《儀器分析》PPT課件

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1、尿 微 量 清 蛋 白 （ MAU） P205 2微 球 蛋 白 （ 2 MG） P2091微 球 蛋 白 （ 1 MG） P212 BJP P202 N-乙 酰 -D-氨 基 葡 萄 糖 苷 酶 (NAG) 溶 菌 酶 尿 淀 粉 酶 (AMY) HCG 目 前 常 見 的 臨 床 檢 查 模 式干化學(xué)直接報告模 式 1干化學(xué)篩選，顯微鏡確認(rèn)陽性標(biāo)本后報告模 式 2 干化學(xué)和沉渣流式分析儀篩選，顯微鏡確認(rèn)陽性標(biāo)本后報告模 式 3 參 考 值 尿 流 式 沉 渣 檢 查 / L 尿 紅 細(xì) 胞 數(shù) U-RBC 0-25尿 白 細(xì) 胞 數(shù) U-WBC 0-30 尿 上 皮 細(xì) 胞 數(shù) U-EC

2、0-15尿 管 型 數(shù) U-CAST 0-0.7尿 細(xì) 菌 數(shù) U-BACT 0-6000 病 理 管 型 U-Path.CAST 0.0小 圓 上 皮 細(xì) 胞 U-SRC 0.0 類 酵 母 樣 菌 U-YLC 0.0 結(jié) 晶 U-XTAL 0.0紅 細(xì) 胞 信 息 U-RBC info 非 溶 血 紅 細(xì) 胞 數(shù) 量 U-Nlysed# 非 溶 血 紅 細(xì) 胞 百 分 比 U-Nlysed%尿 干 化 學(xué) 檢 查pH 4.6 8.0蛋 白 質(zhì) PRO 葡 萄 糖 GLU 酮 體 KET 尿 膽 原 UBG +膽 紅 素 BIL 亞 硝 酸 鹽 NIT 紅 細(xì) 胞 ERY 白 細(xì) 胞 LEU

3、 比 密 SG 1.015 1.025VitC 0.6mmol鏡 檢 結(jié) 果n紅 細(xì) 胞 RBC:0 3/HP 白 細(xì) 胞 WBC:0 5/HP n上 皮 細(xì) 胞 EC: 少 結(jié) 晶 CRYSTAL: 少n管 型 CAST: 0 偶 見 /LP 尿 液 的 酸 度 (PH) 比 密 (SG) 蛋 白 質(zhì) (PRO) 葡 萄 糖 (GLU) 酮 體 (KET) 膽 紅 素 (BIL) 尿 膽 原 (UBG) 亞 硝 酸 鹽 (NIT) 白 細(xì) 胞 (LEU) 紅 細(xì) 胞 /隱 血 (Hb) 維 生 素 C(Vitc) 反 應(yīng) 模 塊 尼 龍 膜 ： 防 止 大 分 子 物 質(zhì) 對 反 應(yīng) 的 污

4、 染 ； 絨 制 層 ： 包 括 碘 酸 鹽 層 和 試 劑 層 ： 碘 酸 鹽 層 可 以 破 壞 維 生 素 C等 干 擾 物 質(zhì) ， 試 劑 層 含 有 試 劑 成 分 ， 主 要 與 尿 液 中 測 定物 質(zhì) 發(fā) 生 化 學(xué) 反 應(yīng) ， 產(chǎn) 生 顏 色 變 化 ； 吸 水 層 ： 可 使 尿 液 均 勻 快 速 的 浸 入 ， 并 能抑 制 尿 液 流 到 相 鄰 的 反 應(yīng) 區(qū) ； 塑 料 底 層 ： 作 支 持 體 。 尼 龍 膜 碘 酸 鹽 層 試 劑 層 吸 水 層 塑 料 底 層空 白 塊 ： 用 于 消 除 尿 自 身 顏 色在 試 劑 塊 上 產(chǎn) 生 顏 色 的 干 擾

5、。 尿 液 分 析 試 紙項 目 縮 寫 符 號 反 應(yīng) 原 理酸 堿 度 pH pH指 示 劑蛋 白 質(zhì) PRO pH指 示 劑 的 蛋 白 質(zhì) 誤 差 法葡 萄 糖 GLU 葡 萄 糖 氧 化 酶 法隱 血 BLD Hb類 過 氧 化 物 酶 法膽 紅 素 BIL 偶 氮 反 應(yīng) 法尿 膽 原 URO 醛 反 應(yīng) 法酮 體 KET 硝 基 鐵 氰 化 鈉 法亞 硝 酸 NIT 亞 硝 酸 鹽 還 原 法白 細(xì) 胞 LEU 酯 酶 法比 密 d（ SG） 多 聚 電 解 質(zhì) 離 子 解 離 法 抗 壞 血 酸 ASG 吲 哚 酚 法 尿 干 化 學(xué) 試 紙 按 功 能 分 組 模 塊 組 合

6、 1： 比 密 、 蛋 白 質(zhì) 、 紅 細(xì) 胞 、 白 細(xì) 胞 ： 與 腎 臟 疾 病 相 關(guān) 模 塊 組 合 2： 白 細(xì) 胞 、 紅 細(xì) 胞 、 亞 硝 酸 鹽 ： 與 泌 尿 系 感 染 性 疾 病 有 關(guān) 模 塊 組 合 3： 比 密 、 葡 萄 糖 、 酮 體 ： 與 內(nèi) 分 泌 系 統(tǒng) 疾 病 有 關(guān) 模 塊 組 合 4： 膽 紅 素 、 尿 膽 原 ： 與 肝 膽 系 統(tǒng) 疾 病 有 關(guān) 模 塊 組 合 5： pH、 比 密 、 維 生 素 C： 對 干 化 學(xué) 實 驗 的 影 響 監(jiān) 測 。 按 檢 測 項 目 分 8項 ： pH、 PRO、 GLU、 KET、 BIL、 UR

7、O、 BLD、 NIT9項 ： 8項 + LEU10項 ： 9項 + SG11項 ： 10項 + VitC12項 ： 11項 + 顏 色 或 透 明 度 組 合 型 試 帶腎 病 型 四 聯(lián) 試 帶 ： pH、 蛋 白 、 隱 血 、 比 密糖 尿 病 型 五 聯(lián) 試 帶 ： pH、 蛋 白 、 葡 萄 糖 、 酮 體 、 比 密肝 臟 病 型 二 聯(lián) 試 帶 ： 膽 紅 素 、 尿 膽 原 浸 漬 試 帶 條 將 多 聯(lián) 試 帶完 全 浸 入 尿 液 1 2s， 然 后 立即 取 出 。 瀝 去 多 余 尿 液 沿 試 管 壁 將試 帶 上 多 于 尿 液 去 盡 。 檢 測 標(biāo) 本 將 試

8、 帶 置 于 儀 器檢 測 槽 內(nèi) ， 直 至 儀 器 自 動 打印 出 報 告 。 尿干化學(xué)分析試帶及結(jié)果判斷 各 種 尿 干 化 學(xué) 分 析 儀 一 、 尿 液 分 析 儀 儀 器 檢 測 原 理 儀 器 采 用 球 面 積 分 儀 接 受 雙 波 長 反 射 光 ，測 定 試 劑 帶 上 的 顏 色 變 化 進 行 半 定 量 測 定 。 試 劑 帶 上 有 數(shù) 個 含 各 種 試 劑 的 試 劑 墊 ， 各自 與 尿 中 相 應(yīng) 成 分 進 行 獨 立 反 應(yīng) ， 而 顯 示 不 同顏 色 ， 顏 色 的 深 淺 與 尿 液 中 某 種 成 分 的 含 量 成比 例 關(guān) 系 。 試 劑

9、 帶 中 還 有 另 一 個 “ 補 償 墊 ” ， 作 為 尿液 本 底 顏 色 ， 對 有 色 尿 液 所 產(chǎn) 生 的 誤 差 進 行 補償 。 測 定 波 長 ： 是 被 測 試 劑 塊 的 敏 感 特 征 波 長 ；參 考 波 長 ： 是 被 測 試 劑 塊 的 不 敏 感 的 波 長 ， 用以 消 除 背 景 光 和 其 它 雜 散 光 的 影 響 。 照 射 光 波 長 的 選 擇 由 檢 測 項 目 決 定 。 亞 硝 酸 鹽 、 酮 體 、 膽 紅 素 、 尿 膽 原 的 測 定波 長 為 550nm； PH、 葡 萄 糖 、 蛋 白 質(zhì) 、 維 生 素 C、潛 血 的 測 定

10、 波 長 為 620nm； 參 考 波 長 為 720nm。 計 算 原 理 R(%):反 射 率 Tm:試 劑 墊 對 測 定 波 長 的 反 射 強 度 Ts:試 劑 墊 對 參 考 波 長 的 反 射 強 度 Cs:標(biāo) 準(zhǔn) 墊 對 參 考 波 長 的 反 射 強 度 Cm:標(biāo) 準(zhǔn) 墊 對 測 定 波 長 的 反 射 強 度%100(%) CmTs CsTmR 尿 液 自 動 分 析 儀 結(jié) 構(gòu) 圖CPU 尿 液 分 析 儀 由 ： 機 械 系 統(tǒng) 、 光 學(xué) 系 統(tǒng) 、 電 路 系 統(tǒng) 三部 分 組 成 。 光 電 管球 面 積 分 儀濾 光 片 光 源 （ 二 ） 光 電 系 統(tǒng) 結(jié)

11、構(gòu) 圖四 、 尿 液 分 析 儀 結(jié) 構(gòu)返 回 本 節(jié) 目 錄 尿 液 試 紙 條 urinary reagent strip 光 源接 收 器 (二 )試 帶 使 用 注 意 事 項1. 嚴(yán) 格 按 操 作 說 明 書 要 求 進 行 操 作 ；2. 試 帶 要 在 有 效 期 內(nèi) 使 用 ；3. 試 帶 從 冷 藏 變 成 室 溫 前 不 要 打 開 瓶 蓋 ， 用后 蓋 緊 瓶 蓋 ； 開 過 蓋 的 試 帶 瓶 不 建 議 放 在冷 藏 溫 度 ， 可 放 陰 涼 、 干 燥 、 避 光 處 。4.禁 止 用 手 觸 摸 試 劑 區(qū) ， 5. 不 同 廠 家 的 同 類 試 紙 ， 其

12、 原 理 、 方 法 、 結(jié)果 不 相 同 ， 不 可 混 用 。 尿 干 化 學(xué) 方 法 學(xué) 評 價 優(yōu) 點 ： 操 作 簡 便 、 快 速 、 同 時 獲 得 多 項 結(jié) 果 。 缺 點 ： 影 響 因 素 多 ， 必 須 結(jié) 合 尿 理 學(xué) 檢 查 、 顯 微 鏡 檢 查 ， 互 相 驗 證 、 綜 合 分 析目 前 國 內(nèi) 采 用 方 法 ： 干 化 學(xué) 法 LEU、 BLD、 PRO、 NIT四 項 皆 （ -） ， 可 不鏡 檢 。 其 中 任 一 項 出 現(xiàn) 異 常 時 ， 則 必 須 鏡 檢 。注 意 事 項 ： 以 尿 沉 渣 作 為 診 斷 依 據(jù) 或 觀 察 療 效 時

13、， 不 宜 用 干 化學(xué) 過 篩 （ 腎 臟 病 、 內(nèi) 分 泌 病 、 免 疫 病 等 ） 臨 床 醫(yī) 生 要 求 的 ； (三 ) 試 紙 分 析 的 假 陽 性 和 假 陰 性1.尿 中 含 高 濃 度 VC,可 使 試 紙 法 葡 萄 糖 和 隱 血 結(jié)果 呈 假 (一 );2.尿 蛋 白 試 紙 是 利 用 PH指 示 劑 的 蛋 白 質(zhì) 誤 差 原理 ,白 蛋 白 的 反 應(yīng) 性 最 強 ,球 蛋 白 的 反 應(yīng) 性 弱 。3.某 些 藥 物 （ 如 氯 丙 嗪 、 酚 噻 嗪 、 吩 嗪 類 藥 物 ）可 使 尿 BIL、 URO等 呈 假 （ +） ；4.尿 PH超 過 8.0

14、以 上 ， PRO呈 假 (+)； 三 、 干 化 學(xué) 分 析 儀 的 局 限 性 1. 試 劑 條 的 因 素 2. 尿 本 身 的 因 素 ： 如 標(biāo) 本 采 集 不 不 合 格 等 3. 操 作 原 因 ： 如 儀 器 的 校 準(zhǔn) 、 維 護 、環(huán) 境 溫 度 。 4. 皆 為 定 性 分 析 ， 只 能 做 過 篩 試 驗 。其 次 是 不 能 檢 測 尿 有 形 成 分 ， 因 而 不能 代 替 尿 沉 渣 檢 查 。 尿 液 結(jié) 果 分 析 ：干 化 學(xué) （ +）鏡 檢 （ -） 干 化 學(xué) （ -）鏡 檢 （ +）WBC 細(xì) 胞 破 壞 以 淋 巴 細(xì) 胞 為 主RBC 為 Hb

15、、 Mb尿 ，含 熱 不 穩(wěn) 定 酶 、菌 尿 大 量 VitC， 試 帶 失 效NIT 標(biāo) 本 放 置 時 間過 久 或 被 污 染 尿 路 感 染 的 病 原 微 生 物 種 類 、無 硝 酸 鹽 的 存 在 、尿 液 標(biāo) 本 留 取 的 時 間 、藥 物 尿 沉 渣 分 析 儀 尿 沉 渣 分 析 儀 尿 沉 渣 分 析 儀 是 用 顯 微 鏡 或 專 用 設(shè) 備 對 尿液 有 形 成 分 檢 查 的 儀 器 ， 擺 脫 了 繁 瑣 和 費 時的 操 作 程 序 ， 做 到 尿 沉 渣 分 析 的 標(biāo) 準(zhǔn) 化 、 自動 化 。 目 前 使 用 的 尿 沉 渣 分 析 儀 ， 主 要 有

16、：圖 像 識 別 法 、 流 式 細(xì) 胞 儀 法 ， 以 及 尿 液 分 析工 作 站 等 幾 種 類 型 。 運 用 流 式 細(xì) 胞 術(shù) 及 特 殊 熒 光 染 色 的 原 理 ， 將 尿標(biāo) 本 染 色 后 進 入 鞘 液 流 動 池 時 ， 每 個 有 形 成 分 單 個縱 列 通 過 流 動 池 中 心 軸 線 ， 每 個 粒 子 均 被 氬 激 光 光束 照 射 ， 并 各 自 發(fā) 出 不 同 的 熒 光 強 度 (信 號 )。 信 號表 達(dá) 為 3類 ： 即 前 向 散 射 光 、 熒 光 和 電 阻 抗 。 （一）流式細(xì)胞式尿沉渣分析儀 流 式 細(xì) 胞 式 尿 沉 渣 分 析 儀

17、原 理激 光 束 (=488m ) 熒 光 強 度 fl： 前 向 散 射 光 強 度 ： 細(xì) 胞 大 小 RND、 DNA強 度 前 向 散 射 光 脈 沖 寬 度 ：細(xì) 胞 長 度熒 光 脈 沖 寬 度 (F1w)：細(xì) 胞 染 色 質(zhì) 長 度 電 阻 抗 ：反 映 細(xì) 胞 體 積 流 式 細(xì) 胞 式 尿 沉 渣 分 析 儀 原 理 前 向 散 射 光 強 度 (Fsc)： 細(xì) 胞 大 小 前 向 散 射 光 脈 沖 寬 度 (Fscw)： 細(xì) 胞 長 度 熒 光 信 號 熒 光 強 度 (Fl)： 細(xì) 胞 染 色 質(zhì) (DNA/RNA)的 強 度 熒 光 脈 沖 寬 度 (Flw)： 細(xì)

18、胞 大 小 電 阻 抗 ： 反 映 細(xì) 胞 體 積前 向 散 射 光 信 號 儀 器 將 這 種 熒 光 ， 散 射 光 和 電 阻 抗 的 信 號轉(zhuǎn) 變 為 電 信 號 ， 綜 合 分 析 這 些 電 信 號 ， 得 出 細(xì) 胞大 小 、 長 度 、 染 色 強 度 和 染 色 部 分 長 度 以 及 細(xì) 胞的 體 積 資 料 ， 并 給 出 每 類 細(xì) 胞 的 散 射 圖 和 直 方 圖 ，并 計 算 出 每 微 升 尿 中 各 種 細(xì) 胞 的 數(shù) 量 進 行 報 告 。 UF-100尿 沉 渣 分 析 系 統(tǒng) 散 點 圖細(xì)胞大小 細(xì) 胞 長 度熒 光 脈 沖 寬 度 前 向 散 射 光

19、脈 沖 寬 度 UF-100尿 沉 渣 分 析 系 統(tǒng) 散 點 圖細(xì)胞大小 染 色 質(zhì) 強 度前 向 散 射 光 強 度 熒 光 強 度 流 式 細(xì) 胞 術(shù) 尿 沉 渣 分 析 儀 檢 測 參 數(shù) 紅 細(xì) 胞 (RBC) 均 一 性 紅 細(xì) 胞 （ Isomorphic RBC） % 非 均 一 性 紅 細(xì) 胞 （ Dysmorphic RBC） % 非 溶 血 性 紅 細(xì) 胞 數(shù) 量 （ Non-Lysed RBC#） 非 溶 血 性 紅 細(xì) 胞 百 分 比 （ Non-Lysed RBC%） 白 細(xì) 胞 （ WBC） 上 皮 細(xì) 胞 （ EC） 、 小 圓 上 皮 （ SRC） 管 型 （

20、 CAST） ,病 理 管 型 （ Path.CAST） 細(xì) 菌 （ BACT） 酵 母 細(xì) 胞 （ YLC） 精 子 細(xì) 胞 （ SPERM） 結(jié) 晶 （ XTAL） 尿 液 電 導(dǎo) 率 （ conductivity） RBCP70 70%紅 細(xì) 胞 位 置 提 示 ： 以 未 溶 解 的 RBC為 100%時 ， 70%紅 細(xì) 胞 的 平均 體 積 。NLRBC% 未 溶 解 RBC百 分 比 提 示 ： 完 整 RBC的 百 分 比 （ 不 包 含 影 形 RBC， RBC碎片 ， 皺 縮 紅 細(xì) 胞 ） 。 RBC INF 紅 細(xì) 胞 信 息 提 示 ： RBC來 源 。 Microc

21、ytic (不 均 一 小 紅 細(xì) 胞 )? 提 示 紅 細(xì) 胞 源 于 腎 小 球 Normocytic (正 常 均 一 紅 細(xì) 胞 )? 提 示 紅 細(xì) 胞 非 來 源 于 腎 小 球 Non classified (未 分 類 型 )? 提 示 混 合 型 紅 細(xì) 胞 細(xì) 胞 Negative 提 示 紅 細(xì) 胞 計 數(shù) 正 常 病 例 1： 男 ， 29歲 ，尿 干 化 學(xué) 檢 查pH 5.0蛋 白 質(zhì) PRO 葡 萄 糖 GLU 酮 體 KET 尿 膽 原 UBG 膽 紅 素 BIL 亞 硝 酸 鹽 NIT 紅 細(xì) 胞 ERY +白 細(xì) 胞 LEU 比 密 SG 1.015VitC

22、 0.6mmol 尿 流 式 沉 渣 檢 查U-RBC 1440.2 U-WBC 5.9U-EC 1.5 U-CAST 0.13U-BACT 132.6U-Path.CAST 0.0U-SRC 0.0 U-YLC 0.0U-XTAL 171.6 U-RBC info Isomorphic?U-Nlysed# 1431.3 / L U-Nlysed% 99.3%鏡 檢 結(jié) 果nWBC:0 3/HP RBC:滿 視 野 /HP腎 結(jié) 石 病 例 2： 男 ， 81歲 ，鏡 檢 結(jié) 果 nWBC:滿 視 野 /HP RBC:10 20/HP EC:2 8/HP 急 性 膀 胱 炎尿 干 化 學(xué) 檢

23、查pH 7.0蛋 白 質(zhì) PRO +葡 萄 糖 GLU 酮 體 KET 尿 膽 原 UBG +膽 紅 素 BIL 亞 硝 酸 鹽 NIT +紅 細(xì) 胞 ERY +白 細(xì) 胞 LEU +比 密 SG 1.010VitC 0.6mmol 尿 流 式 沉 渣 檢 查U-RBC 195.9 U-WBC 1509.8U-EC 74.3 U-CAST 1.15U-BACT 1025.0U-Path.CAST 0.2U-SRC 2.0 U-YLC 0.0U-XTAL 7.6 U-RBC info Isomorphic?U-Nlysed# 177.9 / L U-Nlysed% 90.8% 病 例 3.男 ，

24、 25歲 ，鏡 檢 結(jié) 果nWBC:5 10/HP RBC:10 20/HP EC:滿 視 野 /HP n透 明 管 型 :滿 視 野 /LP 顆 粒 管 型 :滿 視 野 /LP 腎 小 球 腎 炎尿 干 化 學(xué) 檢 查pH 6.5蛋 白 質(zhì) PRO +葡 萄 糖 GLU 酮 體 KET 尿 膽 原 UBG +膽 紅 素 BIL 亞 硝 酸 鹽 NIT 紅 細(xì) 胞 ERY +白 細(xì) 胞 LEU +比 密 SG 1.010VitC 8000 /uL WBC 10/uL尿 細(xì)菌 感 染 可 能 性 大 ， 尿 培 養(yǎng) 陽 性 率 高 。 ERY + 150/uL N-RBC 50/uL ， ER

25、Y檢 測的 是 Hb， 而 UF-100檢 測 的 是 完 整 的 細(xì) 胞 ， 可 能 溶血 ， RBCINF 為 Microytic， 提 示 紅 細(xì) 胞 源 于 腎 小球 。 LEU + 250/uL N-WBC 50/uL ， LE尿 白 細(xì) 胞 檢 測 的 是 粒 細(xì) 胞 酯 酶 ， 而 N-WBC檢 測 的 是完 整 的 細(xì) 胞 ， 影 響 因 素 細(xì) 菌 、 滲 透 壓 等 。 顏 色 透 明 度 SG 1.015 PH 6.0 LEU + 25/uL NIT neg PRO + 1.0g/L GLU norm KET neg BIL neg UBG norm ERY + 10/u

26、L CONDCT 21.1 mS/cm PCASTF 0.3 /uL N-WBC 100/ uL BACT 6500 /uL CAST 0.5 /uL SRC 0.38/uL EC 0.3 /uL N-RBC 200/uL RBC70 78.6 NLRBC% 58.4 RBCINF Microytic YLC 450 /uL XTAC 結(jié) 果 分 析 ERY + 25/uL N-RBC 200/uL ERY檢 測 的是 Hb， 而 UF-100檢 測 的 是 微 粒 （ RBC體 積 大 小 ） ，類 酵 母 菌 、 結(jié) 晶 可 干 擾 。 LEU + 25/uL N-WBC 100/uL 化 學(xué) 法 LE 尿 白 細(xì) 胞 檢 測 的 僅 僅 是 粒 細(xì) 胞 ， 而 N-WBC還 包 括淋 巴 、 單 核 細(xì) 胞 。 YLC 為 450 /uL提 示 可 能 有 真 菌 感 染 再 見