高考生物二輪復(fù)習 專題講練 第8單元 選修模塊 14 生物技術(shù)實踐課件.ppt

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專題十四 生物技術(shù)實踐 專題十五 現(xiàn)代生物科技專題,目 錄,,第八單元 選修模塊,專題十四 生物技術(shù)實踐,返回目錄,真題聚焦拓展,核心考點整合,返回目錄,教師知識必備,【網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建】,返回目錄,教師知識必備,1．本專題通過果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作等生產(chǎn)實例和大腸桿菌的分離、純化操作等過程，考查最基本的生物學知識。將果酒、果醋、腐乳與泡菜的制作及特定微生物的分離、純化等實踐操作構(gòu)建成過程模型，可以加深對知識的記憶與理解。 2．應(yīng)讓學生弄清楚植物組織培養(yǎng)的操作程序。讓學生聯(lián)系生長素和細胞分裂素的作用，分析二者在植物組織培養(yǎng)中的作用。 3．植物有效成分的提取常與生產(chǎn)、生活實際相聯(lián)系，或與實驗結(jié)合進行考查，難度不大。利用圖解分析法理解特定植物成分的提取。,【考情分析】,返回目錄,近年高考分析,返回目錄,近年高考分析,返回目錄,1.微生物的利用 (1)微生物的分離和培養(yǎng)。 (2)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。 (3)利用微生物進行發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物。 2.生物技術(shù)在食品加工及其他方面的應(yīng)用 (1)從生物材料中提取某些特定的成分。 (2)運用發(fā)酵加工食品的基本方法。 (3)植物的組織培養(yǎng)。 3.實驗：DNA的粗提取與鑒定。,考綱要求,專題十四 生物技術(shù)實踐,1．[2015·全國卷Ⅰ] 下列敘述錯誤的是( ) 已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題： (1)顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通?？捎胈___________染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用____________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以________為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。,返回目錄,真題聚焦拓展,專題十四 生物技術(shù)實踐,(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用____________直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用________法進行計數(shù)。 (4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學測得相同時間內(nèi)，在35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下降解10 g油脂所需酶量依次為4 mg、1 mg、6 mg，則上述三個溫度中，________℃條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞________℃設(shè)計后續(xù)實驗。,返回目錄,真題聚焦拓展,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)血細胞計數(shù)板 稀釋涂布平板 (4)45 40 [解析] (1)油脂可被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色，或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色。由于微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，故提取時可選用萃取法，而不能用水蒸氣蒸餾法。(2)根據(jù)酶的專一性，為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以油脂為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，不產(chǎn)生脂肪酶的微生物無法生存。(3)測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)；若要測定其活菌,返回目錄,真題聚焦拓展,專題十四 生物技術(shù)實踐,數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。(4)據(jù)題可知，在35 ℃、40 ℃、45 ℃溫度下，45 ℃時降解10 g油脂所需酶量最大，故該溫度下酶活力最小。由于40 ℃時酶活性相對較大，因此，為了進一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞該溫度設(shè)計后續(xù)實驗。,返回目錄,真題聚焦拓展,專題十四 生物技術(shù)實踐,2．[2014·海南卷] 已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關(guān)。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學設(shè)計了一個實驗，實驗材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。 回答相關(guān)問題： (1)請完善下列實驗步驟。 ①標準管的制備：用______________________和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管。 ②樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的______________________，加到不同的比色管中，然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色，得到樣品管。,返回目錄,真題聚焦拓展,③將每個________分別與系列標準管進行比較，找出與樣品管顏色深淺________的標準管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。 (2)圖T14-1表示的是泡菜中__________________趨勢。 (3)泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細菌主要是________(填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”)。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,圖T14-1,真題聚焦拓展,[答案] (1)①亞硝酸鈉標準溶液 ②不同泡制天數(shù)的泡菜濾液 ③樣品管 最相近(其他合理答案也可) (2)亞硝酸鹽含量隨泡制時間的變化(其他合理答案也可) (3)乳酸菌 [解析] (1)在亞硝酸鹽的含量測定中，可利用亞硝酸鹽與顯色劑發(fā)生顏色反應(yīng)，根據(jù)顏色的深淺可確定亞硝酸鹽含量的多少。用不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液與顯色劑可制成顏色深淺不同的系列標準管，不同顏色深淺對應(yīng)的亞硝酸鈉濃度是已知的；用不同泡制天數(shù)的泡菜濾液與顯色劑反應(yīng)，制備一系列的樣品管，將樣品管的顏色與標準管進行顏色比對，找到與樣品管顏色深淺最接近的標準管，所對應(yīng)的亞硝酸鈉濃度即可代表樣品管中的亞硝酸鹽含量。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,(2)圖示曲線橫軸為時間，縱軸為亞硝酸鹽含量，則該曲線表示泡菜中亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時間的變化趨勢。 (3)泡菜制作的原理是乳酸發(fā)酵，產(chǎn)酸的細菌主要是乳酸菌。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,專題十四 生物技術(shù)實踐,3．[2014·新課標全國卷Ⅰ] 植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}： (1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將______分解成________。 (2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。,返回目錄,真題聚焦拓展,真題聚焦拓展,(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)： 注：“＋”表示有，“－”表示無。 據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲____________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________；培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是________________________________。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,[答案](1)纖維二糖 葡萄糖 (2)紅 透明圈 (3)不能 液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落 不能 培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成CR－纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 [解析] (1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，該酶是由C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶3種組分組成，前兩種酶可將纖維素分解為纖維二糖，葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解為葡萄糖。 (2)剛果紅可與纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物便無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,(3)生物適應(yīng)一定環(huán)境，環(huán)境對生物具有選擇作用，只有在纖維素含量豐富的環(huán)境中纖維素分解菌才會發(fā)揮作用。纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基。纖維素分解菌鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，要分離和鑒別纖維素分解菌，都需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,【備考指津】 1．本專題在高考中主要考查的內(nèi)容有傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用以及生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用。 2．本專題的題目往往以微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用為核心，綜合傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和其他方面的應(yīng)用進行考查。 3．備考時要將各種生物技術(shù)進行對比理解并牢記，要用生物學術(shù)語進行答題。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,真題聚焦拓展,考點一 果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較 ┃考例探究┃ 果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,返回目錄,核心考點整合,專題十四 生物技術(shù)實踐,,例1 某同學利用圖1所示裝置制作蘋果酒和蘋果醋，請分析回答有關(guān)問題：,圖T14-2,(1),(2),核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(1)可分別利用酵母菌和________菌制作果酒和果醋，這兩種微生物的區(qū)別是后者為________(填“厭氧”“好氧”或“兼性厭氧”)微生物。 (2)加入蘋果汁時，瓶內(nèi)要留出大約1/3的空間，目的是__________________________________________。 (3)酵母菌利用蘋果汁進行酒精發(fā)酵的反應(yīng)式為________________，密封充氣口后可用____________檢測是否有酒精生成。 (4)要利用蘋果酒繼續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)蘋果醋，接種發(fā)酵所用菌種后，需要將發(fā)酵溫度變?yōu)開_______，并________________________________。 (5)圖(2)中能表示裝置內(nèi)液體發(fā)酵過程中pH變化的曲線是________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)醋酸 好氧 (2)有利于酵母菌進行繁殖，防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出 (3)C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2 (酸性)重鉻酸鉀 (4)30～35 ℃ 適時通過充氣口充氣 (5)② [解析] (1)制作果醋所用的微生物是醋酸菌。酵母菌是兼性厭氧微生物，而醋酸菌是好氧微生物。(2)加入蘋果汁時，瓶內(nèi)要留出大約1/3的空間，有利于酵母菌進行繁殖，同時防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出。(3)在酸性條件下，重鉻酸鉀可與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。(4)制作果酒時所需的 條件是厭氧、18～25 ℃，而制作果醋時所需的條件是有,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,氧、30～35 ℃。(5)酵母菌進行酒精發(fā)酵時，產(chǎn)生的CO2使溶液pH略微下降，醋酸菌進行果醋發(fā)酵時，產(chǎn)生了大量的醋酸，使溶液pH快速下降，所以圖(2)中符合條件的曲線是②。,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,┃對點訓(xùn)練┃ 酸菜，古稱菹，《周禮》中就有其大名。制作酸菜的初衷是為了延長蔬菜保存期限。請回答： (1)酸菜制作過程中，起主要作用的微生物是__________。但是在發(fā)酵初期，很多雜菌會大量繁殖，其中導(dǎo)致泡菜水的表面長白膜的微生物是________________。 (2)實驗室可采用____________________________法進行菌種純化，在對該菌種進行培養(yǎng)時，與常規(guī)培養(yǎng)基相比，還需要額外在培養(yǎng)基中添加__________________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(3)為了保持所獲得的菌種純凈，需要進行菌種的保藏。若采用臨時保藏，需將菌種接種在________________上，放入4 ℃冰箱中可保藏3～6個月；若要長期保存，可將菌液與滅菌的________混勻，放在－20 ℃的冰箱中保存一年。 (4)在市場上購買的真空包裝酸菜，在沒有發(fā)生漏氣狀態(tài)下發(fā)生了“脹袋”現(xiàn)象，A同學懷疑是雜菌污染導(dǎo)致的，B同學懷疑是乳酸菌大量繁殖導(dǎo)致的，說出你支持誰的觀點并說出理由。支持________的觀點，理由是____________________________________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)乳酸菌 酵母菌(或產(chǎn)膜酵母) (2)平板劃線法或稀釋涂布平板 維生素 (3)固體斜面培養(yǎng)基 甘油 (4)A同學 乳酸菌代謝過程中不產(chǎn)生氣體(或乳酸菌呼吸作用不產(chǎn)生二氧化碳) [解析] (1)酸菜制作過程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，能發(fā)酵產(chǎn)生乳酸。在發(fā)酵初期，酵母菌(或產(chǎn)膜酵母)會導(dǎo)致泡菜水的表面長白膜。(2)在實驗室純化菌種常用平板劃線法或稀釋涂布平板法；維生素是乳酸菌生長繁殖所必需的，在自身體內(nèi)又不能合成，因此要在培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中添加維生素。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(3)進行菌種保藏時，若采用臨時保藏，需將菌種接種在固體斜面培養(yǎng)基上，放入4 ℃冰箱中可保藏3～6個月；若要長期保存，可將菌液與滅菌的甘油混勻，放在－20 ℃的冰箱中保存一年。(4)乳酸菌是厭氧型微生物，只能進行無氧呼吸，且無氧呼吸的產(chǎn)物只有乳酸，不產(chǎn)生氣體，因此支持A同學的觀點。,核心考點整合,考點二 蛋白質(zhì)和核酸 ┃考例探究┃ ?考向1 微生物培養(yǎng)的三大基本技術(shù) 1．無菌技術(shù)——消毒和滅菌的區(qū)別,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,2．培養(yǎng)基的制備技術(shù) (1)培養(yǎng)基的種類,返回目錄,核心考點整合,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(2)培養(yǎng)基的制備 ①過程：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。 ②原則： a．目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等，選擇原料配制培養(yǎng)基，如培養(yǎng)自養(yǎng)型的微生物就不用加入有機營養(yǎng)物質(zhì)。 b．營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。 c．pH要適宜：各種微生物適宜生長的pH范圍不同。,核心考點整合,3．微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)——平板劃線法與稀釋涂布平板法,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,例2 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。圖甲和圖乙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作和實驗結(jié)果示意圖，請據(jù)圖T14-3回答有關(guān)問題：,圖T14-3,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(1)圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時的實驗操作步驟之一，該過程被稱為________。若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。 (2)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________________________________________________。 (3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖，正確的操作順序是A→B→________________(用字母和箭頭表示)；找出圖乙中兩處錯誤的操作：________、________(用字母表示)。 (4)某同學將用平板劃線法接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h后，如果培養(yǎng)基上____________________________________，則說明無菌操作基本符合要求。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)倒平板 溫度(氧氣) pH(無菌) (2)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 (3)G→F→E→C→D→H C D (4)生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點 [解析] (1)圖甲所示的實驗操作為倒平板。若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，還要考慮溫度、氧氣、pH和無菌操作等一系列相關(guān)條件。(2)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染，因此要設(shè)置對照實驗。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，若有，,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,則說明培養(yǎng)基已被污染，應(yīng)重新配制培養(yǎng)基進行實驗。(3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖，正確的操作順序是A→B→G→F→E→C→D→H；圖乙中兩處錯誤的操作是C未在酒精燈火焰旁進行操作，D將第5區(qū)域內(nèi)的劃線與第1區(qū)域內(nèi)的劃線相連。(4)將接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h后，如果培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明沒有被雜菌污染，無菌操作基本符合要求。,核心考點整合,?考向2 微生物的分離與計數(shù) 1．微生物的分離 (1)篩選原則：人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物的生長。 (2)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌的比較,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,2．統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法 (1)顯微鏡直接計數(shù)法 ①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。 ②方法：用計數(shù)板計數(shù)。 ③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法) ①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。 ②計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C/V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。 ③操作：設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù)。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,例3 某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖T14-4所示。請分析并回答下列問題：,圖T14-4,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(1)在培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是____________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)目的菌生長所需的氮源和碳源來自培養(yǎng)基中的____________。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測目的菌的代謝類型是____________。 (3)在上述實驗操作過程中，獲得純凈目的菌的關(guān)鍵是______________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時，常采用平板劃線法進行接種，此過程中所用的接種工具是______________，操作時采用________滅菌的方法進行滅菌。,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(5)實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是______________________。 (6)某同學計劃統(tǒng)計污水池中目的菌的總數(shù)，他選用10－4、10－5、10－6倍稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗是________________________，此對照實驗的目的是________________________________________________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)篩選目的菌 選擇 (2)化合物A 異養(yǎng)需氧型 (3)防止外來雜菌污染 (4)接種環(huán) 灼燒 (5)防止造成環(huán)境污染 (6)不接種的空白培養(yǎng)基 證明培養(yǎng)基制備過程以及培養(yǎng)過程中無雜菌污染 [解析] (1)在培養(yǎng)基中加入特定物質(zhì)，可以篩選出特定的細菌。(2)根據(jù)題目所給的培養(yǎng)基配方可知，目的菌生長所需的氮源和碳源只能來自培養(yǎng)基中的化合物A。異養(yǎng)需氧型細菌需要振蕩培養(yǎng)。(3)獲得純凈目的菌的關(guān)鍵是防止外來雜菌污染。(4)用平板劃線法進行接種時，所用的,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,接種工具是接種環(huán)，操作時采用灼燒滅菌法進行滅菌。(5)為防止造成環(huán)境污染，實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理才能倒掉。(6)統(tǒng)計目的菌數(shù)量時，注意設(shè)置一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照實驗，此對照實驗的目的是證明培養(yǎng)基制備過程以及培養(yǎng)過程中無雜菌污染。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,┃對點訓(xùn)練┃ 金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色。圖T14-5為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關(guān)問題：,圖T14-5,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(1)按細胞結(jié)構(gòu)分類，金黃色葡萄球菌屬于________生物，從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進行________呼吸。 (2)7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分包括________________，用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)的主要目的是__________________________。 (3)操作中在血平板上的接種方法是________________，接種操作前后需要對接種工具進行____________滅菌。 (4)在制備血平板時需將pH調(diào)節(jié)至______________(填“微酸性”或“微堿性”)后滅菌，待培養(yǎng)基____________后，再加入適量血液。按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于______培養(yǎng)基。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(5)經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實驗，血平板上均出現(xiàn)__________________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善，完善的方案是______________________________________________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)原核 有氧 (2)碳源、氮源、水和無機鹽 增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量 (3)平板劃線法 灼燒 (4)微堿性 冷卻 鑒別 (5)周圍存在透明圈 設(shè)置不加鮮牛奶，其他操作均相同的對照組 [解析] (1)金黃色葡萄球菌是一種細菌，屬于原核生物。培養(yǎng)過程中沒有進行密閉處理且需要振蕩培養(yǎng)，因此金黃色葡萄球菌可進行有氧呼吸。(2)7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基可 為微生物生長提供所需要的碳源、氮源、水和無機鹽。用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)是為了增加金黃色葡,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,萄球菌的數(shù)量。(3)圖示中用的接種工具是接種環(huán)，說明在血平板上接種的方法是平板劃線法。接種工具在接種前后都要進行灼燒滅菌處理。(4)金黃色葡萄球菌的生長環(huán)境為微堿性，培養(yǎng)基在滅菌前要先調(diào)節(jié)pH。因金黃色葡萄球菌能破壞紅細胞，使其褪色，所以血平板上出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，說明有金黃色葡萄球菌存在，故血平板屬于鑒別培養(yǎng)基。(5)為增強實驗結(jié)論的嚴謹性，應(yīng)增加空白對照組。,核心考點整合,考點三 酶的應(yīng)用 ┃考例探究┃ 1.探究果膠酶的最適溫度和pH的相關(guān)實驗 (1)實驗流程： 制備蘋果泥 ↓ 設(shè)置一系列具有梯度的pH和溫度 ↓ 加入果膠酶反應(yīng)一段時間 ↓ 過濾果汁,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,圖T14-6,核心考點整合,(2)變量分析：該實驗的自變量是溫度或pH，因變量是酶的活性，檢測因變量是通過測定果汁的體積或澄清度來實現(xiàn)的。 注意：①在蘋果泥和果膠酶混合之前，一定要保證底物和酶達到所要求的溫度或pH條件，以避免混合后條件的變化，確保實驗結(jié)果的可信度和可靠性。 ②在探究溫度或pH對酶活性的影響時，不同的梯度溫度之間或不同的梯度pH之間構(gòu)成了相互對照，通過相互對照可確定果膠酶的最適溫度或pH。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,2．探究果膠酶的最適用量的實驗分析 (1)原理提示：本實驗是一個探究性的定量實驗，最適用量是在已知溫度、pH條件下測出的，因而果膠酶的最適用量應(yīng)標明溫度和pH。 (2)確定最適用量的方法：如果隨酶濃度的增加，濾出的果汁體積增加，說明酶的用量不足；當酶的濃度增加到某個值時，再增加酶的用量，濾出的果汁體積不再改變，說明酶的用量已經(jīng)足夠，那么，這個值就是酶的最適用量(如圖T14-7中M)。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,圖T14-7,核心考點整合,3．探究加酶洗衣粉洗滌效果的實驗設(shè)計 設(shè)計應(yīng)遵循單一變量原則，需有效地控制其他變量(如水質(zhì)、水溫等)，具體實驗的實驗變量如下：,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,4．固定化酶和固定化細胞技術(shù) (1)方法,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,(2)固定化酶與固定化細胞的比較,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,制備固定化酵母細胞的注意事項：①細胞的固定化要在嚴格無菌條件下進行；對制備的海藻酸鈉溶液、CaCl2溶液以及注射器等器材進行嚴格滅菌；②溶化海藻酸鈉時采用小火間斷加熱法，防止海藻酸鈉焦糊；③海藻酸鈉溶液濃度過高，將很難形成凝膠珠；濃度過低，凝膠珠所固定的酵母細胞數(shù)量少。,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,例4 1963年，諾和諾德公司向洗滌劑中加入堿性蛋白酶，推出了第一款加酶洗衣粉。堿性蛋白酶一般利用枯草芽孢桿菌生產(chǎn)。圖甲、乙為某科研小組對堿性蛋白酶相關(guān)性質(zhì)進行測試的結(jié)果。圖丙、丁為兩種常見的平板劃線法：連續(xù)劃線法和四區(qū)劃線法，前者適用于純化菌種較少的樣品，后者適用于純化菌種較多的樣品。請回答下列問題：,甲 pH對堿性蛋白酶活性的影響,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,,乙 溫度對堿性蛋白酶活性的影響,圖T14-8,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(1)由圖甲、乙可知，堿性蛋白酶發(fā)揮作用的適宜條件為____________________________。 (2)圖丁中依次進行四區(qū)劃線，四區(qū)的面積要求為C＜D＜E＜F，F(xiàn)區(qū)面積最大的原因是________________________。每次劃線后都要____________接種環(huán)，注意F區(qū)劃線不要與__________(填字母)區(qū)相連。 (3)某興趣小組欲從土壤中分離枯草芽孢桿菌，宜選擇圖________所示的方法劃線培養(yǎng)，分離得到的純化單菌落屬于____________(填“種群”或“群落”)。,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(4)堿性蛋白酶是枯草芽孢桿菌生長后期向細胞外分泌的一種酶，與該酶合成有關(guān)的細胞器是________________。若欲應(yīng)用固定化技術(shù)提高該酶的利用率，減少產(chǎn)物中的雜質(zhì)，則應(yīng)采用______________________________法。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)pH為10.2左右和溫度為42 ℃左右 (2)使該區(qū)出現(xiàn)大量的單菌落以供挑選(或便于菌種分散) 灼燒 C(C、D) (3)丁 種群 (4)核糖體 化學結(jié)合法或物理吸附 [解析] (1)由圖甲可知，堿性蛋白酶的最適pH為10.2左右，由圖乙可知，堿性蛋白酶的最適溫度為42 ℃左右。(2)由于要通過平板劃線操作使F區(qū)出現(xiàn)大量的單菌落以供挑選(或便于菌種分散)，所以F區(qū)面積最大。每次劃線后，為避免接種環(huán)上殘留的菌種影響下次劃線，需要將接種環(huán)進行灼燒滅菌，殺死上次劃線殘留的菌種。據(jù)圖丁分析，F(xiàn)區(qū)劃線不要與C區(qū)相連。(3)從土壤中分離枯草芽孢桿菌，宜選擇,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,圖丁所示的方法劃線培養(yǎng)，分離得到的純化單菌落是一個細胞增殖多次形成的肉眼可見的、有一定的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的菌群，它屬于種群。(4)堿性蛋白酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，其在核糖體上合成。堿性蛋白酶的分子較小，可以使用化學結(jié)合法或物理吸附法固定該酶，提高該酶的利用率。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,┃對點訓(xùn)練┃ 圖(1)表示制備固定化酵母細胞的有關(guān)操作，圖(2)是利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵的示意圖。請回答下列問題： (1)圖(1)中X溶液為______________________，其作用是使________________________。,圖T14-9,（2）,（1）,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(2)圖(1)中制備的凝膠珠用________洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖(2)裝置中。圖(2)發(fā)酵過程中攪拌的目的是使________________________。 (3)在用海藻酸鈉包埋酵母菌形成凝膠珠的過程中，加熱溶解海藻酸鈉時需注意用__________加熱，然后將溶化好的海藻酸鈉溶液____________后，加入酵母菌充分攪拌混合均勻。 (4)研究發(fā)現(xiàn)，固定化強度強的酵母顆粒發(fā)酵效果好，且穩(wěn)定性高、使用壽命長。某機構(gòu)利用上述裝置，將濃度為2%、2.5%、3%的海藻酸鈉分別用濃度為2%、3%、4%的X溶液進行凝膠化處理，所得到的固定化酵母顆粒的強度及在28 ℃下發(fā)酵48 h后的酒精產(chǎn)量見下表：,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,依照表格分析，隨著X溶液濃度的增加，________增加；用于酒精發(fā)酵效果最好的海藻酸鈉與X溶液濃度分別是________、________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)CaCl2溶液 海藻酸鈉形成凝膠珠 (2)蒸餾水 培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸 (3)小火(或間斷) 冷卻至室溫 (4)固定化強度 2% 4% [解析] (1)圖(1)為固定化酵母細胞的步驟，X溶液為CaCl2溶液，作用是使膠體聚沉，即使海藻酸鈉形成凝膠珠。(2)圖(2)為發(fā)酵過程，因為是無氧呼吸，故攪拌的目的只是增加培養(yǎng)液與酵母菌的接觸面，而不是增加溶氧量。(3)溶解海藻酸鈉時需注意用小火(或間斷)加熱，然后將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫后，再加入酵母菌充分攪拌混合均勻，以防止高溫殺死酵母菌。(4)分析表格可知，,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,隨著X溶液濃度的增加，酵母顆粒的固定化強度增加，固定化強度和產(chǎn)酒精量都較大時的海藻酸鈉與X溶液濃度分別是2%、4%。,核心考點整合,考點四 生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 ┃考例探究┃ 1.菊花莖組織培養(yǎng)與月季花藥離體培養(yǎng)的比較,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,2.DNA的粗提取與鑒定,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,3. PCR反應(yīng)過程 (1)變性：當溫度上升到90 ℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，如圖T14-10所示：,返回目錄,核心考點整合,專題十四 生物技術(shù)實踐,,圖T14-10,核心考點整合,(2)復(fù)性：溫度下降到50 ℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合，如圖T14-11所示： (3)延伸：溫度上升到72 ℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，如圖T14-12所示：,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,圖T14-11,圖T14-12,核心考點整合,4. 蛋白質(zhì)分離的方法 (1)凝膠色譜法 ①含義：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法。 ②原理：,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,,核心考點整合,(2)電泳法 ①含義：帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。 ②原理：在一定的pH下，一些生物大分子(如多肽、核酸等)可解離的基團會帶正電或負電，在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動。 ③作用過程：,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,圖T14-13,核心考點整合,5. 三種植物芳香油提取方法的比較,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,例5 在食用辣椒果實中產(chǎn)生辣味的物質(zhì)是辣椒素，它不溶于水，易溶于有機溶劑，具有很強的鎮(zhèn)痛和消炎作用，應(yīng)用前景廣闊。請回答問題： (1)辣椒的組織培養(yǎng)過程依據(jù)的原理是______________，其中____________(填“脫分化”或“再分化”)過程不需要提供光照。 (2)組織培養(yǎng)過程中，應(yīng)利用體積分數(shù)為70%的酒精對外植體進行________處理。培養(yǎng)辣椒組織的培養(yǎng)基中要添加蔗糖，目的是________________。,核心考點整合,返回目錄,專題十四 生物技術(shù)實踐,,(3)根據(jù)辣椒素不溶于水、易溶于有機溶劑的性質(zhì)，我們可以用萃取法提取辣椒素。萃取的效率主要取決于__________________，同時還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量等條件的影響。萃取加熱時需要安裝冷凝回流裝置，其目的是______________________。萃取過程中應(yīng)采用______加熱，原因是__________________________。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)植物細胞的全能性 脫分化 (2)消毒 提供能源、維持滲透壓 (3)萃取劑的性質(zhì)和使用量 防止有機溶劑揮發(fā) 水浴 有機溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸 [解析] (1)植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。植物組織培養(yǎng)中脫分化過程不需要提供光照。(2)植物組織培養(yǎng)過程中，應(yīng)利用體積分數(shù)為70%的酒精對外植體進行消毒處理。植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中要添加很多成分，其中蔗糖的作用有兩個：一是提供能源，二是維持滲透壓。 (3)萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，同時還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,和時間等條件的影響。萃取加熱時要安裝冷凝回流裝置，目的是防止有機溶劑揮發(fā)。另外，避免明火加熱，采用水浴加熱的原因是有機溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒和爆炸。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,┃對點訓(xùn)練┃ 胡蘿卜素不僅可以用來治療缺乏維生素A的疾病，還可以廣泛用作食品、飲料等的添加劑。近年來，科學家發(fā)現(xiàn)天然胡蘿卜素具有使癌變細胞恢復(fù)成正常細胞的功能，所以市場需求量大，經(jīng)濟效益高。某工廠利用細胞培養(yǎng)來提取胡蘿卜素，過程如圖T14-14所示。據(jù)此回答下列問題：,圖T14-14,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(1)胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)后能產(chǎn)生胡蘿卜素的原因是它具有__________________。誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程叫________，該過程需添加的激素有__________________。 (2)培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基感染雜菌，原因可能是______________________________________，雜菌和培養(yǎng)細胞之間的種間關(guān)系是________。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用的萃取劑是__________________，加熱提取過程中，應(yīng)嚴格控制__________________，原因是________________________。 (4)提取的胡蘿卜素可通過______________法進行鑒定，在鑒定過程中需用________________進行對照。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,[答案] (1)產(chǎn)生胡蘿卜素的基因(或全能性) 脫分化 細胞分裂素和生長素 (2)滅菌不徹底或未嚴格進行無菌操作 競爭 (3)石油醚 溫度和時間 溫度過高和時間過長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解 (4)紙層析 標準樣品(或標樣) [解析] (1)胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)后能產(chǎn)生胡蘿卜素的原因是它具有產(chǎn)生胡蘿卜素的基因。誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程叫脫分化，該過程需添加的激素有細胞分裂素和生長素。 (2)培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基感染雜菌，原因可能是滅菌不徹底或未嚴格進行無菌操作，雜菌和培養(yǎng)細胞都以培養(yǎng)基中的物質(zhì)為營養(yǎng)原料，所以它們之間為競爭關(guān)系。,核心考點整合,返回目錄,,專題十四 生物技術(shù)實踐,(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用的萃取劑是石油醚，加熱提取過程中，應(yīng)嚴格控制溫度和時間，原因是溫度過高和時間過長會導(dǎo)致胡蘿卜素分解。(4)提取的胡蘿卜素可通過紙層析法進行鑒定，在鑒定過程中需用標準樣品(或標樣)進行對照。,核心考點整合,返回目錄,教師備用習題,1．[備選理由] 本題考查果酒和果醋的制作，可作為例1的補充。 圖T14-15是以鮮蘋果汁為原料，利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋的過程簡圖，分析并回答： (1)過程甲中使用的微生物是________。在將鮮蘋果汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約________的空間。經(jīng)過10～12天后，在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測樣液，如果顏色由________,圖T14-15,返回目錄,教師備用習題,變?yōu)開_______色，說明產(chǎn)生了酒精。 (2)過程乙中使用的微生物是________，可以從食醋中分離、純化獲得，步驟如下： 第一步：配制________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。培養(yǎng)基一般都含有______________和無機鹽。 第二步：對培養(yǎng)基進行滅菌，其方法是_________________。 第三步：接種。微生物常用的接種方法有________法和________法。 第四步：培養(yǎng)。溫度控制在________℃范圍內(nèi)。 第五步：挑選符合要求的________。 (3)在________的條件下，如果缺少糖源，乙中的微生物將甲過程的產(chǎn)物變?yōu)開_______，再將其變?yōu)開_______。,返回目錄,教師備用習題,[答案] (1)酵母菌 1/3 橙色 灰綠 (2)醋酸(桿)菌 固體 水、碳源、氮源 高壓蒸汽滅菌法 平板劃線 稀釋涂布平板 30～35 菌落 (3)氧氣充足(有氧) 乙醛 醋酸 [解析] (1)甲是果酒發(fā)酵過程，參與果酒制作的微生物是酵母菌。在將鮮蘋果汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約1/3的空間，以防止由于酵母菌在酒精發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO2，而導(dǎo)致發(fā)酵液溢出。經(jīng)過10～12天后，在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測樣液，如果顏色由橙色變?yōu)榛揖G色，說明產(chǎn)生了酒精。 (2)乙是果醋發(fā)酵過程，參與果醋制作的微生物是醋酸(桿)菌，可以從食醋中分離、純化獲得，步驟如下：,返回目錄,教師備用習題,第一步：配制固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。 第二步：對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌。 第三步：接種。微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。 第四步：培養(yǎng)。醋酸菌的適宜生長溫度是30～35 ℃，因此要將溫度控制在30～35 ℃范圍內(nèi)。 第五步：挑選符合要求的菌落。 (3)在氧氣充足(有氧)的條件下，如果缺少糖源，醋酸菌可將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?返回目錄,教師備用習題,2． [備選理由]本題綜合考查微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用，可作為例2的補充。 人和哺乳動物的尿中含有尿素，環(huán)境中大量尿素的存在會造成污染。土壤中有些細菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源。某研究小組對土壤中的這類細菌進行分離，用以回收氮元素，同時凈化環(huán)境。請回答下列相關(guān)問題： (1)分離培養(yǎng)細菌時必須進行無菌操作。培養(yǎng)基的滅菌一般采用____________法。配制培養(yǎng)基時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是__________________。,返回目錄,教師備用習題,(2)將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后采用__________法接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在____________旁進行操作。接種后的培養(yǎng)皿應(yīng)__________放于37 ℃的恒溫箱中培養(yǎng)。 (3)用__________________的培養(yǎng)基可獲得能分泌脲酶的細菌，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在能分泌脲酶的細菌，則其菌落周圍會出現(xiàn)____________，這是由于尿素被分解產(chǎn)生____________，使pH升高，培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力____________。,返回目錄,教師備用習題,[答案] (1)高壓蒸汽滅菌 先調(diào)pH，后滅菌 (2)稀釋涂布平板 酒精燈火焰 倒置 (3)以尿素為唯一氮源 選擇 紅色環(huán)帶 氨 越強 [解析] (1)培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。培養(yǎng)基制作時應(yīng)該先調(diào)節(jié)pH，再滅菌。(2)將樣液進行一系列的梯度稀釋，然后采用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)。為避免雜菌污染，操作要在酒精燈火焰旁進行。培養(yǎng)皿需要倒置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(3)篩選和分離尿素分解菌時，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素分解菌產(chǎn)生的脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂保筽H呈堿性而出現(xiàn)紅色環(huán)帶。變色區(qū)域越大，說明該菌株利用尿素的能力越強。,返回目錄,教師備用習題,3． [備選理由] 本題考查酶的應(yīng)用，可作為例4的補充。 果膠酶能分解果膠等物質(zhì)，在食品加工業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用。某興趣小組的同學對三種不同品牌的果膠酶制劑(制劑中果膠酶濃度相同)進行了探究，其實驗設(shè)計及實驗結(jié)果如下表所示。請回答： 注：“＋”越多表示果汁越混濁。,返回目錄,教師備用習題,(1)表中X所代表的數(shù)值應(yīng)為________，Y的果汁混濁程度應(yīng)表示為________(用若干個“＋”表示)。 (2)除了觀察果汁混濁程度外，還可以通過檢測________________的變化量來判斷不同品牌果膠酶制劑的效果。若使用該方法，相關(guān)物質(zhì)變化量最大的是________組。 (3)微生物是生產(chǎn)果膠酶的優(yōu)良生物資源。分離和篩選能產(chǎn)生果膠酶的微生物，使用的培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一碳源；如需進一步純化果膠酶，可根據(jù)果膠酶分子的______________________________________________(至少寫出兩點)等特性進行分離提純。由于果膠酶的活性容易受到外界環(huán)境因素的干擾，所以應(yīng)利用____________技術(shù)減少影響，從而保護酶的活性。,返回目錄,教師備用習題,(4)該興趣小組進一步探究了一定濃度的果膠酶制劑乙在不同濃度果汁下的作用，實驗結(jié)果如圖T14-16中曲線所示。請在圖中畫出同等條件下果膠酶制劑丙的作用曲線。,圖T14-16,返回目錄,教師備用習題,[答案] (1)4 ＋＋＋＋(或多于＋＋＋＋) (2)反應(yīng)物 1 (3)果膠 形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等(寫出兩點) 固定化酶(或固定化細胞) (4)如圖(所畫曲線低于原曲線 且兩曲線最終重合；正確標 識“丙”曲線)：,圖T14-17,返回目錄,教師備用習題,[解析](1)對照實驗應(yīng)遵循單一變量原則，要嚴格控制無關(guān)變量適宜且相同。根據(jù)題中實驗分組處理可知，第4組實驗中沒有添加果膠酶制劑，為保證各組實驗溶液體積相同，X所代表的數(shù)值應(yīng)為4；果膠酶能分解果膠等物質(zhì)，使果汁澄清，故沒有添加果膠酶制劑的第4組的果汁混濁程度應(yīng)當最高。(2)果膠酶可水解果膠，可通過反應(yīng)中反應(yīng)物的減少量或生成物的生成量來表示果膠酶的作用效果。(3)果膠可作為微生物培養(yǎng)的碳源，并且果膠的水解需要果膠酶催化，故在分離和篩選能產(chǎn)生果膠酶的微生物時，要使用以果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基。分離提純某物質(zhì)時一般根據(jù)其相關(guān)特性，如形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解,返回目錄,教師備用習題,度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等，設(shè)置分離提純方法。固定化酶技術(shù)能有效地減少外界環(huán)境對酶活性的影響。(4)根據(jù)題意可知，果膠酶制劑丙的效果比果膠酶制劑乙的效果強。,返回目錄,教師備用習題,4． [備選理由] 本4題綜合考查生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用，可作為例5的補充。 根據(jù)所學知識，請回答下列有關(guān)問題： (1)在香料工業(yè)提取的“液體黃金”——玫瑰精油中，要求不含有任何添加劑或化學原料，其提取方法主要是________。 (2)玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用________________技術(shù)實現(xiàn)玫瑰的快速繁殖，該技術(shù)需要經(jīng)過________和________的過程，運用的原理是_________________________________________________ 。 (3)用萃取法提取胡蘿卜素，原因是_________________________________________________。,返回目錄,教師備用習題,萃取的效率主要取決于萃取劑的________，同時還受原料顆粒的大小、含水量等條件的影響；在對新鮮胡蘿卜進行干燥時，要注意控制______________，否則會引起胡蘿卜素的分解；提取的胡蘿卜素粗品可通過紙層析法進行鑒定，該層析的目的是____________________，而“葉綠體中色素的提取和分離”實驗中，層析的目的是_________________________________________________。,返回目錄,教師備用習題,[答案] (1)水蒸氣蒸餾法 (2)植物組織培養(yǎng) 脫分化 再分化 植物細胞的全能性 (3)胡蘿卜素易溶于有機溶劑 性質(zhì)和用量 溫度和時間 胡蘿卜素萃取樣品的鑒定 分離葉綠體中的色素 [解析] (1)玫瑰精油的提取方法主要是水蒸氣蒸餾法。(2)微型繁殖可實現(xiàn)玫瑰的快速繁殖，主要是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，包括脫分化和再分化兩個環(huán)節(jié)，其體現(xiàn)了植物細胞的全能性。(3)根據(jù)胡蘿卜素易溶于有機溶劑的特性，可以利用萃取法提取胡蘿卜素，萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和用量，同時還受原料顆粒的大小、含水量等條件,返回目錄,教師備用習題,的影響；在對新鮮胡蘿卜進行干燥時，要注意控制溫度和時間，否則會引起胡蘿卜素的分解；提取的胡蘿卜素粗品可通過紙層析法進行鑒定，該層析的目的是胡蘿卜素萃取樣品的鑒定，而“葉綠體中色素的提取和分離”實驗中，層析的目的是分離葉綠體中的色素。,