高中生物 專題二 課題3 分解纖維素的微生物的分離課件 新人教版選修1.ppt

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閱讀課本27頁基礎知識部分第一 二段 回答下列問題 1 纖維素在生物圈的分布狀況 一 纖維素和纖維素酶 2 纖維素酶的組成及作用 閱讀課本27頁基礎知識部分第一 二段 回答下列問題 1 纖維素在生物圈的分布狀況 纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì) 植物的根 莖 葉等器官都含有大量的纖維素 其中棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物 一 纖維素和纖維素酶 2 纖維素酶的組成及作用 2 纖維素酶的組成及作用 纖維素酶是一種復合酶 一般認為它至少包括三種組分 即CX酶 C1酶和葡萄糖苷酶 前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖 第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖 二 纖維素分解菌的篩選 閱讀課本課本28頁相關(guān)部分 回答下列問題 1 纖維素分解菌的篩選方法 2 纖維素分解菌的篩選方法的原理 二 纖維素分解菌的篩選 閱讀課本課本28頁相關(guān)部分 回答下列問題 1 纖維素分解菌的篩選方法 剛果紅染色法 這種方法能夠通過顏色反應直接對微生物進行篩選 2 纖維素分解菌的篩選方法的原理 2 纖維素分解菌的篩選方法的原理 剛果紅是一種染料 它可以與纖維素形成紅色復合物 但并不和纖維二糖 葡萄糖發(fā)生這種反應 當纖維素被纖維素酶分解后剛果紅 纖維素的復合物就無法形成 培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈 這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌 三 實驗操作 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 梯度稀釋 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 取樣的環(huán)境是怎樣的 作出這種選擇的理由是什么 土壤取樣 取樣的環(huán)境是怎樣的 作出這種選擇的理由是什么 選擇纖維素豐富的環(huán)境 如樹林中多年落葉形成的腐殖土 多年積累的枯枝敗葉等等 生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系 在富含纖維素的環(huán)境中纖維素分解菌的含量相對提高 因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境 土壤取樣 選擇培養(yǎng) 1 選擇培養(yǎng)的目的 1 選擇培養(yǎng)的目的 增加纖維素分解菌的濃度 以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物 選擇培養(yǎng) 2 制備選擇培養(yǎng)基 參照課本29頁旁欄中的比例配置 回答下列問題 a 旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基 為什么 b 這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用 如果具有 是如何進行選擇的 參照課本29頁旁欄中的比例配置 回答下列問題 a 旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基 為什么 b 這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用 如果具有 是如何進行選擇的 是液體培養(yǎng)基 原因是配方中無凝固劑 2 制備選擇培養(yǎng)基 參照課本29頁旁欄中的比例配置 回答下列問題 a 旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基 為什么 b 這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用 如果具有 是如何進行選擇的 是液體培養(yǎng)基 原因是配方中無凝固劑 有選擇作用 本配方中的碳源是纖維素 所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖 2 制備選擇培養(yǎng)基 c 你能否設計一個對照實驗 說明選擇培養(yǎng)基的作用 c 你能否設計一個對照實驗 說明選擇培養(yǎng)基的作用 用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對照 3 操作方法 將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中 將錐形瓶固定在搖床上 在一定溫度下震蕩培養(yǎng)1 2天 直至培養(yǎng)液變渾濁 也可重復選擇培養(yǎng) 思考 為什么選擇培養(yǎng)能夠 濃縮 所需的微生物 思考 為什么選擇培養(yǎng)能夠 濃縮 所需的微生物 在選擇培養(yǎng)的條件下 可以使那些能夠適應這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖 而那些不適應這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制 因此可以起到 濃縮 的作用 梯度稀釋 按照課題1的稀釋操作方法 將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進行等比稀釋 稀釋最大倍數(shù)到106 將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 1 制備培養(yǎng)基 參照旁欄中的比例2 涂布平板 將稀釋度為104 106的菌懸液各取0 1ml涂布在培養(yǎng)基上 30 倒置培養(yǎng) 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 參照課本剛果紅染色法 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 一般即為分解纖維素的菌落 剛果紅染色法 方法一 先培養(yǎng)微生物 再加入剛果紅進行顏色反應 方法二 在倒平板時就加入剛果紅 剛果紅染色法 方法一 先培養(yǎng)微生物 再加入剛果紅進行顏色反應 方法二 在倒平板時就加入剛果紅 思考 這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足 方法一缺點是操作煩瑣 加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜 優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用方法二優(yōu)點是操作簡便 不存在菌落混雜問題缺點一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì) 可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應 缺點二有些微生物具有降解色素的能力 它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅 形成明顯的透明圈 與纖維素分解菌不易區(qū)分 四 結(jié)果分析與評價 四 結(jié)果分析與評價 一 培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 四 結(jié)果分析與評價 一 培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 設置對照 若對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中無菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格 如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落 則說明可能獲得了分解纖維素的微生物 四 結(jié)果分析與評價 一 培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 二 分離的結(jié)果是否一致 設置對照 若對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中無菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格 如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落 則說明可能獲得了分解纖維素的微生物 四 結(jié)果分析與評價 一 培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 二 分離的結(jié)果是否一致 設置對照 若對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中無菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格 如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落 則說明可能獲得了分解纖維素的微生物 如果不同 分析產(chǎn)生不同結(jié)果的原因 五 課題延伸 本課題對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選 但是這只是分離純化的第一步 為確定得到的是纖維素分解菌 還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗 纖維素酶的測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定