對(duì)微生物危險(xiǎn)性的分級(jí)尚無(wú)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，但根據(jù)微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的危害性和外逸出實(shí)驗(yàn)室后的危害程度，多將微生物的危險(xiǎn)性分為4級(jí).,,,2 我國(guó)1級(jí)危險(xiǎn)性微生物(與WHO的Ⅳ級(jí)相對(duì)應(yīng))，指對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和外環(huán)境非常危險(xiǎn)、實(shí)驗(yàn)室感染機(jī)會(huì)多、感染后病情嚴(yán)重、無(wú)特效藥物治療、易致死的微生物，這類微生物也可能引發(fā)大的疫情。 因此，必須在特別實(shí)驗(yàn)室中操作，實(shí)驗(yàn)設(shè)施要求完善、規(guī)范；操作人員必須經(jīng)過(guò)專門訓(xùn)練并具有相應(yīng)工作經(jīng)驗(yàn)和水平，同時(shí)需要接種疫苗防護(hù)。,3 我國(guó)2級(jí)危險(xiǎn)性微生物(與WHO的Ⅲ級(jí)相對(duì)應(yīng))，指對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和外環(huán)境有特殊危險(xiǎn)、雖然有特異性免疫制劑和特效藥物治療但能引起嚴(yán)重感染并可能導(dǎo)致死亡，或本國(guó)、本地區(qū)原本沒(méi)有的致病微生物。對(duì)實(shí)驗(yàn)室和操作人員的要求與1級(jí)水平相似，實(shí)驗(yàn)人員需適當(dāng)免疫。,4 我國(guó)3級(jí)危險(xiǎn)性微生物(與WHO的Ⅱ級(jí)相對(duì)應(yīng))，指有潛在危險(xiǎn)性的微生物，可能引起不同程度的疾病。應(yīng)由具有一定能力的技術(shù)人員在具有良好設(shè)備的普通實(shí)驗(yàn)室或有一定條件的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中操作，并有標(biāo)準(zhǔn)的防護(hù)措施。,,5我國(guó)4級(jí)非致病性微生物(與WHO的I級(jí)相對(duì)應(yīng))，可在普通實(shí)驗(yàn)室中、經(jīng)非專門訓(xùn)練過(guò)的人員操作，不需特殊的防護(hù)措施。,(二)廢棄物多具有感染性 隔離廢棄物(與隔離病人有關(guān)的廢棄物)、傳染性病原體的培養(yǎng)物和儲(chǔ)存物、人血和血檢材、病理性廢棄物、手術(shù)和尸檢污染性廢棄物、污染的實(shí)驗(yàn)室廢棄物、污染的利器(皮下針頭、吸管、碎玻璃及手術(shù)刀片等)、污染的器具等。,(三)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室是具有污染性的危險(xiǎn)環(huán)境 WHO(1979)根據(jù)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員危害性的大小，將微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室分為三種： ①微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室 ②微生物學(xué)污染實(shí)驗(yàn)室：對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員具有中等危險(xiǎn)性，用于研究3級(jí)微生物。,③微生物學(xué)高度污染實(shí)驗(yàn)室：對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員及公眾具有特別的危險(xiǎn)性，用于從事研究4級(jí)(A級(jí))病原微生物。 (四)消毒，滅菌等方法不當(dāng)?shù)倪x擇性壓力,二、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物來(lái)源、種類、分布及其衛(wèi)生學(xué)意義,(一)微生物來(lái)源與途徑 1接種器材 接種環(huán)應(yīng)完全封閉、內(nèi)徑宜2～3um，以防止自發(fā)反彈或菌膜破裂而灑落細(xì)菌；環(huán)桿不得長(zhǎng)于5—6cm，以防止顫動(dòng)而灑落細(xì)菌,2．移液管 3 離心管 4．?dāng)嚢琛⒒靹蚝驼鹗?5．開(kāi)啟安瓿 6．感染性物質(zhì)傾注 7．來(lái)自實(shí)驗(yàn)者的污染,( 二)種類及其衛(wèi)生學(xué)意義 1 Pike等作過(guò)三次很有意義的調(diào)查，位于前10位的微生物種類見(jiàn)表14—9。,,,,2 各種類型微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的感染發(fā)生情況 科研單位最高 加強(qiáng)管理和人員培訓(xùn),,,(三)實(shí)驗(yàn)室感染的危害性 1細(xì)菌類病原微生物 (1)布魯氏菌 傳播和感染發(fā)生主要是通過(guò)感染性氣溶膠的產(chǎn)生而導(dǎo)致的，其次是直接接觸導(dǎo)致感染。 美國(guó)密執(zhí)安州立大學(xué),(2)土拉弗氏菌 l912年在美國(guó)西部加利福尼亞州研究黃鼠鼠疫時(shí)首次分離出的，當(dāng)時(shí)命名為土拉桿菌,該菌對(duì)低溫抵抗力強(qiáng)，在氣溶膠狀態(tài)下存活率較高，經(jīng)常發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染。,(3) 結(jié)核桿菌 在美國(guó)Utah州，實(shí)驗(yàn)室工作人員結(jié)核病的年發(fā)病率為0.3／1000(Jacobson，1985)。而Muller(1988)報(bào)告在德國(guó)、奧地利和瑞士的77個(gè)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室中，工作人員的感染發(fā)病率為26.3／1000，這大約是普通人群發(fā)病率的100倍。,(4)衣原體 對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員有潛在危險(xiǎn)的衣原體有鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體和沙眼衣原體。,(5) Q熱立克次體 對(duì)干燥環(huán)境有明顯的抵抗力,對(duì)人半數(shù)吸入感染劑量小,ID50為10個(gè)菌. Q熱立克次體感染主要來(lái)自于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室. (6)其他細(xì)菌 在美國(guó)，于1941年、1951年和1958年先后發(fā)生3次炭疽桿菌污染實(shí)驗(yàn)室的空氣，導(dǎo)致工作人員吸人感染性氣溶膠而致病的病例。,2 病毒類病原體 (1)天花病毒 歐洲和北美發(fā)達(dá)國(guó)家都在20世紀(jì)50年代基本消滅了天花，但在60～70年代，卻發(fā)生多起實(shí)驗(yàn)室感染或醫(yī)院、實(shí)驗(yàn)室外逸而傳播感染的事故。 1978年英國(guó)伯明翰大學(xué),(2)漢坦病毒 我國(guó)從1964～1988年先后發(fā)生20多例實(shí)驗(yàn)室感染，分析可能是空氣傳播引起的吸人感染。 漢城大學(xué) 日本,三微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物學(xué)的檢測(cè)及其衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),1．微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的空氣微生物學(xué)檢測(cè)及其衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 與室內(nèi)空氣微生物檢測(cè)及其衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)基本相同,,2．微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的物體表面微生物學(xué)檢測(cè)及其衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 與公共場(chǎng)所微生物的檢測(cè)及其衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)基本相同 3．高壓蒸汽滅菌質(zhì)量控制 有化學(xué)方法和生物方法。,四微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物的污染及其預(yù)防,1 污染 (1)微生物氣溶膠經(jīng)呼吸道感染 (2)接觸感染,,2 預(yù)防措施 (1)空氣的消毒 (2)物體表面的消毒,(3)技術(shù)操作環(huán)節(jié) 應(yīng)注意的技術(shù)操作過(guò)程主要有：注射、接種、混勻、研磨、移液、離心、傾倒、開(kāi)封和搬運(yùn)等.,,(4)設(shè)施保障 1)實(shí)驗(yàn)室建筑結(jié)構(gòu)與布局合理 根據(jù)研究對(duì)象的危害級(jí)別不同，也相應(yīng)將微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室分為P1～P4四個(gè)級(jí)別,,,2)裝備生物安全柜(biological safety cabinet，BSC) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的P級(jí)別和實(shí)驗(yàn)要求的不同，有Ⅰ一Ⅲ級(jí)BSC。 I級(jí)氣流單向由外至內(nèi)，僅保護(hù)實(shí)驗(yàn)者； Ⅱ級(jí)分A、B兩型，氣流方向包括過(guò)濾的垂直氣流和操作口進(jìn)入的氣幕流，外排氣體經(jīng)高效濾器過(guò)濾，此柜可以保護(hù)工作人員安全也可以保證試驗(yàn)材料不受外面微生物的污染。,,A型安全柜有70%的風(fēng)量在柜內(nèi)過(guò)濾循環(huán)，不能用于易燃物、化學(xué)毒物及有放射性物質(zhì)的操作。 B型柜設(shè)計(jì)為70%的風(fēng)量過(guò)濾后外排，因此可以用于某些化學(xué)毒物的試驗(yàn)。 Ⅲ級(jí)生物安全柜為密閉型，進(jìn)入和外排氣體都經(jīng)高效過(guò)濾，柜內(nèi)為負(fù)壓，通過(guò)特制的密封乳膠手套操作。,(5)制度保障 實(shí)驗(yàn)室管理?xiàng)l例、進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室程序要求、個(gè)人防護(hù)規(guī)則、技術(shù)操作規(guī)范等。,(6 )免疫接種和應(yīng)急措施保障 1）免疫接種,并建立醫(yī)療保障系統(tǒng)，負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室工作人員的疫苗接種、日常疾病監(jiān)查、實(shí)驗(yàn)事故病例的隔離、救治及醫(yī)療檔案的保存。 2）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)備常用的救急包，應(yīng)注意及時(shí)清點(diǎn)補(bǔ)充。急救藥物：消毒液、洗眼液、含漱消毒藥、抗毒素血清,,3)患嚴(yán)重急性呼吸道疾病、懷孕早期（4個(gè)月以內(nèi)）、抵抗力下降、感染性增高或感染后會(huì)出現(xiàn)非常嚴(yán)重后果的工作人員，可暫不做病原微生物工作或調(diào)離強(qiáng)毒室。,第四節(jié) 極端環(huán)境中的微生物,在高溫、低溫、高酸、高堿、高鹽、高壓或高輻射、低營(yíng)養(yǎng)等環(huán)境中，大部分微生物都不適宜生存，仍然有少數(shù)的微生物在頑強(qiáng)地生活著，這類微生物被稱為極端環(huán)境微生物或極端微生物。,一極端環(huán)境的生境特征,1．高溫生境 如溫泉、陸地或海底火山附近、堆肥、家庭及工業(yè)上使用的熱水及冷卻水等。,2．低溫生境 地球的南北極地區(qū)、冰窖、終年積雪的高山、深海和凍土地區(qū)均為低溫生境。 3．高酸生境 指pH 5以下的生境。 4 高堿生境 一般指pH 9以上的生境。,5．高鹽生境 指含2％以上至接近飽和濃度NaCl的生境。 6．高壓生境 在海洋深處以及深油井中還分布著一些嗜壓微生物，壓力達(dá)一千多個(gè)大氣壓，在常壓下它們卻是不能生存的。,