微生物學(xué)復(fù)習(xí)資料 周德慶 期末總結(jié)

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1、 微生物學(xué)復(fù)習(xí)資料 第一章 原核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能 伴孢晶體：少數(shù)芽孢桿菌在形成芽孢的同時，會在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體，稱為伴孢晶體（即e內(nèi)毒素）。 L型細(xì)菌：在某些環(huán)境條件下（實驗室或宿主體內(nèi)）通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷變異型。1．沒有完整而堅韌的細(xì)胞壁，細(xì)胞呈多形態(tài)，有些能通過細(xì)菌濾器，故又稱“濾過型細(xì)菌”。對滲透敏感，在固體培養(yǎng)基上形成“油煎蛋”似的小菌落（直徑在0.1mm左右） 古生菌：又稱古細(xì)菌，是一個在進(jìn)化途徑上很早就與真細(xì)菌和真核生物相互獨立的生物類群，主要包括一些獨特生態(tài)類型的原核生物，如產(chǎn)甲烷菌及大多數(shù)嗜極菌。

2、4、試比較G+和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的異同。 成 分 革蘭氏陽性細(xì)菌 革蘭氏陰性細(xì)胞 肽聚糖 磷壁酸 類脂質(zhì) 蛋白質(zhì) 含量很高（30-95） 含量較高（<50） 一般無（<2） 0? 含量很低（5~20） 0 含量較高（約20） 含量較高? ? ? ??? 5、簡述革蘭氏染色法的機制并說明此法的重要性。 革蘭氏染色機制：結(jié)晶紫液初染和碘液媒染：在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。乙醇脫色：G＋細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密且不含類脂，把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其保持紫色；G-細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，結(jié)晶紫與

3、碘復(fù)合物的溶出，使細(xì)胞退成無色。復(fù)染: G-細(xì)菌呈現(xiàn)紅色，而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色。 重要性: 革蘭氏染色有著十分重要的理論與實踐意義。通過這一染色，幾乎可把所有的細(xì)菌分成革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌兩個大類，因此它是分類鑒定菌種時的重要指標(biāo)。又由于這兩大類細(xì)菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異，因此任何細(xì)菌只要通過簡單的革蘭氏染色，就可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方面的信息。 第二章 真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能 1子實體：是指在其里面或上面可產(chǎn)生無性或有性孢子，有一定形狀和構(gòu)造的任何菌絲體組織 2 菌物界：指與動物界，植物界相

4、并列的一大群無葉綠素，依靠細(xì)胞表面吸收有機養(yǎng)料，細(xì)胞壁一般含幾丁質(zhì)的真核微生物 3 二級菌絲：又稱氣生菌絲，由基內(nèi)營養(yǎng)菌絲長出培養(yǎng)基外伸向空間的菌絲。 它是擔(dān)子菌中由相應(yīng)的異性的初生菌絲進(jìn)行體細(xì)胞接合而形成的菌絲。其具有分枝狀者稱為次生菌絲體。 4 鎖狀聯(lián)合: 擔(dān)子菌亞門中多數(shù)擔(dān)子菌的雙核菌絲，在進(jìn)行細(xì)胞分裂時，于菌絲的分隔處形成的一個側(cè)生的喙?fàn)罱Y(jié)構(gòu)稱鎖狀聯(lián)合。 生理意義：保證了雙核菌絲在進(jìn)行細(xì)胞分裂時，每節(jié)（每個細(xì)胞）都能含有兩個異質(zhì)（遺傳型不同）的核，為進(jìn)行有性生殖，通過核配形成擔(dān)子打下基礎(chǔ)。鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，凡是產(chǎn)生鎖狀聯(lián)合的菌絲均可斷定為雙核。鎖狀聯(lián)合也是擔(dān)子菌亞門

5、的明顯特征之一。 簡答題 1、細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌四大類微生物的菌落有何不同？為什么？ 菌落? ? ? ? 細(xì)菌? ? ? ? 酵母菌? ? ? ? 放線菌? ? ? ? 霉菌 含水形態(tài)? ? ? ? 很濕或較濕? ? ? ? 較濕? ? ? ? 干燥或較干燥? ? ? ? 干燥 外觀形態(tài)? ? ? ? 小而突起或大而平坦? ? ? ? 大而突起? ? ? ? 小而緊密? ? ? ? 大而疏松或大而致密 菌落透明度? ? ? ? 透明或稍透明? ? ? ? 稍透明? ? ? ? 不透明? ? ? ? 不透明

6、 菌落與培養(yǎng)基結(jié)合程度? ? 不結(jié)合? ? ? ? 不結(jié)合? ? ? ? 牢固結(jié)合? ? ? ? 較牢固結(jié)合 菌落顏色? ? ? 多樣? ? ? 單調(diào)，一般呈乳脂或礦燭色，少數(shù)紅色或黑色? ? ? 十分多樣? ? 十分多樣 菌落正反面顏色的差別? ? ?相同? ? ? ? 相同? ? ? ? 一般不同? ? ? ? 一般不同 菌落邊緣? ? ? ? 一般看不到細(xì)胞? ? ? ? 可見球狀，卵圓狀或假絲狀細(xì)胞? ? ? ? 有時可見細(xì)絲狀細(xì)胞? ? ? ?

7、 可見粗絲狀細(xì)胞 氣味? ? ? ? 一般有臭味? ? ? ? 多帶酒香味? ? ? ? 帶有泥腥味? ? ? ? 往往有霉味 原因：因為細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌的形態(tài)和生理類型不盡相同，所以在其菌落形態(tài)，構(gòu)造等特征上也有各自的特點。 2、試比較細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌細(xì)胞壁成分的異同。 細(xì)菌分為G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量較高，而G-不含磷壁酸；G+類脂質(zhì)一般無，而G-含量較高；G+不含蛋白質(zhì)，G-含量較高。放線菌為G+，其細(xì)胞壁具有G+所具有的特點。酵母菌和霉菌為真菌，

8、酵母菌的細(xì)胞壁外層為甘露聚糖，內(nèi)層為葡聚糖；而霉菌的細(xì)胞壁成分為幾丁質(zhì)、蛋白質(zhì)、葡聚糖。 3青霉素只對處于生長繁殖旺盛時期的細(xì)胞有抑制作用，而對處于休止?fàn)顟B(tài)的細(xì)胞沒有抑制作用，請分析這種說法的正誤，并說明你的理由。 原因：青霉素抑制肽聚糖的合成過程，形成破裂的細(xì)胞壁，代謝旺盛的細(xì)菌才存在肽聚糖的合成，因此此時有青霉素作用時細(xì)胞易死亡。 作用機制：青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)肽作用。 對革蘭陽性菌有效，由于革蘭陰性菌缺乏五肽交連橋所以青霉素對其作用不大。 補充： 第三章 病毒和亞病毒 ?1?溫和性噬菌體：噬菌體侵染宿主后，并不增殖，裂解，而與宿主DNA結(jié)合，隨宿主DN

9、A復(fù)制而復(fù)制，此時細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體，這種噬菌體稱為溫和性噬菌體或溶源噬菌體。 2?溶原菌：含有溫和性噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌。 ? ?溶源性——噬菌體附著或整合在宿主染色體上，一道復(fù)制。 3包涵體： 4類病毒：是一類只含RNA一種成分，專性寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體。 1、什么叫烈性噬菌體？簡述其裂解性生活史。 ? ?烈性噬菌體：凡在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解這五個階段而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體，稱為烈性噬菌體。 ? ?①吸附 噬菌體尾絲散開，固著于特異性受點上。? ?②侵入 尾鞘收縮，尾管推出并插入到細(xì)胞壁和膜中，頭部的核酸注入到宿主細(xì)

10、胞中，而蛋白質(zhì)衣殼留在細(xì)胞壁外。? ?③增殖 增殖過程包括核酸的復(fù)制和蛋白質(zhì)的生物合成。注入細(xì)胞的核酸操縱宿主細(xì)胞代謝機構(gòu)，以寄主個體及細(xì)胞降解物和培養(yǎng)基介質(zhì)為原料，大量復(fù)制噬菌體核酸，并合成蛋白質(zhì)外殼。? ?④成熟（裝配）寄主細(xì)胞合成噬菌體殼體(T4噬菌體包括頭部、尾部),并組裝成完整的噬菌體粒子。? ?⑤裂解（釋放）子代噬菌體成熟后，脂肪酶和溶菌酶促進(jìn)宿主細(xì)胞裂解，從而釋放出大量子代噬菌體。 第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基 1?生長因子：一類對微生物正常代謝必不可少且又不能從簡單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機物。 2 基團移位：指一類既需特異性載體蛋白的參與，又需

11、耗能的一種物質(zhì)運送方式。其機制分兩步：（1）HPr被PEP激活，（2）糖經(jīng)磷酸化而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。 3 選擇性培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基，具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能，廣泛用于菌種篩選等領(lǐng)域。如酵母富集培養(yǎng)基中的孟加拉紅抑制細(xì)菌的生長而對酵母菌無影響，偏酸性的環(huán)境有利于酵母菌的生長。 4 鑒別性培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。?? 1試比較細(xì)胞膜運輸營養(yǎng)物質(zhì)的四種方式。 比較項目? ? 單純擴散

12、? 促進(jìn)擴散 主動運輸 基因移位 特異載體蛋白 無 慢 由濃至稀 內(nèi)外相等 無特異性 不需要 不變? ? ? ? 無 無競爭性 無 H2O、CO2、O2甘油、乙醇、少數(shù)氨基酸、鹽類、代謝抑制劑 有 快 由濃至稀 內(nèi)外相等 特異性 不需要 不變 有 有競爭性 有 SO42+、PO43+、糖（真核生物） 有 快 由稀至濃 內(nèi)部濃度高得多 特異性 需要 不變 有 有競爭性 有 有 快 由稀至濃 內(nèi)部濃度高得多 特異性 需要 改變 有 有競爭性 有 運送速度 溶質(zhì)運送方向 平衡時內(nèi)外濃

13、度 運送分子 能量消耗 運送前后溶質(zhì)分子 載體飽和效應(yīng) 與溶質(zhì)類似物 運送抑制劑 運送對象舉例 氨基酸、乳糖等糖類、Na+、Ca2+等無機離子 葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等 2、什么是鑒別性培養(yǎng)基？試以EMB培養(yǎng)基為例，分析其鑒別作用的原理。 ? ?鑒別性培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入能于某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似的它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基就稱鑒別性培養(yǎng)基。?? ? ?EMB作用原理 ? ? 其中的伊紅和美藍(lán)兩種苯胺染料可抑制革蘭氏陽性細(xì)菌和一些難培養(yǎng)的革蘭氏陰性細(xì)菌。在低酸度時，這兩種染料結(jié)合形成沉淀，起著產(chǎn)

14、酸指示劑的作用。因此試樣中的多種腸道細(xì)菌會在EMB培養(yǎng)基上產(chǎn)生相互易區(qū)分的特征菌落，因而易于辨認(rèn)。尤其是大腸桿菌，因其強烈分解乳搪而產(chǎn)生大量的混合酸，菌體帶H+故可染上酸性染料伊紅，又因伊紅與美藍(lán)結(jié)合，所以菌落染上深紫色，從菌落表面的反射光中還可看到綠色金屬閃光。 3、簡述配制培養(yǎng)基的基本原則:P91 培養(yǎng)基是人工配制的供不同微生物生長繁殖，或用于積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。所以配制培養(yǎng)基時應(yīng)注意以下原則： 1目的明確 2營養(yǎng)協(xié)調(diào) 3理化適宜 4 經(jīng)濟節(jié)約 1.根據(jù)微生物的不同選用不同的培養(yǎng)基， 2.注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比。3.注意將培養(yǎng)基的pH值控制在一定范圍內(nèi)。 6、試述配

15、制培養(yǎng)基的基本過程及應(yīng)該注意的問題。 配制培養(yǎng)基的基本過程是: 按培養(yǎng)基的配方稱取各種藥品，用量太少的藥品應(yīng)配制成溶液后再取一定量加入。 將各種藥品加水溶解，通常是加所需水量的一半。 若配固體培養(yǎng)基，按2%的用量稱取瓊脂，用水將瓊脂浸濕一下，用手?jǐn)D去瓊脂中過多的水分，加入2的溶液中。 加熱至瓊脂全部溶解，并補足所需的全部水量。 用1molNaOH和1molHCL調(diào)節(jié)pH至要求值。 用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，滅菌后備用。 注意事項: 配制過程中，在加熱熔化瓊脂時，要不斷攪拌，以防糊底。 分裝時不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口，以防培養(yǎng)過程中容易污染雜菌

16、。 同時還應(yīng)考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經(jīng)濟、易購和來源廣泛的原則。 Ashby無氮培養(yǎng)基：（富集好氧性自生固氮菌用） 甘露醇1%，KH2PO4 0.25%，MgSO4.7H2O 0.02%，NaCL 0.02% ，CaSO4.2H2O 0.01%，CaCO3 0.05%。試述其碳源 氮源 能源物質(zhì)各是什么？ CaCO3起什么作用？ 該 培 養(yǎng) 基 的 C 素 來 源 和 能 量 來 源 均 來 自 甘 露 醇 。 該 培 養(yǎng) 基 未 提 供 氮 素 來 源 ，根據(jù) 所 學(xué) 知 識 ，只 有 能 固 氮 的 微 生 物 才 能 在 無 氮 培 養(yǎng) 基 上 生 長 。該 培 養(yǎng) 基

17、 的 礦 質(zhì) 營 養(yǎng) 物 質(zhì) 包 括 ：Mg2+, K+, Cu2+ , Na+, PO43-, SO42- HPO42-, PO43-, CaCO3 主 要 用 來 作 緩 沖 物 質(zhì) 調(diào) 節(jié) 培 養(yǎng) 基 的 pH 值 , 以 保 持 pH 不 變 。 據(jù) 此 我 們 可 推 知 該培 養(yǎng) 基 可 用 于 培 養(yǎng) 自 生 固 氮 菌 等 微 生 物 。 第五章??微生物的新陳代謝 1次生代謝產(chǎn)物：指某些微生物生長到穩(wěn)定期前后，以結(jié)構(gòu)簡單，代謝途徑明確，產(chǎn)量較大的初生代謝產(chǎn)物作前體，通過復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的各種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化學(xué)物。如抗生素，生物堿，信息

18、素等。 2 ED途徑: ?ED?是少數(shù)EMP途徑不完整的細(xì)菌所特有的利用葡萄糖的替代途徑，為微生物所特有。一分子葡萄糖經(jīng)ED途徑可生成兩個丙酮酸并凈生成一個ATP、一個NADH+H+和一個NADPH+H+。 ED途徑的特點：aKDPG裂解為丙酮酸和3-磷酸甘油醛b存在一特征性酶KDPG 醛縮酶c其終產(chǎn)物兩分子丙酮酸來歷不同，其一由KDPG直接裂解而成，另一則有3-磷酸甘油醛經(jīng)EMP 途徑轉(zhuǎn)化而來d產(chǎn)能效率低。 TCA循環(huán)特點：a氧雖不直接參與其中反應(yīng)，但必須在有氧條件下運轉(zhuǎn)b每分子丙酮酸可產(chǎn)生4個NADH+H+，一個FADH2，一個GTP, 總共相當(dāng)于15個ATP，因此產(chǎn)能效率極高cTC

19、A位于一切分解代謝和合成代謝的樞紐地位，不僅可以為微生物的合成代謝提供各種碳架原料，而且還與人類的發(fā)酵生產(chǎn)密切相關(guān)。 3 發(fā)酵：目前泛指任何好氧型或厭氧型微生物來生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物或食品飲料的一類生產(chǎn)方式。（ 無氧等外源氫受體的條件下，底物脫氫后產(chǎn)生的還原力不經(jīng)呼吸鏈而直接傳遞給某一內(nèi)源性中間代謝物接受，以實現(xiàn)底物水平磷酸化的一類生物氧化反應(yīng)。） 4 異型乳酸發(fā)酵（HMP）：凡葡萄糖經(jīng)乳酸發(fā)酵后除主要產(chǎn)生乳酸外，還產(chǎn)生乙醇，乙酸和CO2等多種產(chǎn)物的發(fā)酵稱異型乳酸發(fā)酵。 5 生物固氮：大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化作用而還原成氨的過程，生物界中只有原核生物才有固氮能力。 生物固氮6要

20、素：ATP的供應(yīng)，還原力及其傳遞載體， 固氮酶，還原底物N2，鎂離子，嚴(yán)格的厭氧環(huán)境。 固氮酶除了催化N2生產(chǎn)NH3外，還具有催化2H+ +2e----H2反應(yīng)的氫化酶活性。 肽聚糖分成分3個階段：a在細(xì)胞質(zhì)中合成，合成PARK核苷酸，UDP作為糖載體。 B在細(xì)胞膜中合成，合成肽聚糖單體 ， 稱作細(xì)菌萜醇的類脂載體。 C在細(xì)胞膜外合成，交聯(lián)作用形成肽聚糖。 青霉素作用于肽聚糖的合成過程，對肽聚糖已合成好的細(xì)菌（處于停滯期）無作用。 轉(zhuǎn)肽作用可被青霉素抑制，其作用機制是：青霉素是肽聚糖單體五鈦尾末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸的結(jié)構(gòu)類似物。 應(yīng)用營養(yǎng)缺陷型菌株解除正常的反饋調(diào)節(jié)。舉例：

21、a賴氨酸發(fā)酵b肌氨酸的生產(chǎn) 生物氧化的形式包括某物質(zhì)與氧結(jié)合，脫氫和失去電子3種。生物氧化的過程可分為脫H,遞H,受H3個階段，生物氧化的功能有產(chǎn)能，產(chǎn)還原力，和產(chǎn)小分子中間代謝產(chǎn)物3種。生物氧化的類型包括呼吸，無氧呼吸，發(fā)酵3種。 底物脫氫4種途徑：EMP,HMP,ED,TCA循環(huán)。 EMP途徑的特點和意義：供應(yīng)ATP形式的能量和NADH2形式的還原力，連接其他三個重要途徑的橋梁，為微生物合成提供多種重要的中間產(chǎn)物，通過逆向反應(yīng)可進(jìn)行多糖合成。 HMP當(dāng)葡萄糖經(jīng)一次磷酸化脫氫生成6-磷酸葡萄糖酸后，在6-磷酸葡萄糖酸脫酶作用下，再次降解為14分子CO2和1分子磷酸戊糖。作用：①供應(yīng)合

22、成原料；②產(chǎn)還原力；③作為固定CO2的中介；④擴大碳源的利用范圍；⑤連接EMP途徑。特點：葡萄糖不經(jīng)EMP途徑和TCA循環(huán)而得到徹底氧化，并能產(chǎn)生大量NADPH+H+形式的還原力及多種重要的中間產(chǎn)物。 呼吸，又稱好氧呼吸，特點是底物按常規(guī)方式脫氫后，脫下的氫經(jīng)完整的呼吸鏈又稱電子傳遞鏈傳遞，最終被外源分子氧接受，產(chǎn)生水并釋放ATP 形式的能量。 無氧呼吸：指一類呼吸鏈末端的H受體為外源無機氧化物(少數(shù)為有機物)的生物氧化。特點：底物按常規(guī)方式脫氫后，經(jīng)部分呼吸鏈遞氫，最終由氧化態(tài)的無機物或有機物受氫，并完成氧化磷酸化途徑產(chǎn)能反應(yīng)。 碳酸鹽呼吸：是一類以CO2或碳酸鹽作為呼吸鏈末端氫受體

23、的無氧呼吸。根據(jù)其還原產(chǎn)物不同分為兩類;產(chǎn)甲烷菌產(chǎn)生的甲烷的碳酸鹽呼吸，其二是產(chǎn)乙酸菌產(chǎn)生乙酸的碳酸鹽呼吸。 第六章??微生物的生長及其控制。 1恒濁器：根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度，借光電控制系統(tǒng)控制培養(yǎng)液流速，以達(dá)到菌體密度高，生長速率恒定的連續(xù)培養(yǎng)器。 2恒化器：通過保持有一種生長限制因子的培養(yǎng)液的流速不變，可使微生物始終處在低于其最高生長速率的條件下進(jìn)行生長繁殖的連續(xù)培養(yǎng)器。 3同步生長：通過獲得同步培養(yǎng)物的手段，使細(xì)胞群體中各個體都處于分裂步調(diào)一致的生長狀態(tài) 4連續(xù)培養(yǎng)：指微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個生長期間，微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長速率常數(shù)進(jìn)行生長，從而導(dǎo)致微

24、生物的生長過程能“不斷”地進(jìn)行下去的一種培養(yǎng)方法。 優(yōu)點：高效、低耗、利于自控、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。 缺點?①菌種易于退化；②容易污染；③營養(yǎng)物的利用率低于分批培養(yǎng)。 因此連續(xù)時間是有限的 5 石碳酸系數(shù)：在一定時間內(nèi)，被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度與達(dá)到同效的石碳酸的稀釋度之比。P179 1、什么是典型生長曲線？它可分幾期？劃分的依據(jù)是什么？各期特點如何？ ?典型生長曲線 ：將少量純種單細(xì)胞微生物接種到恒容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在適宜條件下，其群體就會有規(guī)律地生長，定時取樣測定細(xì)胞含量，以細(xì)胞數(shù)目的對數(shù)值作縱坐標(biāo)，以培養(yǎng)時間作橫坐標(biāo)，就可以畫出一條有規(guī)律的曲線，這就是微生物的典

25、型生長曲線。 ? ?劃分的依據(jù)：單細(xì)胞微生物。 ? ?(1)延滯期(停滯期、調(diào)整期) 特點：a.生長速率常數(shù)為零；b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大；c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高，原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍；e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。 ? ?(2) 對數(shù)期 特點：此時菌體細(xì)胞生長的速率常數(shù)R最大，分裂快，代時短，細(xì)胞進(jìn)行平衡生長，菌體內(nèi)酶系活躍，代謝旺盛，菌體數(shù)目以幾何級數(shù)增加，群體的形態(tài)與生理特征最一致，抗不良環(huán)境的能力強。 ⑶穩(wěn)定期 特點：a.生長速率常數(shù)為零；b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高；c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定；d.細(xì)胞開始貯存貯藏物；e.芽孢在這個時期形成；f.有些微生物在此時形成

26、次生代謝產(chǎn)物。 ⑷衰亡期 特點：a.細(xì)胞形態(tài)多樣；b.出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn)象；c.有次生代謝產(chǎn)物的形成；d.芽孢在此時釋放。? ?? ? 2、延滯期有何特點？如何縮短延滯期？影響延滯長短的因素。 ?特點：a.生長速率常數(shù)為零；b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大；c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高，原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍；e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。 消除：a. 以對數(shù)期的菌體作種子菌 ；b. 適當(dāng)增大接種量 ：一般采用3%~8%的接種量，根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定，最高不超過1/10。c. 培養(yǎng)基的成分：種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 。 影響延滯長短的因素：1接種齡 2接種量 3培養(yǎng)基

27、成分。 3、微生物培養(yǎng)過程中pH變化的規(guī)律如何？如何調(diào)整？ ?微生物的生命活動過程中會自動地改變外界環(huán)境的pH，其中發(fā)生pH改變有變酸和變堿兩種過程，在一般微生物的培養(yǎng)中往往以變酸占優(yōu)勢，因此，隨著培養(yǎng)時間延長，培養(yǎng)基的pH會逐漸下降。PH的變化還與培養(yǎng)基的組分尤其是碳氮比有很大關(guān)系，碳氮比高的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后pH會明顯下降；相反，碳氮比低的培養(yǎng)基經(jīng)培養(yǎng)后，其pH常會明顯上升。 措施：分為“治標(biāo)”和“治本”兩大類，前者指根據(jù)表面現(xiàn)象而進(jìn)行直接、及時、快速但不持久的表面化調(diào)節(jié)，后者指根據(jù)內(nèi)在機制而采用的間接、緩效但可發(fā)揮持久作用的調(diào)節(jié)。 治標(biāo)：1）過酸時：加NaOH等堿液中和 2）過堿時

28、：加H2SO4等酸液中和 治本：1）過酸時：加適當(dāng)?shù)矗杭幽蛩?，NaNO3或蛋白質(zhì)。提高通氣量 2）過堿時：加適當(dāng)碳源：加糖，乳酸，醋酸，檸檬酸或油脂。 降低通氣量 4、試述高溫滅菌的方法。 1、干熱滅菌法（1）原理：干熱可使細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥，并可使各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。（2）應(yīng)用范圍：1）烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法（150~170℃，1~2hr）：金屬器械、洗凈的玻璃器皿。2）火焰灼燒法：接種環(huán)、接種針等。 2、濕熱滅菌： 即以100℃以上的加壓蒸氣進(jìn)行滅菌。（1）相同溫度及相同作用時間下，濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效：濕熱空氣穿透力強，能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定

29、性的氫鍵，能加速其變性。 （2）種類： 1)常壓法a.巴氏消毒法： 用較低的溫度處理牛乳或其他液態(tài)食品，殺死其中可能存在的無芽孢病原菌而又不損害營養(yǎng)與風(fēng)味的消毒方法。a)低溫維持法(LTH)：要求62.8℃保持30min；b)高溫瞬時法(HTST)：要求71.7℃維持至少15s； b.煮沸消毒法：a)適用范圍：一般用于飲用水的消毒。b)條件：100℃下數(shù)分鐘。c.間隙滅菌法：又稱丁達(dá)爾滅菌法或分段滅菌法。a) 適用范圍：適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。b) 條件：80一100℃下蒸煮15—60分鐘，三天。2)　加壓法：a.常規(guī)加壓法a) 適用范圍：適合于一切微生物學(xué)實驗室、醫(yī)療保健機構(gòu)或發(fā)酵工廠中

30、對培養(yǎng)基及多種器材、物料的滅菌。b) 條件：121℃(壓力為lkg／cm2)，時間維持15—20分鐘，也可采用在較低的溫度(115℃，即0.7kg／cm2下維持35分鐘的方法。 b.連續(xù)加壓滅菌法：在發(fā)酵行業(yè)里也稱“連消法”。a) 適用范圍：在大規(guī)模的發(fā)酵工廠中作。培養(yǎng)基滅菌用。主要操作是將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進(jìn)行加熱、維持和冷卻，然后才進(jìn)入發(fā)酵罐。b) 條件：在135—140℃下處理5一l 5秒鐘率的菌體? ? ? ?實驗室為主 微生物的抗藥性：抗藥性主要通過遺傳途徑產(chǎn)生，如基因突變，遺傳重組和質(zhì)粒轉(zhuǎn)移等。 產(chǎn)生原因：a產(chǎn)生一種能使藥物失去活性的酶b把藥物作用的靶位加以修飾和改變

31、c形成救護途徑d使藥物不能透過細(xì)胞膜e通過主動外排系統(tǒng)把進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外。 第八章 微生物的生態(tài) 名詞解釋 1互生：指兩種可以單獨生活的生物，當(dāng)其生活在一起時，通過各自的代謝活動而有利于對方或偏利于一方的生活方式。 2拮抗：指由某種生物所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。 3大腸菌群：指任何可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的G-，桿狀，無芽孢，兼性厭氧的腸道細(xì)菌，典型代表是E.coli。 4 BOD5：即五日生化需氧量。指在20℃下，1L污水中所含的有機物，在進(jìn)行微生物氧化時，五日內(nèi)所消耗的分子氧的 毫克數(shù)。 1 簡述微生物與生物環(huán)境間五種常見

32、的關(guān)系，并各舉一例。 互生:指兩種可以單獨生活的生物，當(dāng)其生活在一起時，通過各自的代謝活動而有利于對方或偏利于一方的生活方式。 共生:指兩種生物共居在一起，相互分工協(xié)作、相依為命，甚至達(dá)到難分難解、合二為一的一種相互關(guān)系。 寄生:指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)或體表，從中攝取營養(yǎng)進(jìn)行生長繁殖，并使后者蒙受損害甚至死亡的現(xiàn)象. 拮抗: 指由某種生物所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。 混菌培養(yǎng): 又稱混菌發(fā)酵或混合發(fā)酵指在發(fā)酵工業(yè)中采用兩種或兩種以上的具有互補性質(zhì)的菌種進(jìn)行混合培養(yǎng) 我國衛(wèi)生部門對飲用水的

33、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)為：每ml水細(xì)菌總數(shù)不超過100個，大腸菌群數(shù)每升水不超過3個。 舉例1. 互生。金黃色葡萄球菌的生長為本來在平板上不能生長的嗜血流感菌提供生長因子，后者在其菌苔周圍形成衛(wèi)星菌落。 2. 共生。根瘤菌與豆科植物間的共生形成根瘤共生體，根瘤菌固定大氣中的氣態(tài)氮為植物提供氮素養(yǎng)料；豆科植物的根的分泌物能刺激根瘤菌的生長，同時 還為根瘤菌提供保護和穩(wěn)定的生長條件。 3.寄生。冬蟲夏草是子囊菌寄生于鱗翅目幼蟲而形成的。 第九章 1 類毒素：若用0.3%-0.4%的甲醛溶液對外毒素進(jìn)行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性的生物制品，稱為類毒素。

34、 2 半抗原：缺乏免疫原性而有免疫反應(yīng)性的的抗原。 3 干擾素：是高等動物細(xì)胞在病毒或dsRNA等誘生劑的刺激下，所產(chǎn)生的具有高活性的，廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白，相對分子質(zhì)量很小。 4.抗原：抗原是指一類能誘導(dǎo)機體發(fā)生免疫應(yīng)答并能與相應(yīng)抗體或T淋巴細(xì)胞受體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的大分子物質(zhì)。抗原一般應(yīng)同時具備兩個特征：a免疫原性b免疫反應(yīng)性。 外毒素：指在病原細(xì)菌生長過程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類毒性蛋白，有的屬于酶有的屬于酶原，有的屬于毒蛋白。 內(nèi)毒素：G-細(xì)胞壁外層的組分之一，其化學(xué)成分是脂多糖。 炎癥:是機體對病原體的侵入或其他損失的一種保護性反應(yīng)，它既是一種病理過程，又是

35、一種防御病原體入侵的積極的免疫反應(yīng)。 補體：實為一補體系統(tǒng)，是存在于正常人體和高等動物血清中的一組非特異性血清蛋白。主要成分是B球蛋白。 抗體：是高等動物在抗原物質(zhì)的刺激下，由漿細(xì)胞所產(chǎn)生的能與相應(yīng)抗原在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。有5個特點：a僅有魚類以上的脊椎動物漿細(xì)胞所產(chǎn)生b必須有相應(yīng)抗原刺激免疫細(xì)胞后才能產(chǎn)生c能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性，非共價和可逆的結(jié)合d其化學(xué)本質(zhì)是一類具有體液免疫功能的球蛋白e因抗體是蛋白質(zhì)，故具抗體功能也可作抗原去刺激異種生物產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，即抗抗體。 目前，純化后的Ig已分五類，其統(tǒng)一名稱為IgM，A,D,G,E. 典型的Ig分子是由一長一短兩對多肽

36、鏈對稱排列而成的一個Y型分子。近對稱軸的一對較長的肽鏈稱為重鏈或H鏈，外側(cè)一對較短的肽鏈稱為輕鏈或L鏈。 8.用什么方法可獲得大腸桿菌(E.coli)的組氨酸缺陷型？ 篩選營養(yǎng)缺陷型菌株一般要經(jīng)過誘變、淘汰野生型，檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型4個環(huán)節(jié)。 將篩選得到的缺陷型菌株分別涂在不加任何氨基酸的基本培養(yǎng)基和加有組氨酸的基本培養(yǎng)基上，若前者不長后者長出菌落，即為組氨酸缺陷型。 ? 第七章 1質(zhì)粒：凡游離于原核生物核基因組以外，具有獨立復(fù)制能力的小型共價閉合環(huán)狀的dsDNA分子。 2 F因子：又稱F質(zhì)?；蛐砸蜃樱谴竽c桿菌等細(xì)菌決定性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒 3溶源轉(zhuǎn)變：當(dāng)正常的溫和噬菌體

37、感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時，因噬菌體基因整合到宿主的核基因組上，而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象。 4Ames實驗：利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的有效方法。 5光復(fù)活作用：把經(jīng)UV照射后的微生物立即暴露于可見光下時，就可出現(xiàn)明顯降低其死亡率的現(xiàn)象，此即光復(fù)活作用。 6 準(zhǔn)性生殖：是一種類似有性生殖但比它更原始的兩性生殖方式，這是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合，它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率的基因重組并產(chǎn)生重組子。其過程是：a菌絲聯(lián)結(jié)b形成異核體c核融合d體細(xì)胞交換和單倍體化。 7 營養(yǎng)缺陷型：營養(yǎng)缺陷型是指通過誘變而產(chǎn)生的缺乏合成

38、某些營養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸、維生素和堿基等的能力，必須在其基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的營養(yǎng)成分才能正常生長的變異株 1什么叫基因重組？簡述原核生物和真核生物基因重組的主要形式。P223 兩個獨立基因組內(nèi)的遺傳基因通過一定的途徑轉(zhuǎn)移到一起，形成新的穩(wěn)定基因組的過程，稱基因重組。 原核生物的基因重組：1轉(zhuǎn)化 2轉(zhuǎn)導(dǎo) 3接合 真核：1有性雜交 2準(zhǔn)性雜交 2什么叫營養(yǎng)缺陷型菌株？在實驗室中如何從野生型菌株獲得營養(yǎng)缺陷型菌株，請設(shè)計一個具體的方案。 3簡述營養(yǎng)缺陷型菌株篩選的主要步驟和方法P221 篩選營養(yǎng)缺陷型菌株一般要經(jīng)過誘變、淘汰野生型,檢出和鑒定營養(yǎng)缺陷型4個步驟。 S1 誘變劑處理；

39、紫外線 S2淘汰野生型：1青霉素法 2菌絲過濾法 S3 檢出缺陷型：1夾層培養(yǎng)法；先在培養(yǎng)皿的底部到一層不含菌的基本培養(yǎng)基，待凝，添加一層混有經(jīng)誘變劑處理菌液的基本培養(yǎng)基，其上再澆一層不含菌的基本培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后，對首次出現(xiàn)的菌落用記號筆一一標(biāo)在皿底。然后，再向培養(yǎng)皿內(nèi)到一層含有特定生長因子的基本培養(yǎng)基，長出的形態(tài)較小的菌株，多數(shù)是營養(yǎng)缺陷型菌株。 2限量補充培養(yǎng)法 3逐個檢出法 4影印平板法 S4 鑒定缺陷型：生長譜法：把營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞制成適當(dāng)濃度的懸液，取0.1ml與基本培養(yǎng)基混合后，傾注在培養(yǎng)基內(nèi)，待凝固，表面干燥后，然后再在培養(yǎng)皿表面加上微量待鑒定缺陷型所需的營養(yǎng)物粉末，如氨基

40、酸，維生素，堿基等。經(jīng)培養(yǎng)后，若發(fā)現(xiàn)此營養(yǎng)物的表面有生長圈產(chǎn)生，就說明此菌就是該營養(yǎng)物的缺陷型突變株。 4簡述誘變育種中應(yīng)堅持的基本原則 1選擇簡便有效的誘變劑 2挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株 3處理單細(xì)胞或單孢子懸液 4選用最適的誘變劑量 5充分利用復(fù)合處理的協(xié)調(diào)效應(yīng) 6利用和創(chuàng)造形態(tài)，生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo) 7設(shè)計高效篩選方案8創(chuàng)造新型篩選方法。 5簡述5種生物菌種保藏的方法 1冰箱保藏法 2石蠟油封藏法 3甘油懸液保藏法4冷凍干燥保藏法 5液氮保藏法 6試述從自然界中進(jìn)行菌種分離篩選的一般步驟 1）采集菌樣 2） 富集培養(yǎng)：利用選擇性培養(yǎng)基原理，向所采土樣中加入某些特殊營養(yǎng)物并創(chuàng)造一

41、些有利于待分離對象生長的條件，使樣品中少量的能分解利用該營養(yǎng)物的微生物大量繁殖，以提高其在群體中的比例，以便于分離。Eg：通過配制選擇性培養(yǎng)基，選擇一定的培養(yǎng)條件來控制無關(guān)的微生物至少是數(shù)量上減少盡量無關(guān)的微生物 如：碳源利用的控制，可選定糖，淀粉、纖維素，或者石油等，以其中的一種為唯一碳源，選擇利用這唯一碳源才能大量正常生長的微生物，而淘汰其它微生物。 3 ）純種分離：將增殖培養(yǎng)效果顯著的優(yōu)勢菌種（混雜生長的微生物）。進(jìn)—步控制富集培養(yǎng)的選擇性條件，采用劃線分離法、稀釋分離法等純化方法獲取單菌落 純種分離法：（1）菌落純：a 平板表面涂布法 b 平板劃線分離法 c 瓊脂培養(yǎng)基澆注法。（

42、2）細(xì)胞純：a 用分離小室進(jìn)行單細(xì)胞分離 b 用顯微操縱器 c 用菌絲尖端切割 4 ）性能測定 11、如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養(yǎng)體? 首先要根據(jù)分離對象選擇適宜的培養(yǎng)基。若要分離真菌應(yīng)選用馬丁-孟加拉紅選擇培養(yǎng)基；若要分離細(xì)菌應(yīng)選用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；若要分離放線菌應(yīng)選用高氏培養(yǎng)基。 土樣采回來后，用常規(guī)的十倍稀釋分離法進(jìn)行稀釋分離，若分離細(xì)菌，一般稀至10-8,若分離放線菌,一般稀至10-6；若分離真菌，一般稀至10-4。取最后三個稀釋度倒平板獲得單個菌落。 將平板上出現(xiàn)的單菌落轉(zhuǎn)接斜面培養(yǎng)，同時鏡檢菌體的純度，若不純，應(yīng)將培養(yǎng)的單菌落斜面再次進(jìn)行稀釋分離。倒平板獲得單

43、菌落，轉(zhuǎn)接斜面培養(yǎng)，同時鏡檢菌體的純度。反復(fù)幾次直到得到菌體單一的單菌落方可認(rèn)為是某一微生物的純培養(yǎng)體。 制作菌種稀釋液：稱取10g甜酒曲壓成粉狀，放入已滅菌的盛有90mL無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中溶解。接著用1mL的無菌移液管吸取1mL甜酒曲稀釋液加入盛有9mL無菌水的試管中充分搖勻，此為10-2稀釋液，以此類推制成10-3，10-4，10-5，10-6幾種稀釋度的甜酒曲溶液[2]。 涂布：將上述凝固好的培養(yǎng)基平板底部用記號筆分別寫好稀釋度字樣，然后用1mL的無菌移液管分別由10-4，10-5和10-6的試管中吸取稀釋液0.1mL對號放入已寫好稀釋度的平板中，用無菌玻璃涂棒，在各培養(yǎng)

44、基表面輕輕地涂布均勻，室溫下靜置5-10min，使菌液吸附進(jìn)培養(yǎng)基[3]。 劃線：在近火焰處，蘸取10-2，10-3的稀釋液一環(huán)在平板上劃線。 培養(yǎng)：將上述平板倒置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1星期。 挑菌落：取出培養(yǎng)基觀察單菌落的生長情況。由根霉菌落的特點挑取少許單個菌落的菌絲接到斜面培養(yǎng)基上，放置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1星期。檢查其特征是否一致，若不一致，即發(fā)現(xiàn)雜菌，則需在斜面上繼續(xù)挑取菌絲培養(yǎng)，繼續(xù)純化，直至獲得純培養(yǎng)。 7某藥廠生產(chǎn)林可霉素，該廠為了提高產(chǎn)量，請你從微生物遺傳變異的角度來為該廠設(shè)計獲得高產(chǎn)菌株的方案。 ①誘變得三個環(huán)節(jié)： a突變的誘發(fā)，b突變株的篩選，c突變高產(chǎn)基

45、因的表型 ②基本步驟 出發(fā)菌株的選擇 處理菌懸液的制備 誘變處理 中間培養(yǎng) 分離和篩選 誘變育種基本原則：1選擇簡便有效的誘變劑 2挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株3處理單細(xì)胞或單孢子懸液4選用最適的誘變劑量5充分利用復(fù)合處理的協(xié)同效應(yīng)6利用和創(chuàng)造形態(tài)生理與產(chǎn)量間的相關(guān)指標(biāo)7設(shè)計高效篩選方案8創(chuàng)造新型篩選方案 ① 出發(fā)菌株的選擇 選擇野生型菌株，對誘變處理較敏感，效果好 出發(fā)菌株選2～3株，在處理比較后，取更適合的出發(fā)菌株作繼續(xù)誘變。 ② 菌懸液的制備 制備單細(xì)胞和單孢子、活力類似的菌懸液。 ③ 誘變處理 根據(jù)誘變劑特性，結(jié)合誘變對象的實際，設(shè)計誘變處理方案。 ④ 中間培

46、養(yǎng)（穩(wěn)定性試驗） 突變表型有一個表現(xiàn)延遲的過程，即細(xì)胞內(nèi)原有酶量的稀釋過程(生理延遲)，需3代以上的繁殖才能將突變性狀表現(xiàn)出來。 方法： 處理后細(xì)胞在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)幾小時，讓細(xì)胞繁殖5代，以得到純的變異細(xì)胞。 ⑤ 分離和篩選 初篩以迅速篩出大量的達(dá)到初步要求的分離菌落為目的，以量為主。以變色圈或透明圈的大小將90%的菌落淘汰 復(fù)篩則是精選，以質(zhì)為主，也就是以精確度為主。以效價和穩(wěn)定性選得優(yōu)秀菌株 ②操作步驟 1. 菌液以3000r／min離心5min，棄上清，沉淀用無菌生理鹽水再離心洗滌 2. 將菌液用無菌玻璃珠的三角瓶內(nèi)搖勻，細(xì)胞數(shù)可達(dá)108個／ml左右，作為待處理菌懸液

47、。 3.分別取梯度105 ,106,107,108個細(xì)胞數(shù)／ml 菌液4m1于9cm培養(yǎng)皿內(nèi)，預(yù)熱紫外燈10min，開啟皿蓋,無菌磁力攪拌照射10～50s。操作均避免白熾光,在紅燈下進(jìn)行，或用黑紙包住。 4. 取未照射的菌液和照射菌液各o.5ml進(jìn)行稀釋分離，計數(shù)活菌細(xì)胞數(shù)。 5. 取照射菌液2ml于液體培養(yǎng)基中(300ml三角瓶內(nèi)裝30ml培養(yǎng)液)，120r／min振蕩培養(yǎng)4～6h。 6．取中間培養(yǎng)液稀釋分離、培養(yǎng)。 7．挑取菌落進(jìn)行篩選。 8. 計算致死率,正突變率,負(fù)突變率 出發(fā)菌株　林可霉素產(chǎn)生菌 菌種復(fù)壯；狹義；指在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過純種分離和測定典型性狀，

48、生產(chǎn)性能等指標(biāo)從以衰退的群體中篩選出少量未退化的個體。 措施；純種分離法；1純種分離法2通過宿主體復(fù)壯3淘汰以衰退的個體 第十章 1試述在菌種鑒定中常用的甲基紅(MR)和V.P.試驗的原理 （1）甲基紅試驗原理：某些細(xì)菌在糖代謝過程中，分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸可進(jìn)一步分解，產(chǎn)生甲酸、乙酸、乳酸等，使培養(yǎng)基的pH降至4.5以下，當(dāng)加入甲基紅試劑則呈紅色，為甲基紅試驗陽性。若細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其他物質(zhì)（如醇、酮、醚、氣體和水等），則培養(yǎng)基的酸度仍在pH6.2以上，故加入甲基紅指示劑呈黃色，是為陰性。 （2）培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理

49、。 （3）方法：將待檢菌接種于上述培養(yǎng)基中，培養(yǎng)2～4d，于培養(yǎng)基內(nèi)加入甲基紅試劑，立即觀察結(jié)果。 （4）結(jié)果：呈現(xiàn)紅色為陽性；橘紅色為弱陽性；黃色為陰性。 （5）應(yīng)用：主要用于鑒別大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌，前者為陽性，后者為陰性。此外腸桿菌科中沙門菌屬、志賀菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬等為陽性，而腸桿菌屬、哈夫尼亞菌屬則為陰性。 V.P 2 原理 某些細(xì)菌在葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)液中能分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸縮合，脫羧成乙酰甲基甲醇，后者在強堿環(huán)境下，被空氣中氧，氧化為二乙酰，二乙酰與蛋白胨中的胍基生成紅色化合物，稱V－P（+）反應(yīng)。 2簡述微生物菌株鑒定的主要步驟和

50、微生物的分裂鑒定方法。 a獲得該種微生物的純種培養(yǎng) b 測定一系列必要的鑒定指標(biāo) c 查找權(quán)威性的鑒定手冊 方法：a 經(jīng)典方法：1 經(jīng)典的鑒定指標(biāo) 2 微生物的微型，簡便，快速或自動化鑒定技術(shù) b 現(xiàn)代方法：1通過核酸分析鑒定微生物遺傳型 2 細(xì)胞化學(xué)成分用作鑒定指標(biāo) 3 數(shù)值分類法 第十章 分類學(xué)的3個具體任務(wù)：分類，鑒定，命名。 微生物的種是一個基本分類單元，它是一大群表型特征高度相似，親緣關(guān)系極其接近，與同屬內(nèi)其他物種有著明顯差異的一大群菌株的總稱。在微生物中，一個種只能用該種內(nèi)的一個典型菌株當(dāng)做他的具體代表，故此典型菌株就成了該種的模式種。 雙名法是由前面一個屬名和

51、后面一個種名加詞構(gòu)成。 菌株：它表示任何一個由獨立分離的單細(xì)胞繁殖而成的純遺傳性群體及其一切后代。在同一菌種的不同菌株間，作為鑒定用的一些主要形狀上雖個個相同，但不作為鑒定用的一些小性狀卻可以有很大差異，尤其是一些生化形狀，代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量性狀等。 三域?qū)W說：三域指古細(xì)菌域，真核生物域，真細(xì)菌域。 伯杰氏手冊，原核生物 Ainsworth等人的菌物分類系統(tǒng)綱要，真菌 微生物分類鑒定方法的4個不同水平：a細(xì)胞形態(tài)和習(xí)性水平b細(xì)胞組分水平c蛋白質(zhì)水平d核酸水平：包括G+Cmol%值測定，核算分子雜交，rRNA寡核苷酸編目分析。 菌種鑒定基本步驟：a獲得該微生物的純培養(yǎng)物b測定一系列必要的

52、鑒定指標(biāo)c查找權(quán)威性的菌種鑒定手冊。 數(shù)值分類法：是一種依據(jù)數(shù)值分析的原理，借助現(xiàn)代計算機技術(shù)對擬分類的微生物對象按大量表型形狀的相似性程度進(jìn)行統(tǒng)計，歸類的方法。 B.s 枯草芽孢桿菌 E.c 大腸桿菌 S.a 金黃色葡萄球菌 S.c釀酒酵母橢圓變種 A.放線菌屬 S.g 灰色鏈霉菌 C.u 產(chǎn)朊假絲酵母 A.f 黃曲霉 A.n 黑曲霉 R o 米根霉 名詞解釋 1伴孢晶體：少數(shù)芽包桿菌在形成芽孢的同時，會在芽孢旁側(cè)形成一顆方形，菱形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體。 2L型細(xì)菌：指在實驗室或宿主細(xì)胞內(nèi)，通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺損菌株。 3古生

53、菌：又稱古細(xì)菌。是一個在進(jìn)化途徑上很早就與真核生物與真細(xì)菌相互獨立的生物類群，主要包括一些獨特生態(tài)類型的原核生物。 4菌物界：指和植物界動物界相并列的一類無葉綠素，依靠細(xì)胞表面吸收有機養(yǎng)料，細(xì)胞壁含幾丁質(zhì)的真核微生物。 7包涵體；動植物細(xì)胞中的病毒群體，顆粒狀。 8溫和噬菌體；噬菌體侵染宿主后，并不增殖裂解，而是與宿主DNA結(jié)合，隨宿主DNA復(fù)制而復(fù)制，此時細(xì)胞中找不到形態(tài)上可見的噬菌體。 9溶源菌；含有溫和噬菌體的細(xì)菌。 10類病毒，是一類 只含RNA一種成分，專性寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體。 11生長因子；是一類微生物正常生長代謝所必須，又無法從簡單的碳源氮源自行合成的所需極微

54、量的有機物。 12基團移位；是一種既需要特異性載體蛋白，又需要耗能的運輸方式。 13選擇性培養(yǎng)基；選擇培養(yǎng)基是一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)，物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基，具有使混合菌群中劣勢菌變優(yōu)勢菌的功能，廣泛用于菌種的篩選等領(lǐng)域 14鑒別性培養(yǎng)基；培養(yǎng)基中加入能與某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形相似它種菌落相區(qū)分的培養(yǎng)基 15次生代謝產(chǎn)物；指某些微生物生長到穩(wěn)定期前后，以結(jié)構(gòu)簡單，代謝途徑明確，產(chǎn)量較大的初生代謝產(chǎn)物作前體，經(jīng)過復(fù)雜的次生代謝途徑所合成的各種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的化學(xué)物 16ED途徑；是少數(shù)EMP不完整的細(xì)菌所特有的利用葡

55、萄糖的替代途徑。 17發(fā)酵；目前泛指好氧型或厭氧型微生物用來生產(chǎn)代謝產(chǎn)物或食品飲料的一類生產(chǎn)方式，狹義； 18異型乳酸發(fā)酵；凡葡萄糖經(jīng)乳酸發(fā)酵后除主要產(chǎn)生乳酸外還產(chǎn)生乙酸乙醇，CO2等其他產(chǎn)物的發(fā)酵稱為異型乳酸發(fā)酵。 19生物固氮；是指大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化作用而還原成氨的過程。只有原核生物才有固氮能力。 20石碳酸系數(shù)；在一定時間內(nèi)，被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度與達(dá)到同效的石碳酸的稀釋度之比。 21同步生長；通過獲得同步培養(yǎng)物的手段，使細(xì)胞群體中各個體都處于分裂步調(diào)一致的生長狀態(tài) 22連續(xù)培養(yǎng)；當(dāng)微生物以單批培養(yǎng)的方式培養(yǎng)到指數(shù)期后期時，一方面以一定的速度流

56、入新鮮的培養(yǎng)液和通入無菌空氣，并立即攪拌均勻，另一方面以溢流的方式，以相同的速度不斷流出培養(yǎng)物。于是容器內(nèi)的培養(yǎng)物就可達(dá)到動態(tài)平衡，其中的微生物可長期保持在指數(shù)期的平衡生長狀態(tài)和恒定的生長速率上，于是形成了連續(xù)生長， 23恒化器；根據(jù)培養(yǎng)其內(nèi)微生物生長密度，借光電控制系統(tǒng)控制培養(yǎng)液流速，以達(dá)到菌體密度高，生長速率恒定的連續(xù)培養(yǎng)器。 24恒濁器；通過保持有一種生長限制因子的培養(yǎng)液的流速不變，使微生物始終處在低于其最高生長速率的條件下進(jìn)行生長繁殖的連續(xù)培養(yǎng)器。 25質(zhì)粒；凡游離于原核生物基因組外，具有獨立復(fù)制能力的小型共價閉合環(huán)狀dsDNA分子‘ 26F因子；又稱F質(zhì)粒，性因子，大腸桿菌等

57、細(xì)菌決定性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒 27營養(yǎng)缺陷型；指通過誘變育種而產(chǎn)生的缺乏合成某些營養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸，維生素和堿基等的能力，必須在其基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的營養(yǎng)成分才能正常生長的變異株。 28準(zhǔn)性生殖；這是一種類似有性生殖但比有性生殖更原始的兩性生殖方式，這是同種而不同菌株的體細(xì)胞間的融合，它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率的基因重組并產(chǎn)生重組子。 29溶源轉(zhuǎn)變；當(dāng)正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時，因噬菌體基因組整合到宿主基因組上，而使其獲得除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象。 30Ames實驗；利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑有效方法。 31互生；指兩種

58、可以單獨生活的生物，當(dāng)它們生活在一起時，通過各自的代謝的活動而有利于對方或偏利于一方的生活方式。 32拮抗；指由某種生物所產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物可抑制他種生物生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系 33大腸菌群；指任何可發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的G-，桿狀，無芽孢，兼性厭氧的腸道細(xì)菌，典型代表是大腸桿菌。 34BOD5；即五日生化需氧量。即在20度下，Il污水中所含的有機物，在進(jìn)行微生物氧化時，五日內(nèi)所消耗的分子氧的毫克數(shù)。 35類毒素；用甲醛對外毒素進(jìn)行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性的生物制品。 36半抗原；無免疫原性只有免疫反應(yīng)性的抗原。 37 干擾素；是高等動物在病毒或dsRNA等誘生劑的刺激下所產(chǎn)生的一種高活性的具有廣譜抗病毒能力特異性糖蛋白。 38光復(fù)活作用；把經(jīng)UV照射后的微生物立即暴露于可見光下，會出現(xiàn)明顯的死亡率下降的現(xiàn)象。