（新課標(biāo)通用）2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí) 考點(diǎn)39 細(xì)胞工程訓(xùn)練檢測(cè)（含解析）

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1、考點(diǎn)39　細(xì)胞工程 一、基礎(chǔ)題組 1．如圖表示的是利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育人工種子的過程。以下相關(guān)敘述正確的是(　　) A．上述過程中脫分化發(fā)生在過程a，在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用 B．過程b中進(jìn)行誘變處理后再培養(yǎng)，可能會(huì)篩選出抗逆性強(qiáng)的突變體 C．再分化發(fā)生在過程d，該過程中愈傷組織重新分化成根或芽等器官 D．人工種子可以解決大部分作物品種繁殖能力差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題 答案　B 解析　脫分化發(fā)生在過程b，A錯(cuò)誤；過程b即脫分化，在脫分化過程中，細(xì)胞進(jìn)行旺盛的細(xì)胞分裂活動(dòng)，細(xì)胞分裂過程中會(huì)發(fā)生DNA復(fù)制，在該過程進(jìn)行誘變處理后培養(yǎng)，可能會(huì)篩選出抗逆性強(qiáng)的突變體，B

2、正確；再分化過程發(fā)生在過程c，C錯(cuò)誤；過程d是經(jīng)過人工包裹形成人工種子的過程，人工種子只可以解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題，D錯(cuò)誤。 2．下圖示“番茄—馬鈴薯”雜種植株的培育過程，其中①～⑤表示過程，字母表示細(xì)胞、組織或植株。下列說法正確的是(　　) A．①表示低滲溶液中用酶解法處理植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體 B．e是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞 C．可根據(jù)質(zhì)壁分離現(xiàn)象鑒別雜種細(xì)胞的細(xì)胞壁是否再生 D．植物有性雜交和體細(xì)胞雜交都能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 答案　C 解析　①表示等滲溶液中用酶解法處理植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，原生質(zhì)體在低滲溶液中會(huì)吸水漲破，A錯(cuò)

3、誤；e是植物細(xì)胞脫分化后形成的一種呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞，B錯(cuò)誤；質(zhì)壁分離現(xiàn)象是指原生質(zhì)層與細(xì)胞壁的分離，故可根據(jù)質(zhì)壁分離現(xiàn)象鑒別雜種細(xì)胞的細(xì)胞壁是否再生，C正確；由于生殖隔離，植物有性雜交不能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，D錯(cuò)誤。 3．在科學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展的今天，絕大部分生物技術(shù)已迅速轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力，形成了新興的生物工程新產(chǎn)業(yè)，下列關(guān)于植物細(xì)胞工程技術(shù)的研究成果及運(yùn)用，正確的是(　　) A．利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種 B．單倍體育種和多倍體育種都需利用植物組織培養(yǎng)技術(shù) C．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可培育出不可育的“番茄—馬鈴薯”植株 D．植物組織培養(yǎng)是培育“番茄—馬鈴

4、薯”植株的技術(shù)基礎(chǔ) 答案　D 解析　脫毒苗不含病毒，但不具有抗病毒的能力，A錯(cuò)誤；多倍體的培育不需利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，B錯(cuò)誤；通過體細(xì)胞雜交獲得“番茄—馬鈴薯”植株的過程中，首先是通過體細(xì)胞雜交獲得雜種細(xì)胞，再通過植物組織培養(yǎng)得到“番茄—馬鈴薯”植株，培育成的該個(gè)體屬于異源四倍體，是可育的，C錯(cuò)誤，D正確。 4．下列對(duì)動(dòng)物核移植技術(shù)的描述不正確的是(　　) A．哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植 B．體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核 C．體細(xì)胞核移植過程中通常采用MⅡ中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞 D．體細(xì)胞核移植獲得的克隆動(dòng)物是對(duì)供核動(dòng)物的1

5、00%復(fù)制 答案　D 解析　細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)包括細(xì)胞核遺傳物質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)，通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，其細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)有一部分來自受體細(xì)胞，故不是對(duì)提供體細(xì)胞核的動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制。 5．下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．惡性腫瘤細(xì)胞系具有不死性和失去接觸抑制等特性 B．利用液體培養(yǎng)基和CO2培養(yǎng)箱，模擬動(dòng)物體的內(nèi)環(huán)境 C．因細(xì)胞具有相互依存關(guān)系，細(xì)胞克隆需飼養(yǎng)細(xì)胞支持生長 D．細(xì)胞株沒有差異性，在連續(xù)傳代過程中遺傳性狀始終保持穩(wěn)定 答案　D 解析　惡性腫瘤細(xì)胞系能無限繁殖，細(xì)胞表面糖蛋白減少，細(xì)胞之間的黏著性降低，即具有不死性和失去接觸抑

6、制等特性，A正確；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)模擬動(dòng)物體的內(nèi)環(huán)境，需要液體培養(yǎng)基(糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì))和CO2培養(yǎng)箱(95%空氣和5%的CO2)，B正確；飼養(yǎng)層細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)提供分化抑制因子，維持分裂狀態(tài)，C正確；細(xì)胞株傳到50代左右不能再繼續(xù)傳代，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，D錯(cuò)誤。 6．利用細(xì)胞工程的方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體，下列相關(guān)敘述正確的是(　　) A．用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的抗體為單克隆抗體 B．體外培養(yǎng)單個(gè)漿細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS

7、病毒的單克隆抗體 C．將等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 D．利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者 答案　D 解析　A項(xiàng)所述為血清抗體不是單克隆抗體，A錯(cuò)誤；漿細(xì)胞不具有增殖能力，不能大量獲得抗體，B錯(cuò)誤；等量漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合產(chǎn)生的細(xì)胞一般有3種，C錯(cuò)誤；在臨床上可用單克隆抗體與病毒特異性結(jié)合的原理診斷機(jī)體是否被病毒感染，D正確。 7．下圖所示為科學(xué)家利用番茄葉細(xì)胞和馬鈴薯葉細(xì)胞雜交培育“番茄—馬鈴薯”植株的過程，請(qǐng)回答下列問題： (1)①②過程使用了_________________

8、___酶，去除細(xì)胞壁以獲得原生質(zhì)體；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，使細(xì)胞分離開來的酶是________。 (2)過程③在化學(xué)藥劑________的作用下會(huì)發(fā)生細(xì)胞融合；動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物細(xì)胞不相同的是________________________________。 (3)過程________屬于脫分化，過程________屬于再分化，細(xì)胞發(fā)生分化的根本原因是________________________________________________________________________。 (4)過程⑤⑥⑦的細(xì)胞工程技術(shù)是________________，其培養(yǎng)時(shí)選用的材料通

9、常是分生組織，原因是____________________________________________。 (5)植物體細(xì)胞雜交的研究在________________________________________________方面，取得了巨大突破。 答案　(1)纖維素酶和果膠　胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) (2)聚乙二醇　可以使用滅活的病毒 (3)⑤?、蕖』虻倪x擇性表達(dá) (4)植物組織培養(yǎng)　全能性高，易培養(yǎng)形成愈傷組織 (5)克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 解析　植物細(xì)胞的細(xì)胞壁主要由纖維素和果膠組成，因此可以用纖維素酶和果膠酶將其水解得到原生質(zhì)體，然后用聚乙二醇或物理

10、方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，再生細(xì)胞壁形成雜種細(xì)胞。⑤⑥是雜種細(xì)胞經(jīng)過脫分化、再分化形成幼苗的過程，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，所以宜選用全能性高，易于分化的分生組織細(xì)胞。 8．1958年，美國科學(xué)家斯圖爾德將胡蘿卜韌皮部的一些細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整的新植株。下圖是細(xì)胞培養(yǎng)形成胡蘿卜植株示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答： ―→①―→―→②―→ ,⑥　　　　　　　　　　　　　　　　　,③ ?、茛? (1)過程④由細(xì)胞團(tuán)形成胚狀體要經(jīng)過______________，其結(jié)果是______________________。 (2)過程③、④、⑤在生物技術(shù)中稱為________________。

11、在培養(yǎng)過程中，除了提供水分和必要的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要在培養(yǎng)基中加入________和________。同時(shí)，培養(yǎng)過程中，還需要保證必要的外界條件是 ________________________________________________________________________。 (3)由韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整的植株證明了________________________________________________________________________。 答案　(1)細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化　形成不同的組織、器官(或可逐漸發(fā)育成為完整的植物體)　(2)植物組織培養(yǎng)　

12、礦質(zhì)元素　生長調(diào)節(jié)類物質(zhì)　適宜的溫度、光照、氧氣、無菌環(huán)境等　(3)植物細(xì)胞具有全能性 解析　植物組織培養(yǎng)過程可以簡要?dú)w納為：離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽―→植物體。離體的植物器官、組織或細(xì)胞，在一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下，就可能表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整的植株。 9. 如圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有________________________。動(dòng)物細(xì)胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是________。 (2)若圖中A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前應(yīng)用______________________處理，除去______

13、__；A、B到細(xì)胞C的過程中，常用的化學(xué)方法是利用________誘導(dǎo)；融合完成的標(biāo)志是________。 (3)與植物細(xì)胞相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是________。 (4)若利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)采用________和________兩種細(xì)胞進(jìn)行融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，第一次篩選一般利用________進(jìn)行，第二次篩選需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的________________________，以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，可將篩選得到的雜交瘤細(xì)胞注入到小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點(diǎn)是____

14、________________________________。 答案　(1)植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (2)纖維素酶、果膠酶　細(xì)胞壁　PEG　再生出細(xì)胞壁 (3)滅活的病毒 (4)經(jīng)免疫的B細(xì)胞　骨髓瘤細(xì)胞　選擇培養(yǎng)基　克隆化培養(yǎng)和抗體(陽性)檢測(cè) (5)節(jié)約培養(yǎng)基(成本)，易于控制培養(yǎng)條件等(經(jīng)濟(jì)，方便等，合理即可) 解析　(1)植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交。動(dòng)物細(xì)胞工程的各技術(shù)手段中的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 (2)植物體細(xì)胞雜交前，先采用酶解法去除細(xì)胞壁，即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細(xì)胞壁；誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的化學(xué)方法是PEG誘

15、導(dǎo)；融合完成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁。 (3)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法(離心、振動(dòng)、電激等)、化學(xué)法(聚乙二醇)，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有物理法(離心、振動(dòng)、電激等)、化學(xué)法(聚乙二醇)和生物法(滅活的病毒)。因此，與植物細(xì)胞相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是滅活的病毒。 (4)若利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)將經(jīng)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，第一次篩選一般利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行，第二次篩選需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測(cè)，以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，可將篩選得到的雜交瘤細(xì)

16、胞注入到小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點(diǎn)是節(jié)約培養(yǎng)基(成本)，易于控制培養(yǎng)條件等。 10．回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題： (1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面________時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的________。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是______。要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是________。 (2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)________的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成________細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性________，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋

17、白)的量________。 (3)現(xiàn)用某種大分子染料，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到________期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。 (5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在________條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件

18、下，細(xì)胞中________的活性降低，細(xì)胞________的速率降低。 (6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作________進(jìn)行攻擊。 答案　(1)相互接觸　接觸抑制　單層(或一層)　胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) (2)衰老甚至死亡　不死性　降低　減少 (3)由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色(或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色) (4)中　(5)冷凍(或超低溫或液氮)　酶　新陳代謝 (6)抗原 解析　(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有接觸抑制的現(xiàn)象，當(dāng)細(xì)胞在瓶壁

19、上長滿一層時(shí)，停止生長，此時(shí)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使貼壁的細(xì)胞分離下來。 (2)細(xì)胞培養(yǎng)到40～50代時(shí)，有些細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，變成不死性細(xì)胞(癌細(xì)胞)。癌細(xì)胞的黏著性降低，細(xì)胞表面的糖蛋白減少。 (3)細(xì)胞膜具有選擇透過性，大分子物質(zhì)不能通過，細(xì)胞死亡后，細(xì)胞膜的選擇透過性喪失，大分子物質(zhì)可以自由進(jìn)出細(xì)胞。 (4)觀察染色體的數(shù)目和形態(tài)，應(yīng)該選取有絲分裂中期的細(xì)胞進(jìn)行觀察。 (5)細(xì)胞在超低溫的情況下，酶的活性降低，新陳代謝的速率降低，因此，需要在低溫或冷凍的條件下保存。 (6)對(duì)于患者來說，移植的皮膚可能會(huì)被當(dāng)作抗原，引起排斥現(xiàn)象。 11．類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)

20、是一種自身免疫病，致殘性強(qiáng)。研究表明，該病的病理與腫瘤壞死因子-α(TNF-α)密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。如圖為該單克隆抗體制備過程示意圖。 (1)單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的________、________技術(shù)。 (2)圖中的抗原A是________，HAT培養(yǎng)基的作用是________。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞具有的特點(diǎn)是____________________________。 (3)醫(yī)療上，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“________”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。 (4)克隆動(dòng)

21、物是指用________方法得到的動(dòng)物。 (5)單克隆抗體的特點(diǎn)是________、________、________。 答案　(1)動(dòng)物細(xì)胞融合　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (2)腫瘤壞死因子-α(或TNF-α)　篩選出雜交瘤細(xì)胞　既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體 (3)生物導(dǎo)彈 (4)(動(dòng)物體細(xì)胞)核移植 (5)特異性強(qiáng)　靈敏度高　并可大量制備 解析　(1)單克隆抗體制備涉及動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。 (2)圖中刺激免疫動(dòng)物產(chǎn)生抗TNF-α單克隆抗體的抗原是腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。HAT培養(yǎng)基的作用是篩選出雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。 (3)醫(yī)

22、療上，把單克隆抗體與化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素相結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，借助抗體的定向作用將藥物帶到病變細(xì)胞并將其殺死。 (4)克隆動(dòng)物是指用核移植方法得到的動(dòng)物。 (5)單克隆抗體的特點(diǎn)是：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備。 12．下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過程設(shè)計(jì)圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)圖中①、②所示的結(jié)構(gòu)分別是________、________。 (2)圖中③、④所示的生物工程技術(shù)分別是________、________。 (3)過程③通常用去核卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作，含有營養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)樗黖

23、_______________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)過程④通常采用的方法是________。 (5)過程④的完成需要用到的非酶基因操作工具為________。 (6)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是____________________。 答案　(1)細(xì)胞核　內(nèi)細(xì)胞團(tuán) (2)(體細(xì)胞)核移植技術(shù)　基因工程(轉(zhuǎn)基因技術(shù)或重組DNA技

24、術(shù)) (3)含有促進(jìn)(或激活)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì) (4)顯微注射法 (5)載體 (6)不發(fā)生免疫排斥反應(yīng) 解析　(1)體細(xì)胞核移植利用體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，其中導(dǎo)入健康胰島B細(xì)胞基因，可以形成能正常分泌胰島素的胰島B細(xì)胞群。 (2)圖中③是將體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵細(xì)胞重組為一個(gè)細(xì)胞，為體細(xì)胞核移植技術(shù)。圖中④是將健康胰島B細(xì)胞基因?qū)胧荏w細(xì)胞，為基因工程技術(shù)。 (3)過程③通常用去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞，除了因?yàn)樗w積大、易操作，含有營養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)槠浜心軌蚣せ罴?xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。 (4)將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞通常用顯微注射法。

25、 (5)基因工程的基本工具為限制酶、DNA連接酶、載體，載體為非酶基因操作工具，通常為質(zhì)粒。 (6)圖示方法與一般的異體移植相比可避免免疫排斥反應(yīng)。 二、模擬題組 13．(2018·東北三省聯(lián)考)人感染埃博拉病毒(EV)會(huì)引起致命的出血熱。治療EV病的有效方法一個(gè)是注射疫苗，另一個(gè)就是注射抗體。凍干劑型埃博拉病毒疫苗于2017年10月在我國研制成功。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題。 (1)作為EV的疫苗需要具備的條件是________________________________________________________________________ ________________

26、________________________________________________________。 (2)若用小鼠生產(chǎn)EV的單克隆抗體，需先對(duì)小鼠注射抗原，目的是能從小鼠體內(nèi)獲得________________細(xì)胞，然后將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成________細(xì)胞。單克隆抗體制備過程中對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行_______次篩選，最終篩選得到的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是________________________________。 (3)植物原生質(zhì)體融合的誘導(dǎo)方法有__________________________，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是________。 (4)單克隆抗體制

27、備過程中，應(yīng)用的技術(shù)手段包括________________________。 答案　(1)既能讓機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)埃博拉病毒的抗體，同時(shí)又沒有致病性 (2)產(chǎn)生EV抗體的B淋巴　雜交瘤　兩　既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生所需抗體 (3)物理法和化學(xué)法　滅活的病毒 (4)動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 解析　(1)作為疫苗應(yīng)該既能讓機(jī)體產(chǎn)生抗體，同時(shí)又沒有致病性。 (2)給小鼠注射抗原的目的是從小鼠體內(nèi)獲得產(chǎn)生EV抗體的B淋巴細(xì)胞，然后將該細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過兩次篩選，最終獲得既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (3)植物原生質(zhì)體人工誘導(dǎo)融合的方法有物理法和化學(xué)

28、法，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒。 (4)單克隆抗體制備過程中應(yīng)用的技術(shù)手段包括動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 14．(2019·河北石家莊模擬)草莓是人們經(jīng)常食用的一種水果，有較高的營養(yǎng)價(jià)值。草莓是無性繁殖的作物，長期種植會(huì)使病毒積累在體內(nèi)，產(chǎn)量降低，品質(zhì)下降。下圖是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育草莓脫毒苗的過程，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)外植體能夠形成幼苗所依據(jù)的原理是____________________。培育脫毒苗時(shí)，一般選取____________作為外植體，其依據(jù)是________________。 (2)①是脫分化過程，細(xì)胞脫分化是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其_

29、_______而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過程。②是________過程。 (3)研究表明，多倍體草莓產(chǎn)量高于二倍體，利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得多倍體草莓的方法有兩種：一是使用________(藥劑)處理草莓的愈傷組織，再經(jīng)培養(yǎng)獲得多倍體植株；二是利用________(藥劑)誘導(dǎo)草莓體細(xì)胞融合形成雜種細(xì)胞后，再經(jīng)組織培養(yǎng)獲得多倍體植株，這種育種技術(shù)被稱為____________技術(shù)。 答案　(1)植物細(xì)胞的全能性　莖尖(或芽尖或根尖)　植物分生區(qū)附近(莖尖)病毒極少，甚至無病毒 (2)特有的結(jié)構(gòu)和功能　再分化 (3)秋水仙素　聚乙二醇(PEG)　植物體細(xì)胞雜交 解析　(1)植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是

30、植物細(xì)胞的全能性。培育脫毒苗時(shí)一般選取莖尖作為外植體，其依據(jù)是植物分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒。 (2)細(xì)胞脫分化就是讓已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。②是再分化過程。 (3)獲得多倍體植株常用秋水仙素處理；利用聚乙二醇誘導(dǎo)植物體細(xì)胞融合形成雜種細(xì)胞，再經(jīng)植物組織培養(yǎng)也可獲得多倍體植株，這種育種技術(shù)稱為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。 15．(2018·唐山質(zhì)檢)某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題： (1)將數(shù)量相

31、等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量________。 (2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是______________________。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是______________________。 (3)在兩種細(xì)胞生長過程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長________。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更________。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用________處理。 (4)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過

32、程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的________。 (5)已知癌基因X過量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入________，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入等量的無菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的________或________合成水平的差異，確定Y的藥效。 答案　(1)多 (2)血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)　維持培養(yǎng)液的pH (3)停止　多　胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) (4)抗生素 (5)Y　mRNA　蛋白質(zhì) 解析　(1)甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，

33、乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞為無限增殖的細(xì)胞，細(xì)胞周期短。在相同條件下，培養(yǎng)相同的時(shí)間，甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中必須加入動(dòng)物血清，血清中含有血清蛋白、生長因子、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的因子、激素等合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH。 (3)甲為腫瘤細(xì)胞，能無限增殖，傳代的次數(shù)要比乙細(xì)胞多，乙細(xì)胞(正常肝細(xì)胞)在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，當(dāng)鋪滿瓶壁時(shí)，生長停止。為得到更多的肝細(xì)胞，需要定期地用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞脫離瓶壁，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 (4)培養(yǎng)液中加入抗生素來抑制和殺滅細(xì)菌。 (5)設(shè)計(jì)一組加入抗癌藥物的實(shí)

34、驗(yàn)組，一組不加藥物的對(duì)照組，通過檢測(cè)藥物影響X基因的表達(dá)過程，即轉(zhuǎn)錄形成mRNA、翻譯形成蛋白質(zhì)的量來檢驗(yàn)藥效。 16．(2019·河南名校測(cè)試)科學(xué)家利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功獲得了番茄—馬鈴薯雜種植株，為了便于雜種細(xì)胞的篩選和鑒定，科學(xué)家利用紅色熒光和綠色熒光分別標(biāo)記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋白質(zhì)，其培育過程如下圖所示： (1)植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的生物學(xué)原理有________________________________________________________________________ __________________。 (2)過程①常用的酶是_____

35、_____________，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是________________。 (3)植物原生質(zhì)體融合過程常利用化學(xué)試劑________誘導(dǎo)融合，在鑒定雜種原生質(zhì)體時(shí)可用顯微鏡觀察，根據(jù)細(xì)胞膜表面熒光的不同可觀察到________種不同的原生質(zhì)體，當(dāng)觀察到____________________時(shí)可判斷該原生質(zhì)體是由番茄細(xì)胞和馬鈴薯細(xì)胞融合而成的。 (4)過程③和過程④依次為__________________，過程④中的培養(yǎng)基常添加的植物激素是________________。 (5)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細(xì)胞中含n條染色體，則“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含____

36、____條染色體。若雜種細(xì)胞培育成的“番茄—馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)得到的植株屬于________植株。 答案　(1)細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性 (2)纖維素酶和果膠酶　形成了新的細(xì)胞壁 (3)聚乙二醇(或PEG)　3　融合的細(xì)胞表面既有紅色熒光又有綠色熒光 (4)脫分化和再分化　生長素和細(xì)胞分裂素 (5)2(m＋n)　單倍體 解析　(1)植物體細(xì)胞雜交包括原生質(zhì)體融合和培育雜種植株兩大步驟，兩者的原理分別是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。 (2)去除細(xì)胞壁常用的酶是纖維素酶和果膠酶，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁。 (3)化學(xué)促融劑是聚乙

37、二醇，兩兩融合的原生質(zhì)體有三種：番茄—番茄、馬鈴薯—番茄、馬鈴薯—馬鈴薯，其中雜種細(xì)胞的細(xì)胞表面有兩種顏色的熒光。 (4)過程③和過程④分別表示脫分化和再分化，誘導(dǎo)細(xì)胞分化所用的植物激素主要是生長素和細(xì)胞分裂素。 (5)“番茄—馬鈴薯”體細(xì)胞有m＋n條染色體，有絲分裂后期染色體數(shù)目加倍。由配子發(fā)育成的個(gè)體均為單倍體。 17．(2019·遼寧大連模擬)白細(xì)胞介素4 (IL－4)是具有多種免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，臨床及研究中需要大量高純度的IL－4，以及其高效檢測(cè)試劑。下圖是利用單克隆抗體技術(shù)制備抗IL－4特異性抗體的過程。回答相關(guān)問題： (1)在免疫系統(tǒng)組成中，IL－4屬于____

38、____物質(zhì)。研究人員從外周血中提取到IL－4蛋白分子的mRNA，將其反轉(zhuǎn)錄成________，構(gòu)建特定表達(dá)載體，利用工程菌獲得用于臨床及研究需要的高純度的IL－4蛋白。 (2)圖中所示的a培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的是________細(xì)胞，其與M細(xì)胞融合產(chǎn)生雙核或多核細(xì)胞，再經(jīng)________，進(jìn)一步形成兩個(gè)新的單核雜交細(xì)胞。 (3)b培養(yǎng)瓶所示過程中，要用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞篩選，得到的________細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖生長。經(jīng)b獲得的細(xì)胞，還需要進(jìn)行______________。 (4)c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞是__________________的雜交瘤細(xì)胞。制備IL－4單克隆抗體的過程中

39、，細(xì)胞培養(yǎng)瓶通常置于特定培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，要求培養(yǎng)瓶松蓋，主要目的是______________________________________________________________________________________。 答案　(1)免疫活性　cDNA (2)骨髓瘤　有絲分裂 (3)融合的雜種(或雜交瘤)　克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)(或克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測(cè)) (4)分泌抗IL－4抗體　 讓O2進(jìn)入培養(yǎng)瓶以供細(xì)胞代謝，使CO2進(jìn)入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的pH 解析　(1)白細(xì)胞介素4(IL－4)是具有多種免疫學(xué)調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞因子，即在免疫系統(tǒng)組成中，IL－4屬于免

40、疫活性物質(zhì)。mRNA反轉(zhuǎn)錄生成的是cDNA。 (2)分析圖可知：單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生，由此可推出圖中所示的a中培養(yǎng)的是骨髓瘤細(xì)胞，其與M細(xì)胞(漿細(xì)胞)融合產(chǎn)生雙核或多核細(xì)胞，再經(jīng)有絲分裂，進(jìn)一步形成兩個(gè)新的單核雜交細(xì)胞。 (3)骨髓瘤細(xì)胞與M細(xì)胞(漿細(xì)胞)融合，需要經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，但這個(gè)雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)(克隆化培養(yǎng)和專一抗體陽性檢測(cè))，才可以得到能無限增殖并能產(chǎn)生專一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (4)提取單克隆抗體可以體外提取，也可以體內(nèi)提取，c培養(yǎng)瓶所示是體外提取，即c培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的細(xì)胞是分泌抗IL－4抗體的雜交瘤細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常置于特定培

41、養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，要求培養(yǎng)瓶松蓋，主要目的是讓氧氣進(jìn)入培養(yǎng)瓶以供細(xì)胞代謝，使二氧化碳加入培養(yǎng)瓶維持培養(yǎng)液的pH。 三、高考題組 18．(2016·全國卷Ⅱ)如圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。 回答下列問題： (1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為________。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用________的方法。②代表的過程是________。 (2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。 (3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)

42、物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是________________________________。 (4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了____________________________。 答案　(1)XX或XY　顯微操作　胚胎移植 (2)遺傳物質(zhì) (3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響 (4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性 解析　(1)核移植過程中，供體的體細(xì)胞中性染色體組成可為XX或XY；去核時(shí)常采用顯微操作的方法；圖示②過程表示胚胎移植。 (2)細(xì)胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)，細(xì)胞中遺傳物質(zhì)

43、的穩(wěn)定性會(huì)降低。 (3)由于卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，所以克隆動(dòng)物與供體性狀不完全相同。 (4)克隆動(dòng)物的成功獲得證明了已分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。 19．(2018·全國卷Ⅲ)2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}： (1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指________________________________________________________________。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆

44、猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目__________(填“減半”“加倍”或“不變”)。 (2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度________(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是____________________________________。 (3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目________(填“相同”或“不相同”)，性染色體組合________(填“相同”或“不相同”)。 答案　(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵

45、母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體　不變 (2)小于　胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易 (3)相同　不相同 解析　(1)核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)胚胎最后發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體。通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體，因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和供體一致。 (2)胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植，其原因是動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易。 (3)哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞染色體中常染色體數(shù)目相同，性染色體前者是XX，后者是XY，因此分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同，性染色體組合不同。 - 14 -