鄰菲羅啉分光光度法測定水樣中的鐵實驗指導(dǎo)

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1、標(biāo)準(zhǔn)曲線法 實驗二 鄰菲羅咻分光光度法測定水樣中的鐵 一、實驗?zāi)康模? 1 .掌握鄰菲羅咻分光光度法測定微量鐵的原理和方法; 2 .學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法及其使用。 二、原理: 1 .定量分析依據(jù):A= k bc 2 .有關(guān)反應(yīng): 4Fe3++2NH 20H? HCl=4Fe 2++N2。T +4H++2H2O+2CI 3 .顯色條件 pH 值控制:pH" 5.0。 顯色時間:15min 顯色溫度:室溫 顯色劑及用量:鄰二氮菲 2.00mL 4 .測量條件 入 max=510nm 參比溶液:試劑空白 吸光度范圍:0.2-0

2、.8 三、儀器: 可見分光光度計,1cm比色皿、100mL容量瓶1個,20mL移液管1支,50mL容量瓶10 個,10mL吸量管1支,1mL吸量管(或移液管) 1支,5mL移液管1支,2mL移液 管1支。 四、試劑: ①鐵貯備液(100pg/mL):準(zhǔn)確稱取0.7020克分析純硫酸亞鐵俊[(NH4) 2Fe (SO4) 26H2O] 于100毫升燒懷中(或0.8640g分析純的NH4Fe(SO4)2 12H2O,其摩爾質(zhì)量為 482.18g/mol),加50毫升1+1 H2SO4,完全溶解后,移入1000ml的容量瓶中,并用水稀 釋到刻度,搖勻,此溶液中Fe的質(zhì)量濃度為100.0 pg

3、/mL。(實驗室準(zhǔn)備好) ② 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液(20.00 pgmL —1) 移取100.0mL—1鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 20.00mL于100mL 容量瓶中,并用蒸儲水稀釋至標(biāo)線,搖勻。 (學(xué)生自行配制) ③10%鹽酸羥胺水溶液:(用時配制)。 ④0.5%鄰菲羅咻水溶液:配制時加數(shù)滴鹽酸能助溶液或先用少許酒精溶解,再用水稀釋至 所需體積。(臨用時配制)或(避光保存,兩周內(nèi)有效)。 ⑤HAc-NaAc緩沖溶液(pH=5.0):稱取40克純醋酸錢加到 50毫升冰醋酸中,加水溶解后 稀釋至100毫升。 五、測定步驟: 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制: (1)分別吸取鐵的標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.00、1.00、2.00、

4、4.00、6.00、8.00、10.00ml 于 7 支 50ml 容 量瓶中,加水至刻度; (2)依次分別加入10%鹽酸羥月安溶液1ml,混勻,加入 5ml pH=5.0緩沖溶液,搖勻,力口 入0.5%鄰菲羅咻溶液2ml,搖勻, (3)放置15分鐘后,在510nm波長處,用1cm比色皿,以試劑空白作為參比,測定各溶 液的吸光度。 附721型分光光度計操作過程: 1 .檢查儀器各調(diào)節(jié)鈕的起始位置是否正確,選擇波長,并將靈敏度檔置第1檔 2 .接通電源,打開開關(guān) 3蓋上比色皿暗盒蓋,用調(diào)100%”調(diào)節(jié)器使電表指針處于透過率100%”位,打開比 色皿暗盒蓋,用調(diào) 0”調(diào)節(jié)器使電表指

5、針處于透過率0”位;預(yù)熱20min 4 .放入?yún)⒈热芤杭霸嚇尤芤? 5 .校準(zhǔn):拉動吸收池拉桿,使參比溶液置于光路中,打開比色皿暗盒蓋,用調(diào)0”調(diào) 節(jié)器使電表指針處于透過率0”位;蓋上比色皿暗盒蓋,用調(diào)100%”調(diào)節(jié)器使電表指 針處于透過率 100%”位。重復(fù)校正至穩(wěn)定 6 .若調(diào)100%”調(diào)節(jié)器不能使電表指針處于透過率100%”位,打開比色皿暗盒蓋,則 應(yīng)放大靈敏度,重新調(diào)整直至穩(wěn)定 7 .蓋上樣品蓋,拉動吸收池拉桿,依次將待測溶液推入光路,讀出吸光度值A(chǔ)o連 續(xù)讀數(shù)后,立即打開比色皿暗盒蓋,取出吸收池,參比溶液不取出。 8 .再放入其他濃度待測溶液,繼續(xù)調(diào)0”及“100%”

6、,按前面的“校準(zhǔn)”步驟重新調(diào)整 直至穩(wěn)定,再測量其他濃度待測溶液的吸光度A。 9 .測量完畢,取出吸收池,各旋鈕置于原來位置,電源開關(guān)置于 關(guān)”,拔下電源插頭。 10 .比色皿用純水洗凈后倒置于濾紙上晾干。 (4)以吸光度為縱坐標(biāo),鐵含量(叱g, 50ml)為橫坐標(biāo),用軟件(excel或origin )繪制出 標(biāo)準(zhǔn)曲線。 編號 0# 1 # 2 # 3 # 4 # 5 # 6# V (鐵標(biāo)液)/mL 0.00 1.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 / \— 1 p (Fe) /閔? mL A

7、 2、試樣中鐵含量的測定 取3只潔凈的50mL容量瓶,分別加入適量(以吸光度落在工作曲線中部為宜)含鐵未知 試^5.00mL,按步驟(前面步驟 1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制)顯色,測量吸光度并記錄,由線性回 應(yīng)方程式求出相應(yīng)的鐵含量。(記錄格式參考下表)。 樣品 吸光度A 吸光度A平均值 樣品濃度 (ug/mL ) I 2 n m 六.注意事項 ( 1 )顯色過程中,每加入一種試劑均要搖勻。 ( 2 )試樣和工作曲線測定的實驗條件應(yīng)保持一致,所以最好兩者同時顯色同時測定。 七.思考題 ( 1) T 與 A 兩者關(guān)系如何?分光光度測定時,一般讀取 A 值,該值在標(biāo)尺上什么范圍好? 為什么?如何控制被測溶液的 A 值在此范圍內(nèi)?

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