（全國(guó)）2018版高考生物大一輪復(fù)習(xí) 第十三單元 生物技術(shù)實(shí)踐 第47講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案

《（全國(guó)）2018版高考生物大一輪復(fù)習(xí) 第十三單元 生物技術(shù)實(shí)踐 第47講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《（全國(guó)）2018版高考生物大一輪復(fù)習(xí) 第十三單元 生物技術(shù)實(shí)踐 第47講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案（20頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、 第47講　微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 　1.微生物的分離和培養(yǎng)　2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定　3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用　4.利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用 　培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù) 1．培養(yǎng)基 (1)概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。 (2)營(yíng)養(yǎng)組成：一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。此外，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧氣以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求。 (3)分類(lèi) 2．無(wú)菌技術(shù)的主要方法及適用對(duì)象[連一連] 3．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 (1)計(jì)算 (2)稱(chēng)量 (3)溶化 (4)滅菌 (5)倒平板

2、 4．純化大腸桿菌 (1)原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。 (2)主要方法：圖甲可表示用平板劃線法接種獲得的平板；圖乙可表示用稀釋涂布平板法接種獲得的平板。 (3)純化原理：圖甲菌體的分散是通過(guò)一系列的連續(xù)劃線操作實(shí)現(xiàn)的；圖乙菌體的分散是通過(guò)圖丙梯度稀釋和圖丁涂布平板操作實(shí)現(xiàn)的。 5．菌種的保存方法 (1)對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。 (2)對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。 1．培養(yǎng)基的配制原則 (1)目的要明確：配制時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種

3、類(lèi)。 (2)營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。 (3)pH要適宜：細(xì)菌為6.5～7.5，放線菌為7.5～8.5，真菌為5.0～6.0，培養(yǎng)不同微生物所需pH不同。 2.消毒和滅菌的辨析 項(xiàng)目 條件 結(jié)果 常用方法 應(yīng)用范圍 消毒 較為溫 和的物 理或化 學(xué)方法 僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分對(duì)人體有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高溫 的液體 化學(xué)藥劑 消毒法 用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源 滅菌 強(qiáng)烈的 理化因 素 殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼燒滅菌法 接種工具 干熱滅菌法 玻璃器皿、 金

4、屬工具 高壓蒸汽 滅菌法 培養(yǎng)基及容 器的滅菌 3.兩種純化細(xì)菌方法的比較 項(xiàng)目 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 適用范圍 平板劃 線法 可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離 不能計(jì)數(shù) 適用于 好氧菌 稀釋涂 布平板法 可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征 操作復(fù)雜、 需要涂布 多個(gè)平板 適用于厭氧菌 和兼性厭氧菌 (1)認(rèn)清不同生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不同 ①微生物需要的營(yíng)養(yǎng)成分有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源，有些微生物還需要特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如生長(zhǎng)因子。 ②在人和動(dòng)物中，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水、無(wú)機(jī)鹽、糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類(lèi)。 ③在植物中，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括礦質(zhì)元素、水、二氧化碳三類(lèi)。

5、 (2)平板劃線操作的注意事項(xiàng) ①操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的不同： a．第一次操作目的是殺死接種環(huán)上原有的微生物。 b．每次劃線之間操作目的是殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少。 c．劃線結(jié)束操作目的是殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 ②灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。 ③第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁

6、殖而來(lái)的菌落。 ④劃線時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。 ⑤劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。 1．如圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題： (1)圖甲是利用________法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用________法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。 (2)接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進(jìn)行？ ____________________________________________________________________

7、____ ________________________________。 (3)接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？________________________________。 (4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是________(填“圖甲”或“圖乙”)。 解析：圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。 答案：(1)平板劃線　稀釋涂布平板　接種環(huán)　涂布

8、器　灼燒滅菌 (2)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域 (3)避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng) (4)圖乙 2．(2016·高考全國(guó)卷丙，39)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實(shí)驗(yàn)材料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。回答下列問(wèn)題： (1)分離純化乳酸菌時(shí)，首先需要用__________________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)M(jìn)行梯度稀釋的理由是 ________________________________________________________________________ __________________

9、______________________________________________________。 (2)推測(cè)在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有__________________和__________________。分離純化時(shí)應(yīng)挑選出__________________的菌落作為候選菌。 (3)乳酸菌在－20 ℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中常需要加入一定量的________________(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。 解析：(1)分離純化乳酸菌過(guò)程中，需要在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)乳酸菌并得到單菌落。由于泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落，故分離純化乳酸菌時(shí)

10、，首先需要用無(wú)菌水對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋。(2)由于乳酸菌代謝產(chǎn)生的乳酸可以溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，形成透明圈，故培養(yǎng)基中加入碳酸鈣可用于鑒別乳酸菌，同時(shí)碳酸鈣也可以中和乳酸菌產(chǎn)生的乳酸。(3)乳酸菌在－20 ℃長(zhǎng)期保存時(shí)，菌液中需要加入一定量的甘油，加甘油是為了避免水結(jié)冰產(chǎn)生冰晶損傷細(xì)胞。 答案：(1)無(wú)菌水　泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落 (2)鑒別乳酸菌　中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)　具有透明圈 (3)甘油 　土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) (1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕福@種物質(zhì)在把尿

11、素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到催化作用。 (2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用稀釋涂布平板法。 2．實(shí)驗(yàn)流程 (1)土壤取樣→富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層土 ↓ (2)樣品的稀釋→通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間、適于計(jì)數(shù)的平板 ↓ (3)接種→用稀釋涂布平板法接種 ↓ (4)培養(yǎng) ↓ (5)觀察→根據(jù)菌落的特征區(qū)分微生物 ↓ (6)計(jì)數(shù)→統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目 ↓ (7)計(jì)算→根據(jù)公式“每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M[C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)]”進(jìn)行計(jì)算

12、 1．選擇培養(yǎng)基四種常見(jiàn)制備方法或?qū)嵗? 2．兩種計(jì)數(shù)方法的比較 間接計(jì)數(shù)法 (稀釋涂布平板法) 直接計(jì)數(shù)法 (顯微計(jì)數(shù)法) 原理 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌 利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量 公式 每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M C：某稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)；V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)；M：稀釋倍數(shù) 每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格平均細(xì)菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù) 缺點(diǎn) 當(dāng)兩個(gè)或

13、多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 不能區(qū)分細(xì)胞死活 結(jié)果 比實(shí)際值偏小 比實(shí)際值偏大 3.設(shè)置對(duì)照和重復(fù) 比較項(xiàng)目 對(duì)照 重復(fù) 目的 排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 排除偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 實(shí)例 空白對(duì)照：確定培養(yǎng)基制作是否合格 同一稀釋度涂布至少3個(gè)平板 1．“選擇菌落數(shù)在30～300的平板”的兩個(gè)提醒 用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物時(shí)，要求選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。解題時(shí)易出現(xiàn)以下誤解： (1)只得到1個(gè)菌落數(shù)在30～300的平板是錯(cuò)誤的。錯(cuò)誤的原因是不符合實(shí)驗(yàn)的重復(fù)原則，易受到偶然因素的影響。 (2)得到3個(gè)或3個(gè)

14、以上菌落數(shù)在30～300的平板，也不一定正確，這可能有兩種情況： ①不同平板間差異較大，如得到3個(gè)平板，菌落數(shù)分別為230、34、240，雖然菌落數(shù)均在“30～300”，這也是不正確的，因?yàn)椤?4”與“230”“240”差異太大，應(yīng)重新實(shí)驗(yàn)找出原因。 ②不同平板之間差異不大，是符合要求的，用其平均值作為估算的最終結(jié)果。 可見(jiàn)，并不是只要得到3個(gè)“菌落數(shù)在30～300的平板”即可，而應(yīng)該是涂布的同一稀釋度的平板均符合“菌落數(shù)在30～300之間”且無(wú)較大差異，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)操作合格，才能按照計(jì)算公式進(jìn)行計(jì)算。 2．選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基 種類(lèi) 制備方法 原理 用途 舉例 選擇 培養(yǎng)

15、 基 培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì) 依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的特殊需求或抗性而設(shè)計(jì) 從眾多微生物中分離所需的微生物 加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌 鑒別 培養(yǎng) 基 培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品 產(chǎn)生特定的顏色或其他變化 鑒別不同種類(lèi)的微生物 用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌 1．(2016·高考四川卷，10)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。 (1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周?chē)闹甘緞⒆兂? _______

16、_________________________________________________________________色。 (2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過(guò)程采取的接種方法是______________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_(kāi)_______×108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較________。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)

17、終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_(kāi)_______，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含________個(gè)氨基酸。 解析：(1)篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需要添加酚紅作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶可以將尿素分解成氨，導(dǎo)致培養(yǎng)基的pH升高，菌落周?chē)闹甘緞⒆兂杉t色。(2)圖中過(guò)程采取的接種方法是稀釋涂布平板法，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為：(156＋178＋191)/3÷0.1×105＝1.75×108，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法所得數(shù)據(jù)包括死的細(xì)菌，且稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)所計(jì)菌落數(shù)少于真正的活細(xì)菌數(shù)，故與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)

18、法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較少。(3)圖乙從起始密碼算起的堿基序列號(hào)為271，前270個(gè)堿基決定90個(gè)氨基酸，從271位到箭頭處可以決定1個(gè)氨基酸，然后插入70個(gè)核苷酸，可決定23個(gè)氨基酸，多出一個(gè)堿基，加上后面的AG剛好可以決定1個(gè)氨基酸，則后面UGA是終止密碼。因此突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA終止密碼為UGA，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)所含氨基酸數(shù)為90＋1＋23＋1＝115(個(gè))。 答案：(1)尿素　酚紅　紅 (2)稀釋涂布平板法　1.75　少 (3)UGA　115 2．(2016·高考全國(guó)卷乙，39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室

19、內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下： ①配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); ②制作無(wú)菌平板； ③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作； ④將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。 回答下列問(wèn)題： (1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來(lái)源于____________。若要完成步驟②，該培養(yǎng)基中的成分X通常是__________________。 (2)步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是 ____________________________________________________________________

20、____ ________________________________________________________________________。 (3)若在某次調(diào)查中，某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說(shuō)明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了______________現(xiàn)象。若將30(即36－6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法______________(填“正確”或“不正確”)。 解析：(1)牛肉膏、蛋白胨都含有N，可為微生物的生長(zhǎng)提供氮源。制作無(wú)菌平板所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，所以X應(yīng)為瓊脂。(2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍緦?shí)驗(yàn)的自變

21、量為教室的不同高度，因變量為微生物的分布情況，故實(shí)驗(yàn)組的操作應(yīng)為將實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間。(3)空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落，說(shuō)明培養(yǎng)基被污染了，即調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若培養(yǎng)基被污染，必須將其拋棄，重新制作新的培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 答案：(1)牛肉膏、蛋白胨　瓊脂 (2)將實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開(kāi)蓋暴露一段時(shí)間 (3)污染　不正確 　微生物的篩選與鑒別 1．纖維素酶 (1)組成：纖維素酶是一種復(fù)合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 (2)作用 2．菌種篩選 (1)方法：剛果紅染色法。 (2)原理 　　　　

22、　　　　　纖維素分解菌 　　　　　　　　　 ↓ →紅色復(fù)合物紅色消失、出現(xiàn)透明圈。 即：使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 3．篩選流程 土壤取樣：富含纖維素的環(huán)境 ↓ 選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量 ↓ 梯度稀釋 ↓ 涂布平板：將樣品涂布于含CR的鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 ↓ 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈 1．微生物的鑒別方法 (1)菌落特征鑒別法：根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別。 (2)指示劑鑒別法：如以尿素

23、為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅說(shuō)明該種微生物能夠分解尿素。 (3)染色鑒別法：如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來(lái)篩選分解纖維素的微生物。 2．篩選微生物的三種方法 (1)單菌落挑取法：利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。 (2)選擇培養(yǎng)法：利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物。 (3)鑒定培養(yǎng)法：利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物。 3．篩選微生物的兩個(gè)實(shí)例比較 比較 項(xiàng)目 土壤中分解

24、尿素 的細(xì)菌的分離 分解纖維素的 微生物的分離 方法 利用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng) 利用富含纖維素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng) 原理 只有分解尿素的細(xì)菌能夠合成脲酶，才能在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 因?yàn)榕囵B(yǎng)基中含有豐富的纖維素，因此能夠分解纖維素的微生物具有更多的生存機(jī)會(huì)而大量繁殖 鑒別 在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，指示劑變紅說(shuō)明菌落中的菌體為分解尿素的細(xì)菌 剛果紅染色法，周?chē)霈F(xiàn)透明圈的菌落為分解纖維素的微生物的菌落 (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中并不只有纖維素一種碳源。 (2)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的并不只是纖維素分解菌。 (3)

25、纖維素分解菌菌落周?chē)耐该魅Φ拇笮∨c纖維素分解菌分解纖維素的能力呈正相關(guān)。 1．牛奶是微生物生長(zhǎng)的良好培養(yǎng)基。牛奶在飲用前都要經(jīng)過(guò)巴氏消毒，以殺死有害微生物。為檢測(cè)消毒前后牛奶中細(xì)菌含量變化情況，做如圖所示操作。用無(wú)菌吸管從錐形瓶中吸取1 mL生牛奶稀釋液至盛有9 mL無(wú)菌水的試管中，混合均勻，如此再重復(fù)2次。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題： (1)巴氏消毒的方法是 ________________________________________________________________________， 使用這種方法對(duì)生鮮牛奶進(jìn)行消毒的好處是________。 (2)取最終的牛奶

26、稀釋液0.1 mL滴在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇的涂布工具是下圖中的________。 (3)圖中所示方法為稀釋培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時(shí)間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為35個(gè)、33個(gè)、34個(gè)，則可以推測(cè)生牛奶中每毫升含細(xì)菌數(shù)為_(kāi)_______個(gè)，運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值________(填“偏大”或“偏小”)，原因是 ________________________________________________________________________。 (4)從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測(cè)大腸桿菌的

27、方法是在培養(yǎng)基中加入________，菌落具有______________________特征的可以認(rèn)定為大腸桿菌。 答案：(1)70～75 ℃煮30分鐘(或80 ℃煮15分鐘)　牛奶的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞　(2)B　(3)3.4×106　偏小　個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成的　(4)伊紅—美藍(lán)　(金屬光澤的紫)黑色 2．(高考新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ改編)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，C

28、R可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。 (3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見(jiàn)表)： 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖維 素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng) 基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培養(yǎng) 基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示無(wú)。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是____________________

29、____________________________________________________ ________________________________________________________________________； 培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是 ________________________________________________________________________ ______________________________________________________

30、__________________。 解析：(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅是一種染料，可以與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中就會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用于分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，并且培養(yǎng)基中需含有纖維素，才能與CR形成紅色復(fù)合物，有纖維素分解菌時(shí)才能形成以纖維素分解菌為中心的透明

31、圈。 答案：(1)纖維二糖　葡萄糖 (2)紅　透明圈 (3)不能　液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落　不能　培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成CR—纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 3．(2017·河北邯鄲一模)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題： (1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是________________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培

32、養(yǎng)基中的________。實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類(lèi)型是____________。 (3)在上述實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是________________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種，此過(guò)程中所用的接種工具是________，操作時(shí)采用的滅菌方法是________。 (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是 ________________________________________________________________________ ____________________

33、____________________________________________________。 (6)某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106稀釋液進(jìn)行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿，從設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)是__________________________________，此對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是______________________________。 解析：(1)該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選“目的菌”，故培養(yǎng)基中添加的化合物A起選擇作用。(2)微生物正常生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等，由培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)種類(lèi)知：化合物A應(yīng)該給微

34、生物生長(zhǎng)提供碳源、氮源。培養(yǎng)過(guò)程需振蕩，說(shuō)明目的菌是需氧型微生物。(6)統(tǒng)計(jì)污水池中的“目的菌”時(shí)應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照，以用于檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否滅菌嚴(yán)格。 答案：(1)篩選目的菌　選擇　(2)化合物A　異養(yǎng)需氧型　(3)防止外來(lái)雜菌污染　(4)接種環(huán) 灼燒滅菌　(5)防止造成環(huán)境污染　(6)不接種的空白培養(yǎng)基　檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格 課時(shí)作業(yè) 1．(2017·武漢調(diào)研)如表所示為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 葡萄糖 尿素 蒸餾水 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 定容至

35、1 000 mL (1)該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長(zhǎng)，這種培養(yǎng)基稱(chēng)為_(kāi)_______培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基會(huì)抑制其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)，其原因是該培養(yǎng)基 ________________________________________________________________________。 (2)若要通過(guò)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來(lái)估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是________，接種時(shí)應(yīng)采用________________法，該方法接種培養(yǎng)后的菌落，不可能是圖中的________。 (3)從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對(duì)其做進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入__

36、______指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變________，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。 (4)某同學(xué)用0.1 mL稀釋液在稀釋倍數(shù)為106的平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)是________個(gè)。 答案：(1)選擇　以尿素為唯一的氮源 (2)瓊脂　稀釋涂布平板　D (3)酚紅　紅 (4)1.63×109 2．(2017·江西贛中南五校第一次聯(lián)考)如表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)根據(jù)表格和所學(xué)知識(shí)回答下列相關(guān)問(wèn)題： 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑 瓊脂 含量(g) 10.0 5.0 5.0 2

37、.0 0.2 12.0 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (1)從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于________。 (2)若根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。若要用上述培養(yǎng)基來(lái)篩選出土壤中的尿素分解菌，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分必需怎樣更改？________________，并用________作為指示劑。 (3)在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和________。 (4)圖1和圖2是培養(yǎng)某細(xì)菌的結(jié)果圖，其對(duì)應(yīng)的接種方法分別是：________和________

38、，這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖所形成的________。圖1所用的接種方法可用來(lái)對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。此外，測(cè)定微生物數(shù)目的另一種方法是________。 (5)以下過(guò)程中所利用的主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌較相似的有________。 A．制作果酒　　　　　　 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳 解析：(1)大腸桿菌只能從環(huán)境中攝取有機(jī)物，不能自己合成有機(jī)物，屬于分解者。(2)該培養(yǎng)基中含有指示劑，屬于鑒別培養(yǎng)基。尿素分解菌可以分解尿素，而其他微生物不能，因此可將培養(yǎng)基中的蛋白胨改為尿素用于篩選土壤中的尿素分解菌，并用酚紅作為指示劑，尿素分解菌分解尿

39、素產(chǎn)生了氨可使酚紅變紅。(3)培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要滅菌，操作者雙手需要進(jìn)行消毒。(4)圖1采用的是稀釋涂布平板法，圖2采用的是平板劃線法。單個(gè)微生物細(xì)胞繁殖所形成的細(xì)胞群叫菌落。(5)A、B、C、D中所用到的微生物主要是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉，醋酸菌、大腸桿菌和乳酸菌都是原核細(xì)胞，結(jié)構(gòu)相似。 答案：(1)分解者　(2)鑒別　將蛋白胨改成尿素　酚紅 (3)滅菌　消毒　(4)稀釋涂布平板法　平板劃線法　菌落　顯微鏡直接計(jì)數(shù)法　(5)BC 3．臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素

40、的敏感性?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋?zhuān)胈_______法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。 (3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A________；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B________；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，

41、說(shuō)明______________________________；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素________。 解析：(1)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物純化培養(yǎng)時(shí)，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個(gè)菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖，常用玻璃涂布器把稀釋的菌液均勻涂滿整個(gè)平板。(3)對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中還有菌落生存，則說(shuō)明這個(gè)菌

42、落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(guò)(3)可知，在應(yīng)用時(shí)，要想殺死某致病菌，就得選擇能使該致病菌大量死亡，即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。 答案：(1)平板劃線　稀釋涂布平板　(2)稀釋涂布平板 (3)敏感　不敏感　該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱　耐藥菌　(4)A 4．(2017·廣西四市第一次聯(lián)考)如圖是某細(xì)菌純化培養(yǎng)過(guò)程中劃線接種的培養(yǎng)結(jié)果?；卮饐?wèn)題： (1)在________(填圖中編號(hào))區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落，產(chǎn)生每個(gè)菌落的最初細(xì)菌數(shù)目是________個(gè)。據(jù)圖分析，在培養(yǎng)基上劃線接種時(shí)，劃線的順序依次是______(用編號(hào)表示)。 (2)如表是某微生物培養(yǎng)基的成分。 編號(hào) 成分

43、 含量 編號(hào) 成分 含量 ① 粉狀硫 10 g ② (NH4)2SO4 0.4 g ③ K2HPO4 4 g ④ MgSO4 9.25 g ⑤ FeSO4 0.5 g ⑥ CaCl2 0.5 g ⑦ H2O 100 mL ①若培養(yǎng)從土壤中分離出來(lái)的自生固氮菌，該培養(yǎng)基應(yīng)添加________，去除________。 ②若要鑒別纖維素分解菌，可用________法，若要鑒別尿素分解菌，可在培養(yǎng)液中加入 _________________________________________________________________

44、_______。 解析：(1)從圖中可知，②號(hào)區(qū)域出現(xiàn)了單個(gè)菌落；1個(gè)菌落由1個(gè)細(xì)菌繁殖形成；根據(jù)菌落數(shù)量可判斷，劃線的順序依次是①→③→②。(2)①自生固氮菌是異養(yǎng)生物，它可固定大氣中的N2，因而培養(yǎng)基中應(yīng)添加碳源去掉氮源。②鑒別纖維素分解菌可用剛果紅染色法，要鑒別尿素分解菌，可在培養(yǎng)液中加入酚紅指示劑。 答案：(1)②　1?、佟邸凇?2)①碳源　氮源　②剛果紅染色　酚紅指示劑 5. (2017·重慶八中高三適應(yīng)性考試)欲從土壤中篩選出能產(chǎn)生脲酶的微生物并予以純化計(jì)數(shù)，采用了如圖所示的基本操作流程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)取得土樣后應(yīng)先用________(填試劑)對(duì)土壤進(jìn)行梯

45、度稀釋?zhuān)缓髮⑾♂屢和坎荚谄矫媾囵B(yǎng)基上，這種選擇培養(yǎng)基在營(yíng)養(yǎng)組成上的重要特點(diǎn)是__________________。在這樣的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的細(xì)菌________(填“一定”或“不一定”)都能產(chǎn)生脲酶。若在平板中加入酚紅，目的菌落出現(xiàn)的變化是__________________。 (2)若要對(duì)相應(yīng)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，一個(gè)稀釋度應(yīng)涂布2到3個(gè)平板，并計(jì)算________。若稀釋度不夠高，所得的數(shù)據(jù)與實(shí)際值比較應(yīng)________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。經(jīng)涂布獲得的菌落可以采用平板劃線法進(jìn)一步純化，每次劃線后接種環(huán)必須________，才能再次用于劃線。獲得的純化菌種可以保存在試管中，塞上棉塞或

46、蓋上封口膜，不能密封，原因是______________________。 答案：(1)無(wú)菌水　氮源只有尿素　不一定　菌落周?chē)霈F(xiàn)紅圈　(2)平均值　偏小　灼燒　細(xì)菌有氧呼吸需要?dú)怏w流通 6．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)②中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入________作為碳源，②中不同濃度碳源的培養(yǎng)基________(A.影響；B.不影響)細(xì)菌的數(shù)量，如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量，常

47、采用________________法。 (2)④為對(duì)照，微生物在④中不生長(zhǎng)，在⑤中生長(zhǎng)，④與⑤培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________； 使用法可以在⑥上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)進(jìn)行倒置培養(yǎng)的原因是 _____________________________________________________

48、___________________。 (3)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何防止其他微生物的污染？ ________________________________________________________________________。 答案：(1)苯酚　A　稀釋涂布平板 (2)④的培養(yǎng)基沒(méi)有加入苯酚作為碳源，⑤的培養(yǎng)基加入苯酚作為碳源　稀釋涂布平板法或平板劃線　防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基 (3)培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過(guò)程無(wú)菌操作 7．(高考新課標(biāo)全國(guó)卷Ⅱ改編)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)

49、題： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是 ________________________________________________________________________； 然后，將1 mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_(kāi)_______個(gè)。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)__________滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上

50、一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。 (4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能

51、提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_(dá)_______的利用率。 解析：(1)為了檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間。0.1 mL稀釋液中平均有(39＋38＋37)/3＝38個(gè)活菌，則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1＝380個(gè)，則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為380×100＝3.8×104個(gè)，則每升水樣中活菌數(shù)目為3.8×104×1 000＝3.8×107個(gè)。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到迅速?gòu)氐诇缇哪康摹Ｔ诘诙渭耙院蟮膭澗€時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，其目

52、的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出：A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性，是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布，是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。 答案：(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　3.8×107 (2)灼燒　將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 (3)B　(4)溶解氧　營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 8．某校生物興趣小組同學(xué)為了從某品牌酸奶中分離乳酸菌并檢測(cè)其耐藥情況，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程(如圖所示)。據(jù)流

53、程圖分析回答下列問(wèn)題： →→→ (1)配制細(xì)菌培養(yǎng)基：為了挑選到乳酸菌，必須在配制好的細(xì)菌培養(yǎng)基中特別加入一定量的碳酸鈣，乳酸菌在________(生理過(guò)程)中產(chǎn)生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣，從而在菌落周?chē)纬扇茆}圈。從物理性質(zhì)角度分析，這種培養(yǎng)基屬于________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。 (2)滅菌：在利用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基滅菌時(shí)，把鍋內(nèi)水加熱煮沸，必須 ________________________________________________________________________ 后，將鍋密閉，繼續(xù)加熱以保證鍋內(nèi)氣壓上升為100 kP

54、a，溫度達(dá)到121 ℃。滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)適當(dāng)冷卻后，在酒精燈 ________________________________________________________________________倒平板。 (3)分離乳酸菌：用平板劃線法將酸奶接種到細(xì)菌培養(yǎng)基上，在________(填“有氧”或“無(wú)氧”)條件下培養(yǎng)。其中， ________________________________________________________________________ 的菌落即為乳酸菌的菌落。 (4)乳酸菌耐藥性檢測(cè)：檢測(cè)乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素的耐藥性。 ①準(zhǔn)備培養(yǎng)基：取三組

55、細(xì)菌固體平板培養(yǎng)基并編號(hào)1、2、3，依次加入等量的 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 ②接種：向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測(cè)的乳酸菌菌種。 ③培養(yǎng)并觀察：將接種后的三組培養(yǎng)基和一個(gè) ________________________________________________________________________ _

56、_______都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長(zhǎng)情況。 ④結(jié)果分析。 Ⅰ.若1、2、3號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)情況相同，則乳酸菌既能抗青霉素，也能抗四環(huán)素。 Ⅱ.若 ________________________________________________________________________， 則乳酸菌能抗青霉素，不抗四環(huán)素。 Ⅲ.若 ________________________________________________________________________， 則乳酸菌不抗青霉素，能抗四環(huán)素。 Ⅳ.若 ________________________________________________________________________， 則乳酸菌既不抗青霉素，也不抗四環(huán)素。 答案：(1)無(wú)氧呼吸　固體 (2)將其中的冷空氣徹底排除　火焰附近 (3)無(wú)氧　周?chē)纬扇茆}圈 (4)①青霉素、四環(huán)素和無(wú)菌水 ③未接種的培養(yǎng)基 ④Ⅱ.1、3號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)情況相同，2號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)不正常 Ⅲ.2、3號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)情況相同，1號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)不正常 Ⅳ.3號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)情況正常，1、2號(hào)培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)不正常 20