2019高中生物 專題一 基因工程單元測試（二）新人教版選修3.doc

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專題一 基因工程 注意事項(xiàng)： 1．答題前，先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在試題卷和答題卡上，并將準(zhǔn)考證號條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。 2．選擇題的作答：每小題選出答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，寫在試題卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無效。 3．非選擇題的作答：用簽字筆直接答在答題卡上對應(yīng)的答題區(qū)域內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無效。 4．考試結(jié)束后，請將本試題卷和答題卡一并上交。 一、選擇題（本題包括20小題，每小題3分，共60分，每小題只有一個選項(xiàng)最符合題意） 1．下圖是某DNA片段，下列有關(guān)該圖的敘述中，不正確的是（ ） A．②③④組成DNA的基本組成單位 B．⑥在DNA中特定排列順序可代表遺傳信息 C．某限制性內(nèi)切酶可選擇⑤作為切點(diǎn) D．DNA連接酶可連接①處斷裂的化學(xué)鍵 2．下列所示的黏性末端是由幾種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的（　　） A．1種 B．2種 C．3種 D．4種 3．在基因工程中用到的限制性核酸內(nèi)切酶主要從原核生物中獲得，一種限制酶只能識別雙鏈DNA某種特定核苷酸序列，并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子，這與酶的什么性質(zhì)相吻合（ ） A．高效性 B．具有多樣性 C．專一性 D．催化活性受外界條件影響 4．下列關(guān)于DNA連接酶的作用敘述，正確的是（ ） A．將單個核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵 B．將斷開的兩個DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵 C．連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵 D．只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來，而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接 5．關(guān)于基因工程的操作工具的說法，正確的是（ ） A．所有的限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列 B．質(zhì)粒具有標(biāo)記基因，以便為目的基因的表達(dá)提供條件 C．載體必須具備的條件之一：具有多個限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接 D．DNA連接酶使黏性末端的堿基之間形成氫鍵 DNA連接酶使黏性末端之間形成磷酸二酯鍵，D錯誤。 6．下列不屬于獲得目的基因方法的是（ ） A．從基因文庫中獲取 B．利用人工合成法獲得 C．利用PCR技術(shù)大量獲得 D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得 7．下列關(guān)于基因文庫的說法中，錯誤的是（ ） A．cDNA文庫中的基因可以在不同物種間進(jìn)行交流 B．某果蠅X染色體上的所有基因組成的文庫是部分基因文庫 C．從cDNA文庫中獲取的目的基因，既無啟動子，又無終止子 D．取出果蠅某細(xì)胞中全部mRNA，通過反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的全部DNA片段稱為該果蠅的基因組文庫 8．PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。下列有關(guān)該技術(shù)的敘述，不正確的是（ ） A．PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制 B．變性過程中利用高溫使DNA雙鏈解開 C．復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成的 D．延伸過程需要Taq酶、ATP、四種核糖核苷酸 9．以下為形成cDNA過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是（ ） A．催化①過程的酶是RNA聚合酶 B．催化②⑤過程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高溫 C．④過程發(fā)生的變化是引物與單鏈 DNA 結(jié)合 D．如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的 40%，則一個雙鏈DNA中，A與 G之和也占該 DNA 堿基含量的40% 10．下圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ所示限制酶的酶切位點(diǎn)。能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是（ ） A．啟動子 B．tetR C．復(fù)制原點(diǎn) D．a(chǎn)mpR 11．下列有關(guān)基因表達(dá)載體的說法，正確的是（ ） A．基因表達(dá)載體是基因工程的核心 B．終止子是決定翻譯過程結(jié)束的信號 C．基因表達(dá)載體不會因受體細(xì)胞不同及導(dǎo)入方法的差別而有所差別 D．有人認(rèn)為將某生物的所有DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞更簡便,不需構(gòu)建基因表達(dá)載體 12．受體細(xì)胞不同，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法也不相同，下列受體細(xì)胞與導(dǎo)入方法匹配錯誤的一項(xiàng)是（ ） A．棉花細(xì)胞花粉管通道法 B．大腸桿菌用Ca2+處理法 C．羊受精卵農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 D．番茄細(xì)胞基因槍法 13．檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因采用的方法是（ ） A．抗原一一抗體雜交法 B．蛋白質(zhì)鑒定法 C．mRNA雜交法 D．放射性同位素標(biāo)記的探針 14．在基因工程操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對的步驟是（ ） A．人工合成目的基因 B．目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 C．目的基因的檢測和表達(dá) D．將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 15．利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類需要的產(chǎn)品。下列各項(xiàng)中最能說明目的基因在受體細(xì)胞中完成了表達(dá)的是（ ） A．番茄細(xì)胞中檢測到魚的抗凍蛋白基因 B．大腸桿菌中檢測到人胰島素基因的mRNA C．酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白 D．山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人凝血酶DNA序列 16．如圖表示轉(zhuǎn)基因動植物的培育過程。據(jù)圖分析，下列有關(guān)敘述正確的是（ ） A．在獲得目的基因的過程中，需要使用限制酶和DNA連接酶等工具酶 B．受體細(xì)胞A、B一定均為受精卵 C．②過程需要用到動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)、胚胎移植等生物技術(shù) D．將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞B時常使用大腸桿菌作為工具去侵染植物細(xì)胞 17．下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述正確的是（ ） A．②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與 B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒全部整合到了④的染色體上 C．④的染色體上若含抗蟲基因，則⑤一定會表現(xiàn)出抗蟲性狀 D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異 18．據(jù)新聞報道，阿根廷科學(xué)家近日培育出了世界上第一頭攜帶有兩個人類基因的奶牛，因此有望生產(chǎn)出和人類母乳極其相似的乳制品。下列相關(guān)敘述正確的是（ ） A．該過程需要限制酶作為“剪刀”和DNA聚合酶作為“針線” B．該過程中人類基因和運(yùn)載體的結(jié)合是在奶牛體內(nèi)完成的 C．該過程發(fā)生的變異是定向的 D．人類基因?qū)肽膛ｓw內(nèi)就可以表達(dá) 19．蛋白質(zhì)工程的基本操作程序正確是（ ） ①蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)合成 ②DNA合成 ③mRNA合成 ④蛋白質(zhì)的預(yù)期功能 ⑤根據(jù)氨基酸的序列推出脫氧核苷酸的序列（ ） A．⑤→④→③→②→①→② B．①→②→③→④→⑤→① C．④→①→⑤→②→③→① D．②→③→⑤→①→②→④ 20．下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是（ ） A．蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出的第二代基因工程 B．基因工程合成天然存在的基因，蛋白質(zhì)工程合成天然存在的蛋白質(zhì) C．基因工程是分子水平操作，蛋白質(zhì)工程是細(xì)胞水平（或性狀水平）操作 D．基因工程需對基因進(jìn)行操作，蛋白質(zhì)工程需對蛋白質(zhì)進(jìn)行操作 二、非選擇題（本題包括3小題，每空2分，共40分） 21．（12分）北極比目魚中有抗凍基因，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意圖，請回答： （1）利用過程①的方法構(gòu)建的基因文庫稱為__________。與真核基因相比，其結(jié)構(gòu)中不含______序列。 （2）為使過程①獲取的目的基因在番茄細(xì)胞中能夠表達(dá)，在構(gòu)建表達(dá)載體時，需在目的基因的兩端加入__________，確認(rèn)抗凍基因是否正確表達(dá)，應(yīng)檢測植株中__________是否呈陽性。 （3）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，可以將目的基因?qū)敕洋w細(xì)胞中染色體的DNA上，其原理是________________。 （4）發(fā)現(xiàn)一種抗凍能力很強(qiáng)的細(xì)菌（Ac菌），通過細(xì)胞融合技術(shù)構(gòu)建雜種抗凍體系的植株過程中能否只用一種酶分離原生質(zhì)體？理由是________________ _ 。 22．（16分）科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)將結(jié)核桿菌MPT64基因（能控制合成MPT64蛋白）成功導(dǎo)入胡蘿卜細(xì)胞，最終表達(dá)出肺結(jié)核疫苗?；卮鹣铝袉栴}： （1）為獲取MPT64基因，可從結(jié)核桿菌的細(xì)胞中提取對應(yīng)mRNA，在_______的作用下合成雙鏈cDNA片段，該cDNA片段__________(填“可以”、“部分可以”或“不可以”）實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流。 （2）通常采用PCR技術(shù)擴(kuò)增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，原因是____，在操作步驟中需要加熱至90～95℃的目的是__________。 （3）根據(jù)農(nóng)桿菌的特點(diǎn)，如果將MPT64基因插入_______上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進(jìn)入胡蘿卜細(xì)胞，并將其插入植物細(xì)胞中的_____上。要確認(rèn)MPT64基因是否在胡蘿卜植株中表達(dá)，應(yīng)檢測胡蘿卜植株中是否含有__________。 （4）科學(xué)家探知，若能把MPT64蛋白第20位和第24位的氨基酸都改變?yōu)榘腚装彼?，可以更好保證所生產(chǎn)的肺結(jié)核疫苗分子的穩(wěn)定性。根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理，可對_______進(jìn)行修飾或改造，以達(dá)到生產(chǎn)目的。 23．（12分）現(xiàn)代生物技術(shù)并不是各自獨(dú)立的，而是相互聯(lián)系、相互滲透的。下圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)某種動物蛋白的流程示意圖，請分析回答下列問題： （1）該生產(chǎn)流程中應(yīng)用到的現(xiàn)代生物技術(shù)有_____________、_____________(寫出其中兩種)。 （2）圖中A、B分別表示______________________、 。 （3）蛋白質(zhì)工程中，要對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，必須通過基因_______或基因______來完成，而不直接改造蛋白質(zhì)，原因是改造后的基因能夠遺傳，且改造基因易于操作。 2018-2019學(xué)年高二下學(xué)期選修三專題一訓(xùn)練卷 生 物（二）答 案 1. 【答案】C 【解析】②③④是DNA的基本組成單位脫氧核糖核苷酸，A正確；⑥堿基對在DNA中特定的排列順序可代表遺傳信息，B正確；限制性核酸內(nèi)切酶可選擇性地斷裂磷酸二酯鍵，而圖中⑤是氫鍵，C錯誤；DNA連接酶可使不同DNA片段通過形成磷酸二酯鍵進(jìn)行連接，即可連接①處斷裂的化學(xué)鍵，D正確。 2. 【答案】D 【解析】每種限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）只能識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵，據(jù)此分析圖示中的4個黏性末端可知：按照從左至右的順序，限制酶的識別序列依次如下圖所示。這4種限制酶的識別序列各不相同，因此圖示中的黏性末端是由4種限制酶作用產(chǎn)生的，D正確。 3. 【答案】C 【解析】酶具有多種特性，其中專一性是指一種酶只能催化一種或一類化合物的化學(xué)反應(yīng)。一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且能在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子，這顯然屬于酶的專一性，C正確。 4. 【答案】B 【解析】將單個核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯鍵是DNA聚合酶的作用，而DNA連接酶的作用是將斷開的兩個DNA片段的骨架連接起來，重新形成磷酸二酯鍵，A錯誤，B正確；氫鍵的形成不需要酶，DNA連接酶連接的是磷酸二酯鍵，C錯誤；DNA連接酶分別為EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶，這兩種酶都能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的粘性末端之間連接起來，其中T4DNA連接酶還可以連接平末端，D錯誤。 5. 【答案】C 【解析】一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，不同酶識別序列不同，A錯誤，質(zhì)粒具有標(biāo)記基因,以便檢測和篩選獲得目的基因的受體細(xì)胞，B錯誤，載體必須具備的條件之一：具有多個限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接，C正確。DNA連接酶使黏性末端之間形成磷酸二酯鍵，D錯誤。 6. 【答案】D 【解析】獲取目的基因的方法之一是從基因文庫中獲取，A錯誤；獲取目的基因的方法之一是利用人工合成法獲得，B錯誤；獲取目的基因的方法之一是利用PCR技術(shù)大量獲得，C錯誤；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法，而不是獲得目的基因的方法，D正確。 7. 【答案】D 【解析】cDNA文庫中的基因可以在不同物種間進(jìn)行交流，基因組文庫中部分基因可以，A正確；某果蠅X染色體上只包含了果蠅的少部分基因，不是果蠅的全部基因，因此X染色體上的所有基因組成的文庫是部分基因文庫，B正確；cDNA 文庫是指某生物某發(fā)育時期所轉(zhuǎn)錄的全部 mRNA 經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成的，因此無既無啟動子，又無終止子，C正確；取出果蠅某細(xì)胞中全部mRNA，通過反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的全部DNA片段稱為該果蠅的cDNA文庫，D錯誤。 8. 【答案】D 【解析】PCR技術(shù)包括變性、復(fù)性和延伸三個步驟。PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制，A正確；變性過程是利用高溫（90-95℃）使DNA雙鏈解開，B正確；復(fù)性過程是將變性后形成的單鏈DNA分子模板冷卻到55-60℃后，使引物與DNA模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對的方式結(jié)合，C正確；延伸過程是在70-75℃下，Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成，該過程需要Taq酶、四種脫氧核苷酸，D錯誤。 9. 【答案】C 【解析】①過程為逆轉(zhuǎn)錄，催化①過程的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯誤；②過程為DNA復(fù)制，⑤過程為延伸，催化②⑤過程的酶都是DNA聚合酶，但催化②過程的酶不耐高溫，催化⑤過程的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，具有耐高溫的特點(diǎn)，B錯誤；④過程為復(fù)性，溫度降到55℃至60℃時，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對分別與兩條DNA單鏈結(jié)合，C正確；依據(jù)堿基互補(bǔ)原則可知：在一個雙鏈DNA中，A＝T，C＝G，所以A與 G之和占該 DNA 堿基含量的50%，D錯誤。 10. 【答案】A 【解析】能讓目的基因開始表達(dá)的是啟動子，啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時間和表達(dá)的程度，D正確。 11. 【答案】A 【解析】基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程操作程序的核心步驟，A正確，終止子是DNA上的核苷酸序列，不是終止密碼，是決定轉(zhuǎn)錄過程結(jié)束的信號，B錯誤，基因表達(dá)載體因受體細(xì)胞不同及導(dǎo)入方法的差別而有所差別，C錯誤，外源基因不能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,所以需構(gòu)建基因表達(dá)載體，D錯誤。 12. 【答案】C 【解析】當(dāng)以棉花受精卵為受體細(xì)胞時常用花粉管通道法，A正確；用Ca2+處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于感受態(tài)，容易吸收DNA分子，B正確；動物受精卵為受體細(xì)胞時，常用顯微注射法，C錯誤；植物細(xì)胞為受體細(xì)胞時可以用基因槍法。D正確。 13. 【答案】D 【解析】檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)。即將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記，以此作為探針，使探針與基因組DNA雜交，如果顯現(xiàn)出雜交帶，就表明目的基因已插入染色體DNA中，D正確。 14. 【答案】D 【解析】人工合成目的基因的方法是逆轉(zhuǎn)錄法，需要進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對，A正確；目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時，需要進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對，B正確；檢測目的基因時需要用到基因探針，進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對；基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯過程，都要進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對，C正確；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對，D錯誤。 15. 【答案】C 【解析】目的基因表達(dá)的含義是控制合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。番茄細(xì)胞中檢測到魚的抗凍蛋白基因，但抗凍蛋白基因不一定表達(dá)，A錯誤；大腸桿菌中檢測到人胰島素基因的mRNA，說明人胰島素基因完成轉(zhuǎn)錄，但不一定合成人的胰島素，B錯誤；酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白，說明人的干擾素基因完成了表達(dá)，C正確；山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人凝血酶DNA序列，說明山羊乳腺細(xì)胞中含有人凝血酶基因，但不能說明基因完成表達(dá)，D錯誤。 16. 【答案】C 【解析】在獲得目的基因的過程中，不需要使用DNA連接酶，A錯誤；基因工程的植物受體細(xì)胞一般是體細(xì)胞，而動物受體細(xì)胞一般為受精卵，B錯誤；②過程由一個細(xì)胞發(fā)育到完整個體，需要用到動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)、胚胎移植等生物技術(shù)，C正確；將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞B時常使用農(nóng)桿菌作為工具去侵染植物細(xì)胞，D錯誤。 17. 【答案】D 【解析】重組質(zhì)粒的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶參與，DNA聚合酶用于DNA復(fù)制過程，A錯誤；③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細(xì)胞的染色體上，B錯誤；如果受體細(xì)胞的染色體上若含抗蟲基因，但不代表該基因就一定成功表達(dá)，因此不能確定⑤是否表現(xiàn)出抗蟲性狀，C錯誤；⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異，D正確。 18. 【答案】C 【解析】基因工程中的限制酶作為“剪刀”，負(fù)責(zé)剪切質(zhì)粒和目的基因，DNA連接酶作為“針線”，負(fù)責(zé)縫合脫氧核糖和磷酸交替連接而構(gòu)成的DNA骨架上的缺口，DNA聚合酶是在DNA復(fù)制或逆轉(zhuǎn)錄時，將單個的脫氧核苷酸連接到DNA單鏈的3＇端并形成磷酸二酯鍵，A錯誤；人類基因和運(yùn)載體的結(jié)合是體外條件下通過DNA連接酶將二者黏性末端縫合起來，B錯誤；基因工程就是按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向改造生物的遺傳性狀。對改造的生物而言，這種變異是定向的，C正確；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，不一定都能成功表達(dá)，因此，D錯誤。 19. 【答案】C 【解析】蛋白質(zhì)工程的基本途徑為：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA），最后按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。因此，蛋白質(zhì)工程的基本操作程序正確的是④→①→⑤→②→③→①，C正確。 20. 【答案】A 【解析】蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出的第二代基因工程，A正確；基因工程合成的是自然界中存在的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)，B錯誤；基因工程和蛋白質(zhì)工程都是分子水平操作，C錯誤；蛋白質(zhì)工程是對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，要通過基因改造，也是在基因水平操作，D錯誤。 21. 【答案】（1）部分基因文庫（或cDNA文庫） 內(nèi)含子 （2）啟動子、終止子 表達(dá)產(chǎn)物（或抗凍蛋白）目的基因 （3）隨農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上 （4）不能，兩者細(xì)胞壁成分不同（前者細(xì)胞壁成分為肽聚糖，后者為纖維素及果膠） 【解析】（1）圖中①表示反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程，該方法構(gòu)建的基因文庫為部分基因文庫（或cDNA文庫）；真核基因轉(zhuǎn)錄形成的成熟的mRNA是不包括內(nèi)含子對應(yīng)的片段的，因此該方法獲得的目的基因與真核基因相比，其結(jié)構(gòu)中不包含內(nèi)含子序列。（2）啟動子和終止子分別具有啟動基因轉(zhuǎn)錄和終止轉(zhuǎn)錄的功能，因此在在構(gòu)建表達(dá)載體時，需在目的基因的兩端加入啟動子、終止子，才能使得目的基因可能在番茄細(xì)胞中表達(dá)；檢測抗凍基因是否正確表達(dá)，應(yīng)檢測植株中表達(dá)產(chǎn)物（或抗凍蛋白）是否呈陽性。（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入番茄體細(xì)胞中染色體的DNA上的原理是：目的基因隨農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。（4）細(xì)菌的細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此只用一種酶不能獲得兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體。 22. 【答案】（1）逆轉(zhuǎn)錄酶 可以 （2）根據(jù)這一序列合成引物 目的基因受熱變性解旋為單鏈 （3）Ti質(zhì)粒的T-DNA 染色體的DNA MPT64蛋白 （4）MPT64基因 【解析】（1）獲取目的基因的方法有反轉(zhuǎn)錄法，即可從結(jié)核桿菌的細(xì)胞中提取對應(yīng)mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段。獲得的cDNA片段只包含基因的編碼區(qū)，沒有非編碼區(qū)，該cDNA片段可以實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流。（2）通常采用PCR技術(shù)擴(kuò)增MPT64基因，前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，在操作步驟中需要加熱至90-95℃的目的是目的基因受熱變性解旋為單鏈。（3）根據(jù)農(nóng)桿菌的特點(diǎn)，如果將MPT64基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以使目的基因進(jìn)入胡蘿卜細(xì)胞，并將其插入到植物細(xì)胞中的染色體的DNA上。要確認(rèn)MPT64基因是否在胡蘿卜植株中表達(dá)，應(yīng)檢測胡蘿卜植株中是否含有MPT64蛋白。（4）研究發(fā)現(xiàn)，如果將MPT64蛋白20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，以更好保證所生產(chǎn)的肺結(jié)核疫苗分子的穩(wěn)定性，科學(xué)家可以生產(chǎn)上述耐儲存的MPT64蛋白的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是蛋白質(zhì)工程，根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理，可對MPT64基因進(jìn)行修飾或改造，以達(dá)到生產(chǎn)目的。 23. 【答案】（1）蛋白質(zhì)工程 基因工程 （2）推測應(yīng)有的氨基酸序列 基因表達(dá)載體 （3）修飾 合成 【解析】（1）由圖中“預(yù)期蛋白質(zhì)功能→預(yù)期蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→A→相應(yīng)的脫氧核苷酸序列”這一基本流程可知，該生產(chǎn)流程中應(yīng)用到蛋白質(zhì)工程技術(shù)；由“目的基因與載體結(jié)合成B→受精卵→早期胚胎→受體→轉(zhuǎn)基因動物”可知，該生產(chǎn)流程應(yīng)用到基因工程技術(shù)。（2）由蛋白質(zhì)工程的基本流程可知，A表示推測應(yīng)有的氨基酸序列；B表示由目的基因與載體構(gòu)建而成的基因表達(dá)載體。（3）蛋白質(zhì)工程中，要對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，必須通過基因修飾或基因合成來完成，而不直接改造蛋白質(zhì)，原因是改造后的基因能夠遺傳，且改造基因易于操作。