2019-2020年高中生物專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1菊花的組織培養(yǎng)練習(xí)新人教版選修.doc

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2019-2020年高中生物專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1菊花的組織培養(yǎng)練習(xí)新人教版選修 1．植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細胞的全能性。 2．植物組織培養(yǎng)的基本過程： 外植體愈傷組織根、芽―→新植物體。 3．影響植物組織培養(yǎng)的因素有：植物材料、營養(yǎng)物質(zhì)、植物激素及pH、溫度、光照等。 4．菊花莖段組織培養(yǎng)一般選擇未開花的植株莖上部新萌生的側(cè)枝，且培養(yǎng)基中不必添加植物激素。 5．組織培養(yǎng)中，生長素的使用量大于細胞分裂素時，有利于根的分化，抑制芽的形成；反之，則利于芽的分化，抑制根的形成；比例適中時，促進愈傷組織生長。 植物組織培養(yǎng)的基本過程及影響因素 [自讀教材夯基礎(chǔ)] 1．植物組織培養(yǎng)的基本過程 (1)理論基礎(chǔ)：植物細胞具有全能性。 (2)基本過程： 離體的植物組織或細胞愈傷組織根、芽植物體 (3)相關(guān)概念： ①愈傷組織：由離體的植物組織或細胞經(jīng)脫分化形成的一團排列疏松而無規(guī)則、高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。 ②脫分化：又叫去分化，是由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。 ③再分化：愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，重新分化成根或芽等器官的過程。 2．影響植物組織培養(yǎng)的因素 (1)材料選取： ①不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大。 ②同一種植物材料，材料的年齡、保存時間的長短也有影響。 ③菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開花植株莖上部新萌生的側(cè)枝。 (3)植物激素：生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素，兩者的濃度、使用的先后順序及用量的比例等都會影響組織培養(yǎng)的結(jié)果。 (4)pH、溫度、光照等。 1．你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？ 提示：微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需的無機鹽；蔗糖提供碳源，同時能夠維持細胞的滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主。而MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)，主要包括植物生長必需的大量元素和微量元素。 2．生長素和細胞分裂素在植物組織培養(yǎng)過程中的作用關(guān)系，說明了什么問題？ 提示：在植物的生長發(fā)育和適應(yīng)環(huán)境變化的過程中，各種植物激素并不是孤立地起作用，而是多種激素相互作用共同調(diào)節(jié)植物體的生命活動。 3．菊花的組織培養(yǎng)，為什么一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝？ 提示：外植體的生理狀態(tài)是成功進行組織培養(yǎng)的重要條件之一，生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。 [跟隨名師解疑難] 1．細胞的全能性 (1)原因：生物體的每個細胞都含有本物種生長、發(fā)育、遺傳和變異的全部遺傳信息。 (2)實現(xiàn)全能性的條件：離體狀態(tài)和適宜的環(huán)境條件(如營養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等)。 (3)細胞全能性大小與細胞種類的關(guān)系： ①受精卵＞生殖細胞＞體細胞；植物細胞＞動物細胞；分化程度低的細胞＞分化程度高的細胞。 ②一般地說，離體后的植物細胞的全能性在一定條件下可充分體現(xiàn)。 ③離體的動物細胞的全能性受到限制，但其細胞核的全能性可借助卵細胞的細胞質(zhì)體現(xiàn)出來。 ④未離體的細胞的全能性不能表達，只是在機體的調(diào)控下進行定向分化。 2．植物激素對組織培養(yǎng)的影響 在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等都會影響實驗結(jié)果。 (1)使用順序不同，實驗結(jié)果不同： 使用順序 實驗結(jié)果 先使用生長素，后使用細胞分裂素 有利于細胞分裂，但細胞不分化 先使用細胞分裂素，后使用生長素 細胞既分裂也分化 同時使用 分化頻率提高 (2)使用的量及比例不同，實驗結(jié)果不同： 使用的量及比例 實驗結(jié)果 比例適中 促進愈傷組織的生長 生長素＞細胞分裂素 有利于根的形成 生長素＜細胞分裂素 有利于芽的形成 菊花組織培養(yǎng)的實驗操作 [自讀教材夯基礎(chǔ)] 菊花組織培養(yǎng)的操作過程 (1)制備MS固體培養(yǎng)基 (2)外植體消毒：嫩枝―→流水沖洗體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動2～3次，持續(xù)6～7 s―→無菌水清洗放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中 1～2 min―→無菌水至少清洗3次。 (4)培養(yǎng)：最好在無菌箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒，培養(yǎng)溫度控制在18～22_℃，且每日用日光燈光照12 h。 (5)移栽和栽培：移栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日。然后用流水清洗根部的培養(yǎng)基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間，等幼苗長壯后再移栽到土壤中。 1．外植體為什么要經(jīng)過消毒才能接種？ 提示：外植體上殘留的雜菌會和外植體爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)，并且產(chǎn)生大量對外植體有害的物質(zhì)，導(dǎo)致外植體死亡，所以要先消毒再接種。 2．試管苗在栽培之前為什么要進行移栽？ 提示：移栽的主要目的是壯苗。 [跟隨名師解疑難] 1．試管苗的培養(yǎng)過程中應(yīng)注意的問題 (1)培養(yǎng)一株完整的試管苗，必須先進行生芽培養(yǎng)，然后進行生根培養(yǎng)，如果順序顛倒，就不好誘導(dǎo)生芽了。 (2)試管苗應(yīng)該進行見光培養(yǎng)。 (3)試管苗一般在高濕、弱光、恒溫下異養(yǎng)生長，移出瓶后一定要保溫、保濕。 (4)試管苗光合作用能力低，在移栽前應(yīng)給予較強光照且進行閉瓶煉苗，以促進小苗向自養(yǎng)轉(zhuǎn)化。 2．實驗結(jié)果分析與評價 (1)對接種操作中污染情況的分析： 接種3～4 d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。統(tǒng)計污染率，分析原因：一般情況下，細菌污染可能是由接種人員造成的，如未戴口罩，接種時說話，或手及器械消毒不嚴(yán)等。 (2)是否完成植物組織的脫分化和再分化： 觀察實驗結(jié)果，看是否培養(yǎng)出愈傷組織，記錄愈傷組織的出現(xiàn)時間，統(tǒng)計更換培養(yǎng)基后愈傷組織進一步分化成根和芽的比例和時間。 (3)是否進行了統(tǒng)計、對照與記錄： 做好統(tǒng)計和對照，填好結(jié)果記錄表，從第一步開始做好實驗記錄?？梢苑纸M配制不同培養(yǎng)基，如誘導(dǎo)愈傷組織直接分化叢芽的培養(yǎng)基，做不同培養(yǎng)基配方的實驗比較。 (4)生根苗的移栽技術(shù)： 關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般先使用無土栽培的辦法，培養(yǎng)基要提前消毒，苗壯后再移植到土壤?？赏ㄟ^統(tǒng)計成活率來衡量移栽水平。 影響植物組織培養(yǎng)的因素 [例1] 下列關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素，說法正確的是(　　) A．不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同，同一種植物材料培養(yǎng)的難易程度相同 B．在植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基中必須添加植物激素 C．植物激素中生長素和細胞分裂素的作用是互相獨立的 D．pH、溫度、光照條件等對植物組織培養(yǎng)也特別重要 [解析]　不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同，同一種植物材料也會因年齡、保存時間的長短等導(dǎo)致實驗結(jié)果不同，故A錯誤；在植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基中常常要添加植物激素，但不是都必須添加植物激素，如菊花莖段組織培養(yǎng)不必添加植物激素，故B錯；各種植物激素的作用是相互聯(lián)系的，而不是互相獨立的，故C錯。 [答案]　D 歸納拓展植物組織培養(yǎng)時一般使用人工合成激素的原因 組織培養(yǎng)時不用天然激素而是用人工合成的激素，是因為植物中存在相應(yīng)的分解天然激素的酶而沒有分解相應(yīng)的人工合成激素的酶，所以天然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時間短，人工合成激素的作用和存在的時間長，作用效果明顯。 植物組織培養(yǎng)的過程 　　[例2]　請回答下列與菊花莖段組織培養(yǎng)實驗操作有關(guān)的問題： (1)由于菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易，故在配制MS固體培養(yǎng)基時，____________(填“必須添加”或“不必添加”)植物激素。培養(yǎng)基配制完畢后，還需進行__________滅菌。 (2)應(yīng)選用生理狀況好的菊花嫩枝莖段作為________，這是因為其更容易被誘導(dǎo)________________________________________________________________________。 (3)菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的______________溶液進行表面消毒。 (4)接種前，工作臺要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍。之后，所有的接種操作都必須在____________旁進行，并且每次使用器械后，都需要用__________滅菌。 (5)接種后的錐形瓶最好放在__________中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間應(yīng)注意的事項主要有：定期________、控制好____________，并每日給予適當(dāng)時間光照。 [解析]　(1)菊花莖段自身能合成植物激素，因此培養(yǎng)基中不必添加植物激素，培養(yǎng)基配制完畢后需進行高壓蒸汽滅菌。(2)外植體的選擇直接關(guān)系到實驗的成敗，因此應(yīng)選擇容易被誘導(dǎo)脫分化和再分化的菊花嫩枝作為外植體。(3)為防止微生物污染，菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的酒精和氯化汞溶液進行表面消毒。(4)為避免接種前、接種中污染外植體以及接種后污染環(huán)境，因此接種前，工作臺要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍，接種過程中所有的接種操作都必須在酒精燈火焰旁進行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌。(5)外植體在培養(yǎng)過程中要保持無菌環(huán)境，控制好溫度，并給予適當(dāng)光照。 [答案]　(1)不必添加　高壓蒸汽　(2)外植體　脫分化和再分化　(3)酒精和氯化汞　(4)酒精燈火焰　火焰灼燒　(5)無菌箱　消毒　培養(yǎng)溫度 [隨堂基礎(chǔ)鞏固] 1．下列發(fā)生了細胞分化且能體現(xiàn)體細胞全能性的生物學(xué)過程是(　　) A．玉米種子萌發(fā)長成新植株 B．小鼠骨髓造血干細胞形成各種血細胞 C．小麥花粉經(jīng)離體培養(yǎng)發(fā)育成單倍體植株 D．胡蘿卜根韌皮部細胞經(jīng)組織培養(yǎng)發(fā)育成新植株 解析：選D　玉米種子萌發(fā)長成新植株不能體現(xiàn)細胞全能性。小鼠骨髓造血干細胞形成各種血細胞，并沒有發(fā)育成個體，所以不能體現(xiàn)細胞全能性。小麥花粉經(jīng)離體培養(yǎng)發(fā)育成單倍體植株體現(xiàn)的是植物生殖細胞的全能性。 2．影響植物組織培養(yǎng)的因素包括(　　) ①培養(yǎng)基的配制?、谕庵搀w的選取?、奂に氐倪\用?、芟尽、轀囟?、pH、光照 A．①②③④⑤　　　　　 　B．①②③ C．①②③④ D．①②③⑤ 解析：選A　培養(yǎng)基是組織培養(yǎng)的營養(yǎng)來源；外植體的選取決定培養(yǎng)的難易程度；激素決定培養(yǎng)物的生長及發(fā)育情況；消毒是否成功決定培養(yǎng)的成??；溫度、pH、光照決定植物組織的生長狀況。 3．在植物組織培養(yǎng)過程中，關(guān)于接種時應(yīng)注意的事項，全部正確的是(　　) ①接種室要消毒 ②只要戴口罩，操作時可說話 ③外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，取出用無菌水清洗后，再用0.1%的氯化汞溶液消毒，并用無菌水清洗干凈 ④接種操作要在酒精燈火焰旁進行 ⑤接種完畢后立即蓋好瓶蓋 A．①②③④⑤ D．①②③④ C．①③④⑤ D．②③④⑤ 解析：選C　組織培養(yǎng)過程中，要求進行嚴(yán)格的無菌操作，因為一旦出現(xiàn)細菌或真菌污染，就會導(dǎo)致實驗失敗，其要求除題目中提到的①③④⑤項外，工作人員即使戴上口罩，也不許說話。 4．試管苗在移栽前進行一系列操作，使幼苗生長健壯，耐環(huán)境變化能力增強，這一過程叫“煉苗”。下列關(guān)于移栽的敘述，正確的是(　　) A．培養(yǎng)后的試管苗，打開封口膜后，直接移栽至大田 B．試管苗在移栽時不需在培養(yǎng)間進一步培養(yǎng) C．試管苗在培養(yǎng)間培養(yǎng)一段時間后，用無菌水清洗根部培養(yǎng)基后，移栽入大田 D．幼苗在培養(yǎng)間培養(yǎng)一段時間后，最好用無菌水清洗根部培養(yǎng)基，再移入消過毒的蛭石、珍珠巖等環(huán)境煉苗 解析：選D　試管苗光合作用能力低，對不良環(huán)境的耐受能力差，一定要保溫、保濕。在培養(yǎng)一段時間后，由異養(yǎng)苗向自養(yǎng)轉(zhuǎn)化，并且要在蛭石、珍珠巖等無毒環(huán)境中培養(yǎng)一段時間，以適應(yīng)外界環(huán)境后，再移至大田栽培。 5．草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下： 　　　外植體愈傷組織芽、根―→植株 請回答： (1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時，一般選取______作為外植體，其依據(jù)是________________________________________________________________________。 (2)在過程①中，常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和________。在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加________，有利于外植體啟動細胞分裂形成愈傷組織。接種后2～5 d，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是________________________________。 (3)在過程②中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)莖尖(根尖)病毒少，甚至無病毒，所以常作為外植體。(2)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，除添加礦質(zhì)元素外，還含有有機物和植物激素。(3)生長素與細胞分裂素的用量比值不同，誘導(dǎo)生根、發(fā)芽的結(jié)果不同。 答案：(1)莖尖(或根尖)　莖尖(根尖)病毒極少，甚至無病毒　(2)有機物　植物激素　外植體消毒不徹底　(3)培養(yǎng)基中生長素類物質(zhì)用量與細胞分裂素類物質(zhì)用量的比值偏低 [課時跟蹤檢測] (滿分50分　時間25分鐘) 一、選擇題(每小題3分，共24分) 1．下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述錯誤的是(　　) A．培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B．培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化 C．離體器官或組織的細胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 D．同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因型都相同 解析：選D　植物細胞全能性要在離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素及其他適宜的條件下才能表現(xiàn)出來，基本過程是離體的植物器官、組織或細胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化形成根、芽，進而發(fā)育成新植株個體。同一株綠色植物的體細胞與生殖細胞(精子或卵細胞)的染色體數(shù)目不同，因此基因型也就不相同，由它們經(jīng)有絲分裂培養(yǎng)成的愈傷組織的基因型也是不同的。 2．下列哪組符合菊花組織培養(yǎng)的基本步驟(　　) A．制備MS培養(yǎng)基―→外植體消毒―→接種―→培養(yǎng)―→移栽―→栽培 B．制備MS培養(yǎng)基―→外植體消毒―→接種―→培養(yǎng)―→栽培―→移栽 C．制備MS培養(yǎng)基―→外植體消毒―→接種―→栽培―→培養(yǎng)―→移栽 D．制備MS培養(yǎng)基―→外植體消毒―→接種―→移栽―→培養(yǎng)―→栽培 解析：選A　移栽是指將培養(yǎng)基上培養(yǎng)的幼苗長壯后移栽到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下，栽培是對移栽到土壤中的幼苗進行精細管理培養(yǎng)的過程，應(yīng)先移栽后栽培。 3．下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中植物激素使用的說法，錯誤的是(　　) A．植物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素 B．先使用生長素，后使用細胞分裂素，有利于細胞分裂和分化 C．先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂也分化 D．同時使用生長素和細胞分裂素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向 解析：選B　在植物組織培養(yǎng)中，先使用生長素，后使用細胞分裂素，有利于細胞分裂，但細胞不分化；先使用細胞分裂素后使用生長素，對細胞的分裂和分化均有利。 4．下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的說法錯誤的是(　　) A．一般來說，容易進行無性繁殖的植物，也容易進行組織培養(yǎng) B．對菊花莖段進行組織培養(yǎng)，不加植物激素也能成功 C．接種后的錐形瓶放入無菌箱中，給予適宜的溫度和光照即可 D．移栽生根的試管苗之前，先打開瓶口，讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日 解析：選C　在植物組織培養(yǎng)過程中，分化程度越低的材料，越容易脫分化形成愈傷組織，接種后的錐形瓶放入無菌箱中，給予適宜的溫度和光照進行培養(yǎng)，培養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒，防止細菌等微生物污染。 5．在下列選項中，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是(　　) ①利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株?、讷@取大量的脫毒苗?、劾没蚬こ膛嘤姑掴徬x的植株?、軉伪扼w育種 ⑤無子西瓜的快速大量繁殖 A．①②③　　　　　　 B．②③④⑤ C．①②④⑤ D．②③④ 解析：選B　植物組織培養(yǎng)是指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞、原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)，主要用于獲取脫毒苗、培育轉(zhuǎn)基因的植株、單倍體育種、快速大量繁殖植株等方面。利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株屬于多倍體育種，不需要植物組織培養(yǎng)技術(shù)。 6．在菊花的組織培養(yǎng)操作完成3～4 d后，觀察同一溫室中的外植體，發(fā)現(xiàn)有的瓶內(nèi)外植體正常生長，有的瓶內(nèi)外植體死亡，你認(rèn)為外植體死亡的原因不可能是(　　) A．外植體來自衰老的植物組織，其中細胞活性低或結(jié)構(gòu)不完整 B．接種時培養(yǎng)基滅菌不徹底，接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體 C．培養(yǎng)過程中保持溫度、pH的適宜，沒有及時調(diào)整各種營養(yǎng)物質(zhì)、激素的比例 D．愈傷組織形成初期沒有給予充足的光照 解析：選D　愈傷組織形成過程中，細胞還沒有開始再分化，沒有葉綠素和葉綠體的形成，也不可能進行光合作用，所以愈傷組織形成初期不需要充足的光照。 7．下面為植物組織培養(yǎng)過程的流程圖，以下相關(guān)敘述錯誤的是(　　) A．上述過程中脫分化發(fā)生在步驟b，在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用 B．再分化發(fā)生在步驟d，是愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程 C．從葉組織塊到種苗形成的過程利用的原理是植物葉片細胞具有全能性 D．人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題 解析：選B　植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性；再分化發(fā)生在步驟c，為愈傷組織重新分化形成根或芽等器官的過程；植物激素在啟動細胞分裂、脫分化和再分化中發(fā)揮重要作用。 8．某組織培養(yǎng)實驗室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染，為查找污染原因設(shè)計了四個實驗，實驗條件除圖示外其他均相同。下列各圖表示實驗結(jié)果，據(jù)圖不能得出的初步結(jié)論是(　　) A．污染的主要原因不是培養(yǎng)基滅菌時間短 B．污染不可能來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織 C．調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH不能解決污染問題 D．調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題 解析：選B　A、C、D圖解所示的信息是隨培養(yǎng)基滅菌時間、培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)溫度的增加，污染率在90%上下波動，說明污染源不是這三方面的原因；而B圖解中隨離體組織消毒時間的增加污染率急劇下降，因而，該曲線表明組織培養(yǎng)所用的離體組織是污染的主要因素。 二、非選擇題(共26分) 9．(14分)利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的有關(guān)知識回答以下問題： (1)植物組織培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，原因是培養(yǎng)基中添加了________，培養(yǎng)基的主要成分是________、________和有機物。 (2)培養(yǎng)基中添加有機物，說明外植體的“代謝”是______(填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”)型。 (3)培養(yǎng)基中常要添加____________________，且這兩種激素的________影響植物細胞的分化方向。如果外植體是菊花的莖段，則________(填“要”或“不必”)添加植物激素。 (4)除以上因素外，__________等外界因素對植物細胞的正常發(fā)育也起到很重要的作用。 (5)外植體要經(jīng)過________(填“消毒”或“滅菌”)后，才能接種。 (6)在工作臺上接種時，為了避免細菌等污染，接種過程要在________旁進行。 解析：植物組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有機物和植物激素等。外植體在培養(yǎng)到愈傷組織的過程中其代謝類型為異養(yǎng)需氧型。培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的配比決定培養(yǎng)物的分化方向。菊花的莖段培養(yǎng)可以不添加植物激素，因為菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。pH、溫度、光照等外界因素對培養(yǎng)的植物組織的生長情況有很重要的作用。無菌操作是植物組織培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。整個操作過程中所使用的材料(除植物組織)、用具和試劑都要進行滅菌處理。但不同的材料用不同的方法進行滅菌，如培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌，同時在接種時，要在酒精燈火焰旁進行，以防細菌污染。 答案：(1)瓊脂(凝固劑)　大量元素　微量元素 (2)異養(yǎng) (3)生長素和細胞分裂素　用量比例　不必 (4)pH、溫度、光照 (5)消毒 (6)酒精燈火焰 10．(12分)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中加有激素。下表是培養(yǎng)基中兩種植物激素在不同比例時的實驗結(jié)果。請分析回答：(其中6BA是一種細胞分裂素，IAA是一種生長素) 實驗組別 1 2 3 4 激素種類及含量關(guān)系 6BA 6BA＞IAA 6BA＝IAA 6BA＜IAA 結(jié)果 組織塊產(chǎn)生愈傷組織 組織塊分化出芽 愈傷組織不斷生長 愈傷組織有生根趨勢 (1)促進愈傷組織產(chǎn)生的條件是____________，愈傷組織不斷生長的條件是________。 (2)芽的分化條件是__________________，根的分化條件是____________________。 (3)在植物組織培養(yǎng)中，脫分化可用的激素組合是實驗________和實驗________中的激素含量關(guān)系，再分化時可用的激素組合是實驗________和實驗________中的激素含量關(guān)系。整個實驗表明，植物的生根、發(fā)芽等生命活動是________的結(jié)果。 (4)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中，除激素外，還必須含有__________，它的成分至少應(yīng)該含有______________________________________________、____________等。 (5)判斷愈傷組織的依據(jù)是___________________________________________________ __________________。 解析：從表中數(shù)據(jù)可以看出，只有靠細胞分裂素和生長素的共同作用及適當(dāng)?shù)谋壤?，才能使組織培養(yǎng)過程順利進行。培養(yǎng)基中必須具備植物激素、無機物(礦質(zhì)元素)、有機物等營養(yǎng)物質(zhì)。而愈傷組織的特點是細胞排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化，呈無定形狀態(tài)。 答案：(1)必須有細胞分裂素　細胞分裂素和生長素含量相等　(2)細胞分裂素的含量大于生長素　生長素的含量大于細胞分裂素　(3)1　3　2　4　多種激素共同作用　(4)營養(yǎng)物質(zhì)　無機物(礦質(zhì)元素)　有機物　(5)細胞排列疏松而無規(guī)則，呈無定形狀態(tài)